采用酶联免疫吸附法(ELISA)与高效液相色谱法(HPLC)分别测定玉米中黄曲霉毒素B1(AFB1)含量,对两者的检测结果进行对比分析.结果表明,两种方法对AFB1 的判定结果一致,证明本实验室采用的酶联免疫试剂盒是准确的,ELISA操作简单快速,适用于AFB1 的快速筛选,高效液相色谱法耗时长、成本高,更适用于疑似样品的确证及精确定量.

为对比不同ELISA试剂盒评价口蹄疫O型、A型二价灭活苗免疫效果的差异,选取市面上3种不同厂家生产的口蹄疫ELISA检测试剂盒,同时检测3个免疫不同口蹄疫O型、A型二价灭活苗羊场的抗体水平.结果显示:3种试剂盒检测不同场口蹄疫O型抗体合格率均在70％以上,符合率为72.41％～100％;S2试剂盒检测3个场的A型抗体合格率均高于70％,S1和S3试剂盒各有2个场的合格率低于70％,且3种试剂盒符合率较低,为48.28％～68.97％.结果表明,不同ELISA试剂盒评价口蹄疫免疫效果存在一定差异,其中检测A型抗体试剂盒差异显著(P<0.05);3种ELISA试剂盒均可用于口蹄疫O型抗体检测,但并不全适合于A型抗体检测.本试验为相关实验室选择合适试剂盒提供了依据.

本研究旨在获得高纯度巴泰病毒(Batai virus,BATV)G1蛋白强抗原性肽段,并建立一种用于检测BATV羊血清抗体的间接ELISA方法.首先对G1蛋白51个氨基酸编码的189-239位氨基酸强抗原肽段进行密码子优化,基因合成后构建重组表达质粒pET-32a-G1189aa-239aa,转化大肠杆菌BL21感受态细胞进行诱导表达.优化表达条件获得大量rHis-G1189aa-239aa肽段,利用镍柱亲和层析方法进行纯化,并用BCA试剂盒进行蛋白浓度的测定.通过Western blotting对rHis-G1189m-239aa肤段进行抗原特异性分析,以rHis-G1189aa-239aa肤段为抗原,羊BATV阳性血清作为抗体,通过方阵滴定优化反应条件,建立BATV间接ELISA检测方法.SDS-PAGE结果显示,rHis-G1189aa-239aa肤段在大肠杆菌中主要以包涵体形式存在,分子质量为24.5 ku,在0.1 mmol/L的IPTG诱导5 h后rHis-G1189aa-239aa肽段表达量达到峰值.通过镍柱亲和层析纯化后,测得蛋白浓度为0.296 mg/mL.Western blotting结果显示,rHis-G1189aa-239aa肽段特异性较好.以rHis-G1189aa-239aa肤段为抗原建立的间接ELISA方法,通过条件优化确定最佳抗原包被浓度为2.5 μg/mL,血清和二抗稀释度为1 ∶ 60和1 ∶ 10 000.样品D450nm值≥0.367为阳性,D450nm值≤0.319为阴性.该方法与山羊痘病毒和布鲁氏杆菌的阳性血清均无交叉反应,批内和批间的变异系数均＜10％,阳性血清最高可稀释至1 600倍,该方法具有特异性强、灵敏性高和重复性好的特点.利用本方法对云南地区的120份羊血清样本进行检测,血清阳性率为21.67％.本研究获得了特异性强和纯度较高的rHis-G1189aa-239aa肽段,建立了间接ELISA方法,可应用于羊BATV血清流行病学调查,为疫病防控及致病机制研究奠定基础.

羊传染性脓疮皮炎是一种高度接触传染的羊养殖常见病,我国各省区均有该病的流行报道.任何年龄的羊都可以感染该病,发病率在3.2％～17.7％之间.所以我国的养殖户必须要做到该病的防治工作,进而保证自身的养殖效益.本文结合羊传染性脓疮皮炎的流行特点,紧抓防疫要点,并且总结了相关的综合防治措施,希望为相关养殖户提供一定的参考.

随着社会的发展,大量禽畜养殖场不断建立,但由于管理技术不到位,牲畜发病概率很高,一场疫病会给农场主带来难以承受的损失,如果让染病肉类流入市场,还可能威胁到人类安全,牲畜疫病防治应受到社会重视.而在这场和牲畜疫病的斗争中,兽医扮演着主要角色.本文从兽医视角出发,对国内牲畜疫病的防治现状进行分析总结.

在生猪养殖的过程中,对猪病进行有效的检测,加强防控,能够保证猪肉制品的质量与安全,也能推动养猪业的发展.但是,在实际的养殖过程中,借助检疫设备开展疾病检查的检测效果较低,不能够对疾病进行有效的预防与防治.因此,本文将探讨猪病检测与养殖场疾病防控,了解其意义,根据猪病感染的特征,提出有效的防控措施.

针对猪伪狂犬病的带毒现象日趋严重,采用猪伪狂犬病乳胶凝集试验方法和猪伪狂病毒gE蛋白ELISA监测方法,每年2次对建水县、蒙自市部分群猪进行血清病原学和流行病学调查及免疫效果跟踪调查.结果表明,2008～2012年阳性率平均达24.48％ (59/241),阳性率逐年有所降低.种公猪发病率达3.17％ (28/883)；繁殖母猪发病率达13.91％(189/1358)；新生仔猪发病死亡率16.22％ (128/789),发病率逐年有所降低.临床流行病学调查结果与血清学监测结果基本相吻合.

为全面掌握防疫质量和免疫效果,科学制定免疫程序,使家禽长期保持有效免疫状态,红河州自2004年开始采用血凝抑制试验方法(HI),每年2次在全州范围内开展了鸡新城疫免疫抗体监测和流行病学调查及免疫效果跟踪调查。结果表明,2008—2012年免疫抗体合格率平均达92.20%(10806/11719),免疫抗体合格率逐年有所提高;发病率平均达18.05%(3250/18000),死亡率平均达9.5%(1720/18000),发病死亡率逐年降低。