利用口蹄疫病毒(Foot and mouth disease virus type O,FMDV-O)VP1 特异性蛋白为抗原,杂交瘤细胞 7E3分泌单克隆抗体,建立一种检测FMDV-O型的阻断酶联免疫吸附试验(Enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)方法.对ELISA反应条件进行优化:抗原包被浓度为 48.4 g/mL,单抗稀释度为 28.0 g/mL,羊抗鼠酶标二抗(Sheep anti-mouse enzyme-conjugate secondary antibody,IgG-HRP)最佳稀释度为 1 g/mL,底物液反应时间为 37℃避光显色 15 min.ELISA结果的判定标准为:血清阴断率＜57％判为阳性,血清阻断率≥57％判为阴性.本研究建立的ELISA方法能与FMDV-O型阳性血清进行特异性反应,而与水泡性口炎病毒(Vesicular stomatitis virus,VSV),口蹄疫亚洲I型病毒(Foot and Mouth Disease virus type Asia1,FMDV-Asia1),羊痘病病毒(Sheep pox virus,QRF),口蹄疫A型病毒(Foot and mouth disease virus type A,FMDV-A),蓝舌病病毒(Bluetongue virus,BTV),小反刍兽疫病毒(peste des petits ruminants virus,PPRV),赤羽病病毒(Akabane virus,AKV)的阳性血清无交叉反应性.ELISA的重复性试验表明,批间和批内的变异系数均小于10％.比较试验结果表明,该ELISA的相对敏感性和特异性分别为88.9％和 100％,与金迈诗口蹄疫O型液相阻断ELISA抗体检测试剂盒的符合率为 93.75％.综上所述,本试验建立的口蹄疫病毒O型阻断ELISA抗体方法具有特异、稳定、灵敏的优点,为建立标准化的检测试剂盒奠定了基础.

蓝舌病(bluetongue,BT)是由蓝舌病病毒(bluetongue virus,BTV)引起的一种烈性传染病,主要通过易感动物移动、易感动物聚集、病毒基因重配以及强大的传播媒介等4个因素在全球长时期传播流行.自20世纪初发现BT以来,BT持续在全球流行,欧洲是重灾区;BTV血清型复杂,全球各大洲均有多种血清型分布流行,目前已陆续鉴定出29个BTV血清型.进入21世纪后,受全球气候变暖、畜产品贸易等因素影响,BT全球流行范围继续扩大.面对严峻的BT流行形势,需要采取加强进出口检疫和易感动物流动监管,建设无规定动物疫病生物安全隔离区,以及实施有效的预防接种制度等综合措施.

2006年8月荷兰暴发的蓝舌病8型(BTV-8)疫情已蔓延至欧洲大陆,而国内目前尚未发现BTV-8感染的报道.为评估BTV-8传入国内的风险,采用定性评估方法,通过收集BTV-8疫源地国家的疫情信息数据,结合其病原学特征、传播媒介、分布及流行情况、传染源、传播途径和易感动物等方面的研究内容进行传入风险分析.鉴于我国与欧洲BTV-8疫源地各国的畜产品贸易以及活动物、精液和胚胎交易频繁,贸易数量巨大,而且BTV-8还可以通过家养动物与野生动物接触以及库蠓等媒介传播,综合分析认为BTV-8传入国内的风险较高.建议加强边境口岸检验检疫,以及牛羊等反刍动物及库蠓的BTV-8监测,防范BTV-8传入国内,并做到传入时早发现、早控制.

本文对流行性出血病的病原、流行病学、疫苗等的研究进展进行概述,以期为探索特异性强、灵敏度高、高效经济的诊断方法和开发疫苗研究提供参考.

为了针对不同实际检测情况选择出合适的口蹄疫检测方法,本文从抗原和抗体检测两方面,并结合OIE手册和中国国家标准(GB/T 18935-2018),总结了13种检测方法的优缺点.不同检测方法在灵敏度、准确度、稳定性、专一性、经济性、时效性以及操作难易度等方面各有不同.

为研制流行性出血病病毒(epidemic hemorrhagic disease virus,EHDV)ELISA抗体检测试剂盒,用饱和硫酸铵浓缩EHDV灭活病毒作为包被抗原,以EHDV鼠源单克隆抗体作为阻断抗体,商品化的IgG-HRP羊抗鼠二抗作为检测抗体,通过优化检测试剂中各组分含量和反应程序,建立了一种EHDV阻断ELISA抗体检测方法.用研制的试剂盒与ID Screen参考试剂盒分别检测实验室保存的血清样本,结果发现该方法的特异性、敏感性与ID Screen参考试剂盒一致,二者符合率为97.00％.结果表明,研制的EHDV阻断ELISA抗体检测试剂盒可作为EHDV抗体检测的候选试剂盒,代替国外试剂盒使用,从而降低EHDV检测成本,这对该病防控具有重要意义.

<正>1预防1.1坚持自繁自养的原则,不从疫区引进仔猪,严把引进关,严禁从有病的地区和猪场购进猪只。新购进的猪需检疫隔离观察20天确认无病后才能