目的 通过生物信息学分析和整合药物代谢动力学数据进行多重药物靶点预测,探究小柴胡汤治疗三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)的作用机制.方法 基于药理学数据库获取小柴胡汤的活性成分与对应靶点;采用加权基因共表达网络分析方法识别乳腺癌高通量测序数据中肿瘤发生发展的关键基因;采用GO功能与KEGG通路富集分析进行生物功能与通路注释;通过Cytoscape软件进行核心基因鉴定;利用分子对接方法模拟关键生物标志物与小柴胡汤核心活性成分的对接模式.结果 在对小柴胡汤进行数据挖掘后获得242个有效成分和265个对应靶点,通过加权分析方法得到乳腺癌密切相关的563个疾病关键靶点,小柴胡汤与TNBC共有13个交集靶点.小柴胡汤成分靶点网络构建得到槲皮素、山柰酚、异鼠李亭素、木犀草素、豆甾醇、β-豆甾醇、牵牛花色素等主要成分.PPI网络构建后通过筛选得到3个核心靶点(CCNA2、CCNB1、CHEK1)与2个关键化学成分(槲皮素、山柰酚).GO富集获得15个生物过程、45个细胞组分、16个分子功能,其中主要与细胞器裂变和细胞核分裂等细胞增殖过程,浓缩染色体和中心区核染色体,单链DNA结合ATP依赖活性等相关.KEGG通路富集得到了37条通路,主要富集在精氨酸等代谢通路上.分子对接模拟显示核心蛋白靶点与重要活性成分具有良好的结合活性.结论 小柴胡汤主要通过CCNA2、CCNB1、CHEK1等靶点,槲皮素、山柰酚等主要活性成分及细胞调亡、成纤维细胞形成和肿瘤细胞增殖及炎症进程达到干预TNBC的作用.
借助当前柔肝的定义,通过对与柔肝以及柔肝法相关的文字和肝藏象理论进行分析讨论,进一步探讨柔肝的含义以及柔肝法的实质.柔肝的含义是使"狭窄、紧迫、挛缩"的筋膜脉络等恢复原本正常生理状态下的"宽松、伸展"以及"可曲可伸"之性;柔肝法是治疗由外感、内伤等致病因素引起的肝体狭窄、紧迫、挛缩等的方法,其实质是一种缓解筋脉膜络狭窄、挛急的治法.凡能使肝体恢复柔和的治法以及通过柔和肝体来治疗其他脏腑疾病的治法皆可归入柔肝法的概念范畴.对柔肝的含义与柔肝法的实质进行探讨,在理论上和临床应用上均具有重要意义.
目的 观察痰瘀同治法对糖尿病心肌病变大鼠酪氨酸蛋白激酶/信号转导与转录激活子(Janus activated ki-nase/signal transducer and activator of transcription,JAK/STAT)信号通路的影响.方法 将模型复制成功的40只大鼠用随机数字表法分为模型组、化瘀组、化痰组、痰瘀同治组、阿拉氯胺(alagebrium chloride,ALT-711)组,另设10只大鼠作为空白组.化瘀组、化痰组与痰瘀同治组分别给予血府逐瘀汤、小陷胸汤、抵当陷胸汤,ALT-711组给予ALT-711.采用PCR法检测晚期糖基化终末产物受体(receptor for advanced glycation end products,RAGE)、过氧化物酶体增殖物激活受体γ(peroxisome proliferators activated receptorγ,PPARγ)基因表达水平,Western blot法检测RAGE、PPARγ、p-JAK1、p-STAT1和转化生长因子-β1(transforming growth factor-β1,TGF-β1)的蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组RAGE的基因和蛋白表达水平及p-JAK1、p-STAT1和TGF-β1蛋白的表达水平均显著升高(P<0.05),PPARγ的基因和蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,各用药组RAGE的基因和蛋白表达水平及p-JAK1、p-STAT 1和TGF-β1蛋白的表达水平均显著下调(P<0.05),PPARγ基因和蛋白表达水平均显著升高(P<0.05);且痰瘀同治组的RAGE基因和蛋白表达水平及p-JAK1、p-STAT 1和TGF-β1蛋白的表达水平较化痰组和化瘀组降低更显著(P<0.05),PPARγ基因和蛋白表达水平升高更显著(P<0.05).结论 痰瘀同治能抑制JAK/STAT信号通路,减少TGF-β1的表达,从而实现对糖尿病心肌病变大鼠心肌的保护作用.
目的 观察电针"足三里"和"内关"穴对肠易激综合征(irritable bowel syndrome,IBS)大鼠内脏高敏感的调节机制.方法 将40只新生SD大鼠随机分为模型制备组(n=32)和空白组(n=8),采用"母婴分离结合醋酸灌肠"复制内脏高敏感大鼠模型,将模型复制成功的内脏高敏感大鼠随机分为模型组、假刺激组、电针组,每组8只.假刺激组大鼠仅电刺激非经非穴部位,空白组及模型组大鼠仅抓取,不做其他干预;电针组大鼠给予电针同侧足三里和内关穴,每次30 min,隔日1次,共4周.观察各组大鼠一般情况,体质量,粪便性状评分,内脏痛阈值,血清白细胞介素-17A(interleukin-17A,IL-17A)水平,结肠组织中芳香烃受体(aryl hydrocarbon receptor,AHR)、细胞色素P1(cytochrome P1,CYP1)、核因子-κB(nuclear factor-κB,NF-κB)P65蛋白表达水平.结果 与空白组比较,模型组大鼠粪便性状评分显著增加(P<0.05),体质量显著下降(P<0.05),内脏痛阈值显著降低(P<0.05),血清IL-17A水平显著升高(P<0.05),结肠组织AhR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平均显著降低(P<0.05);与模型组比较,电针组大鼠粪便性状评分显著减少(P<0.05),体质量显著增加(P<0.05),内脏痛阈值显著增加(P<0.05),血清IL-17A水平显著降低(P<0.05),结肠组织AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白表达水平显著上升(P<0.05).结论 电针"足三里"和"内关"穴能降低IBS大鼠的内脏高敏感,其作用机制可能通过激活NF-κB/AHR通路,上调AHR、CYP1、NF-κB P65蛋白的表达而实现的.
目的 观察健脾补肺化痰方对支气管哮喘缓解期小鼠肠道微生物群的影响.方法 通过卵白蛋白联合Al(OH)3致敏雾化建立缓解期哮喘模型,将模型复制成功的小鼠随机分为模型组、健脾补肺化痰方组、孟鲁司特钠组,每组8只,分别予以生理盐水、健脾补肺化痰方溶液、孟鲁司特钠溶液,另设空白组8只.采用肺通气功能试验检测第1秒用力呼气量/用力肺活量、用力呼气量为25％～75％肺活量时的平均流量/用力肺活量;苏木精—伊红染色观察肺组织与结肠组织的病理变化;夹心酶联免疫吸附试验检测血清、粪便中组胺水平;采用16 S rDNA高通量测序对肠道菌群进行检测.结果 与空白组比较,模型组小鼠结肠组织与肺组织存在病理改变,肺通气功能显著下降(P<0.05),血清中组胺水平明显升高(P<0.05),粪便中组胺水平与拟杆菌门(Bacteroidetes)、放线菌门(Acti-nobacteria)、普氏菌科(Prevotellaceae)群落丰度降低(P<0.05),厚壁菌门(Firmicutes)、毛螺菌科(Lachnospiraceae)群落丰度明显升高(P<0.05).与模型组比较,健脾补肺化痰方组结肠组织与肺组织的病变得到缓解,肺功能提高(P<0.05),血清中组胺水平下降(P<0.05),粪便中组胺水平与拟杆菌门、放线菌门、普氏菌科、紫单胞菌科(Por-phyromonadaceae)群落丰度升高(P<0.05),厚壁菌门和毛螺菌科群落丰度下降(P<0.05).拟杆菌门、厚壁菌门、放线菌门与肺功能、组胺水平具有相关性.结论 健脾补肺化痰方可通过调节肠道菌群及其代谢产物组胺治疗缓解期支气管哮喘.
