Исследовалась окислительная модификация человеческого гемоглобина Hb, обработанного пероксидом водорода. Методом масс-спектрометрии были детектированы окисленные аминокислотные остатки молекулы гемоглобина α Trp14, α Tyr24, α Arg31, α Met32, α Tyr42, α His45, α His72, α Met76, α Pro77, α Lys90, α Cys104, α Tyr140, β His2, β Trp15, β Trp37, β Met55, β Cys93, β Cys112, β Tyr130, β Lys144, β His146. Обсуждается антиоксидантный потенциал молекулы Hb во внутриклеточном пространстве и при его попадании в плазму крови.
Fe2+ ions were immobilized for the first time onto the films of model carboxyl-containing styrene copolymers supported on ozone-treated glass and fiberglass. All studied materials were proved to be polymer film components of Fenton catalyst initiating various radical reactions. The topography and chemical composition of initial surfaces and corresponding polymer surfaces with immobilized Fe2+ ions were studied by atomic force microscopy and X-ray photoelectron spectroscopy. Treated FeSO4 samples contain Fe2+ and Fe3+ ions being at equal concentrations.
Перекрестное сшивание под действием плазменного фибринстабилизирующего фактора (FXIIIa) фибриновых полипептидных -цепей, вызывающее их превращение в - -димеры, является важнейшей ферментативной реакцией ковалентной стабилизации фибрина. Мы исследовали самосборку растворимых перекрестно сшитых олигомеров фибрина. Методами аналитического ультрацентрифугирования, упругого и динамического светорассеяния установлено, что образующиеся при умеренных концентрациях мочевины двуцепочечные олигомеры фибрина, ковалентно сшитые только за счет образования - -димеров, способны диссоциировать на одноцепочечные структуры в условиях повышения концентрации мочевины. Это является доказательством образования - -димеров по типу “конец в конец”.
Electronic excitation energy transfer (EEET) between molecules of carbocyanine dyes bound noncovalently with human serum albumin (HSA) has been studied. 3,3′-Di-(gamma-sulfopropyl)-9-methylcarbocyanine betaine has been used as an electronic excitation energy donor and 3,3′-di-(gamma-sulfopropyl)-4,5,4′,5′-dibenzo-9-ethylthiacarbocyanine betaine, as an acceptor dye. EEET has been studied both in samples of HSA solutions and in systems containing protein-coated magnetic nanoparticles. Stable coatings of magnetic nanoparticles, consisting of a mixture of HSA and bovine serum albumin, have been formed by the method of free radical linking of protein molecules adsorbed on the surface of the particles. The effect of HSA denaturation on the spectral and fluorescent properties of the dyes and EEET has been studied, and the data on donor fluorescence quenching by the acceptor have been obtained. It has been concluded that HSA retains its functional properties in the linked coating, thereby providing evidence for biocompatibility of the coatings obtained by free-radical oxidative protein modification.
Получены наночастицы магнетита с устойчивыми покрытиями из бычьего и человеческого сывороточного альбумина. Для закрепления покрытий использован свободнорадикальный способ сшивания белков, основанный на их свойстве формировать межцепочечные ковалентные связи под действием свободных радикалов, в генерации которых участвуют ионы металлов переменной валентности на поверхности наночастиц. Впервые для описания свойств покрытий использован метод спектрально-флуоресцентных зондов с применением красителей различных классов. Продемонстрирована целесообразность использования полиметиновых и скварилиевых красителей для оценки функциональных свойств белков в составе покрытий при исследовании процессов адсорбции и свободнорадикального сшивания белка на наночастицах. Показано, что до 50% макромолекул, входящих в состав альбуминового покрытия, сшитого по свободнорадикальному механизму, сохраняют способность к связыванию с флуоресцентным красителем. Сделан вывод о сохранении белком нативных функциональных свойств в составе покрытий.