猪肝微粒体的制备与活性测定

为了获得高活性的猪肝微粒体用于药物代谢研究,试验采用钙沉淀法制备猪肝微粒体,考马斯亮蓝法测定肝微粒体蛋白浓度,可见光-紫外分光光度法测定肝微粒体细胞色素P450酶系含量.结果表明:猪肝微粒体的蛋白含量为(10.653±0.256)mg/g,细胞色素P450含量为(0.903±0.021) nmol/mg,细胞色素b5含量为(0.429±0.038)nmol/mg,氨基比林-N-脱甲基酶活性为(0.226 ±0.010)μmol/(min·mg),红霉素-N-脱甲基酶活性为(0.055±0.008)μmol/(min·mg),NADPH-细胞色素C还原酶活性为(4.658±1.170) nmol/(min·mg).说明钙沉淀法制备的猪肝微粒体具有较好的活性,所用的可见光-紫外分光光度法灵敏、可靠,重复性较好.