[目的]研究干扰雄性小鼠睾丸Cloc k基因后,对小鼠胚胎着床及后期胎鼠发育的影响,并从甲基化的角度探讨引起胎鼠发育异常的原因.[方法]将成年雄性小鼠分为干扰组和对照组,分别于睾丸中注射干扰质粒和阴性质粒,与经过促排处理的雌鼠合笼,研究比较两组胚胎着床情况,观察两组胎鼠的外形及体重等指标的差异;观察胎鼠组织结构,比较两组是否存在差异;分析胎鼠总甲基化水平,同时测定甲基转移酶(DNMTs)水平,比较两组是否存在差异.[结果]:①与对照组比较,干扰组胚胎着床数下降(14.5 vs.20.33),胎儿体重减轻,死胎和异常胎数增多(P<0.05).②干扰组胎鼠的心脏和脊柱发育分节出现异常.③11.5～16.5 dpc阶段胎鼠总甲基化水平,干扰组较对照组显著降低(8.59 vs.18.25);干扰组甲基转移酶DNMT3B-4的相对IOD值低于对照组(0.124 vs.0.141),有统计学意义.[结论]干扰雄性小鼠睾丸Clock基因,可导致胚胎着床数下降,胎鼠发育异常增多,体重减轻.甲基转移酶DNMT3B-4水平下调及总甲基化水平下降,可能是影响胎鼠发育异常的原因.本研究表明Clock基因与胎鼠发育密切相关,初步探讨引起不育的机制,为揭示该类疾病发病机制提供依据.

目的 研究雄鼠睾丸Clock基因沉默后,小鼠精子顶体酶的活性及功能.方法 在ICR小鼠睾丸内注射Clock干扰质粒干扰雄性小鼠睾丸节律基因Clock的表达,研究:(1)进行体外受精,观察精子驱散卵丘颗粒细胞情况及受精率等;(2)检测精子顶体内顶体蛋白酶、透明质酸酶活性及芳香基硫酸酯酶A (ASA)的含量.(3)将精子注射入卵母细胞,观察受精卵及胚胎发育情况.结果 睾丸Clock基因沉默后,精子驱散卵丘颗粒细胞时间延长,受精率下降;精子顶体蛋白酶活性下降;透明质酸酶活性和ASA含量无明显变化;干扰组精子对卵母细胞及胚胎发育的影响小于未干扰组(P＜0.05).结论 干扰睾丸Clock基因表达后,影响精子顶体蛋白酶活性,从而影响雄性小鼠的生殖功能.