Исследованы коагулянтные свойства препарата на основе хитозана в условиях in vitro и при пероральном ежедневном введении в течение 14 сут здоровым крысам (100 мг/кг). В этот период у крыс установлено усиление свертываемости крови: снижение фибринолитического потенциала, активности плазмина и увеличение степени полимеризации фибрина, а также повышение агрегации тромбоцитов, что сохранялось и через 7 сут после прекращения введения препарата. Рассмотрены возможные механизмы действия производного хитозана на процессы гемостаза и фибринолиза.

Установлено регуляторное влияние лизинсодержащих пептидов Arg-Lys-Lys-Arg-Pro-Gly-Pro (RKKRPGP) и Lys-Arg-Lys-Pro-Gly-Pro (KRKPGP) на процессы свертывания крови животных. Многократное в течение 7 сут через каждые 24 ч пероральное или интраназальное введение пептидов в ежедневной дозе 100 мкг/кг массы тела крыс приводило к снижению антитромбоцитарной активности на 29 – 49 %, активности фактора XIIIa — на 15 – 49 %. При этом повышалась антикоагулянтная активность плазмы крови крыс по тесту активированного частичного тромбопластинового времени на 16 – 33 %, по тесту тромбинового времени — на 23 – 57 %. Кроме того, под влиянием пептида KRKPGP снижалась концентрация свертываемого тромбином фибриногена на 47 – 49 %. Поскольку оба пептида при пероральном и интраназальном применении в разной степени проявляли в здоровом организме антитромбоцитарную, антикоагулянтную активность и снижали активность фактора свертывания ХШа, сделан вывод, что лизинсодержащие пептиды участвуют в регуляции свертывания крови и могут считаться перспективными антитромботическими веществами.

Background: The previous studies have shown that Tumor Educated Platelets (TEPs) RNA may complement currently used biosources and biomolecules employed for liquid biopsy diagnosis. RT-PCR is a regular method to measure gene expression levels to stage the patients and evaluate their prognosis. As there are little research on reference mRNA in platelets, especially in cancer. Aims: Our study is to find the proper internal controls for RT-PCR in platelet study. Methods: Firstly, based on dataset GSE68086, we found 285 genes with relatively equal expression in 4 kinds of high incidence cancer (non-small cell lung cancer (NSCLC), colorectal cancer (CC), breast cancer (BC) and liver cancer (LC)) and healthy control (HC). 95 genes left after screening with the criteria of mean>1 and coefficient of variation (cv) <1. Secondly, we gained 73 common reference genes from previous reported studies. Thirdly, we obtained 7 candidate reference genes (ACTB, B2 M, GAPDH, GNAS, OAZ1, PTMA and YWHAZ) after intersected the 95 genes and 73 genes. At last, we extracted total RNA from 1.5 ml blood in 30 unselected persons, including 6 NSCLC, 6 CC, 6 LC, 6 BC, and 6 HC, and performed RT-PCR with equal quantity of RNA to measure the expression levels of the candidate reference genes. Results: All of 7 candidate reference genes performed well in 5 tested groups with a cv<0.1. Both B2 M and GAPDH were the most stably expressed with a cv<0.05, but the expression of B2 M was much higher than GAPDH in platelets.Summary/Conclusion: We have found 7 platelets mRNA with relatively same expression levels among several solid tumors and healthy people, which can be used as reference genes for mRNA measuring of platelets. Among them, B2 M may be the best reference control gene.

Цель исследования: изучение влияния регуляторных пептидов глипролинового ряда на состояние системы гемостаза в условиях in vivo на модели крыс с экспериментальным метаболическим синдромом (МС). Материалы и методы. Эксперимент проводили на 60 беспородных белых крысах-самцах с массой тела 200±10 г в возрасте 2 месяца к началу опыта (к началу кормления высококалорийным рационом — ВКР). Развитие экспериментального МС у животных вызывали содержанием их на ВКР с избыточным содержанием углеводов и насыщенных жиров. Исследовали влияние интраназального многократного (7 раз) введения в малых дозах (50 мкг/кг) регуляторных пептидов Pro-Leu-Pro, Pro-Leu-Pro-Ala, Pro-Gly-Pro-Ala и Phe-Pro-Leu-Pro-Ala животным с МС на систему свертывания крови и фибринолиз. Результаты. Через 20 часов после последнего введения пептидов наблюдалось усиление антикоагулянтной и суммарной фибринолитической активности плазмы, обусловленной как повышением неферментативного, так и ферментативного фибринолиза плазмы, а также снижение агрегации тромбоцитов. Все исследованные пептиды обладали пролонгированным действием и способностью активировать функцию противосвертывающей системы. Заключение. Максимальный противосвертывающий эффект проявляли два пептида — Pro-Leu-Pro-Ala и Phe-Pro-Leu-Pro-Ala, причем в период после отмены их применения достоверность и значимость их эффектов возрастали. Aim: to study the eff ect of glyproline regulatory peptides on hemostasis in vivo in the model of experimental metabolic syndrome (MS) in rats. Materials and methods. The experiment was carried at 60 outbred white male rats with a body weight of 200±10 g and 2 months age at the beginning of the experiment (at the beginning of feeding with a high caloric diet — HCD). The development of experimental MC in animals was caused by HCD with an excess of carbohydrates and saturated fats. We examined the effects of intranasal repeated (7 times) administration of regulatory peptides Pro-Leu-Pro, Pro-Leu-Pro-Ala, Pro-Gly-Pro-Ala and Phe-Pro-Leu-Pro-Ala in low doses (50 μg/kg) on blood coagulation and fibrinolysis in animals with MC. Results. We revealed the enhancement of anticoagulant blood activity and total fibrinolytic activity caused by increasing of non-enzymatic and enzymatic fibrinolysis, and decreasing of platelet aggregation 20 hours after the last peptides administration. All studied peptides had prolonged action and the ability to activate anticoagulant system. Conclusion. Peptides Pro-Leu-Pro-Ala and Phe-Pro-Leu-Pro-Ala showed the maximum anticoagulant effect, and after stopping of their application the reliability and signifi cance of their effects increased.