目的:按照ISO15189文件的要求对孕酮定量检测项目进行性能验证,评价其方法学性能是否能够用于临床检测工作.方法:根据ISO15189文件和其他标准,对孕酮项目的精密度、正确度、可报告范围、生物参考区间进行方法学性能验证,并根据公认的标准对试验结果进行判断,以证实检测系统的性能可靠稳定.结果:(1)低水平和高水平重复性精密度均小于1/4允许总误差;低水平和高水平中间精密度均小于1/3允许总误差.(2)平均偏倚小于1/2允许总误差.(3)可报告范围验证＜ 0.1n g/ mL～16n g/ mL区间,验证
目的 通过验证不同生理周期健康女性性激素六项的生物参考区间,证实实验室所选用的参考区间能够符合本地人群特征.方法 明确健康女性不同的生理周期并筛选合适的参考人群,实施性激素六项参考区间的小样本验证,判断生物参考区间的适用性.结果 (1)卵泡早期E2有18例数据通过;(2)卵泡中期E2有18例数据通过;卵泡中期P有18例数据通过;卵泡中期FSH有18例数据通过;卵泡中期LH有18例数据通过;(3)排卵高峰期E2有20例数据通过;(4)黄体中期E2有20例数据通过;黄体中期P有18例数据通过;黄体中期FSH有
急性胰腺炎为临床发病率较高疾病,属急腹症,依据病情严重程度分为重型和轻型两种类型[1].且随疾病进展,会合并多种并发症,有高达30％急性胰腺炎会进展为重症急性胰腺炎[2].如果没有有效治疗,则会加重病情,甚至会出现多器官功能衰竭,对患者预后产生不利影响[3].因此,临床应探究合适诊断方法,血清学指标可对患者病情判断有帮助,目前临床对其关注度越来越高[4].对急性胰腺炎应用血淀粉酶诊断,可在一定程度上反映患者病情,但诊断价值不是很高,这就影响了疾病诊断准确度[5].
该文通过对临床基因扩增实验室在运行ISO15189质量管理体系时的重点与难点进行详细陈述,为同行进一步提升临床基因扩增实验室的管理效率、提高检验质量提供参考.陈述的内容主要包括以下几个方面:质量管理体系的建立与文件的实施;人员管理;实验室资质、设施环境的管理;实验室质量控制;生物安全、个人防护等.
To study whether the position change of IL18,HBsAg,and P6(NP6) in vector pcDNA3.1 affect the protein expressing.IL-18 was respectively connected with amino terminal and carboxyl terminal of fusion protein P6-S(NP6-S) to construct 4 plasmids: pc-IL18-P6-S,pc-IL18-NP6-S,pc-S-P6-IL18,and pc-S-NP6-IL18.The recombinant plasmids were analyzed by DNAstar,and then transformed into CHO cells.The expressed proteins were characterized by indirect immunofluorescence and Western blotting.Then we can determine which is the best connection.It was certified that IL18 should be connected with amino terminal of fusion protein by DNAstar.However we drew the opposite conclusion by indirect immunofluorescence.The result indicate that IL18 should be connected with carboxyl terminal of fusion protein,which offers the basic conditions for constructing new type of polygenic DNA vaccine.
目的：研究串联重组核酸疫苗pc（pcDNA3.1）-S（HBsAg）-P6-IL18和pc（pcDNA3.1）-S（HBsAg）-NP6-IL18对机体的免疫效果,P6是我们前期采用噬菌体展示技术筛选出的HSV-2gD的模拟抗原表位,NP6为与HSV-2gD模拟抗原表位P6最相似的天然抗原表位序列。方法：分别将空质粒pcDNA3.1（阴性对照组）和构建的真核表达质粒pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18肌内注射免疫接种BALB/c小鼠3次,每次间隔2周。末次免疫后2周眼眶静脉采血,ELISA法检测小鼠血清特异性抗体滴度、IFN-γ及IL-18含量;末次免疫后一月,处死小鼠,无菌分离脾脏,用刀豆蛋白A刺激淋巴细胞,采用MTT法测定脾淋巴细胞增殖率。结果：重组核酸疫苗pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18免疫小鼠后可刺激血清特异性抗体（抗HBsAg抗体和抗HSV-2gD模拟表位抗体）的产生,与阴性对照组相比可诱导分泌较高水平的IFN-γ和IL-18,可促进小鼠脾淋巴细胞的增殖。结论：重组核酸疫苗pc-S-P6-IL18和pc-S-NP6-IL18能诱导较强的细胞免疫和体液免疫,可用于今后预防HBV和HSV-2感染的研究。
目的:探讨腹腔镜胆囊切除术中转开腹的影响因素及中转时机。方法:回顾性分析2010年1月-2011年12月年笔者所在医院收治的1582例行腹腔镜胆囊切除术患者的临床资料,其中中转开腹37例,对37例患者中转开腹的原因、影响因素及结局进行分析。结果:中转开腹与患者体温、右上腹肌紧张、胆囊壁厚度、胆囊颈部结石嵌顿、胆囊肿大有明显相关性,同时与术中胆囊Calot解剖不清、胆囊十二指肠瘘、合并门脉高压、术中胆管损伤、术中大出血有关系。结论:腹腔镜胆囊切除术是治疗胆囊疾病的首选方式,术前对患者进行详细检查及评估,术中及时中转开腹减少并发症,提高手术成功率。
目的 利用简并引物PCR法及重叠PCR法构建HBsAg(S),HSV-2gD模拟抗原表位P6及天然抗原表位NP6,IL-18真核表达载体,并对其表达能力进行鉴定,为后期疫苗的研制奠定基础.方法 采用简并引物PCR法扩增IL-18-P6(包括P6-IL-18)片段及IL-18-NP6(包括NP6-IL-18)；根据GenBank(FJ589066.1)公布的S基因设计引物,扩增获得含有重叠区的S片段(包括S1,S2,S3,S4)；采用重叠PCR法扩增三基因融合片段IL-18-P6-S,IL-18-NP6 S,S-P6-IL-18和S-NP6-IL-18,经纯化回收后将其克隆到原核载体pMD 18-T simple vector中,测序正确的目的片段插入真核表达载体pcDNA3.1(-),构建重组质粒pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcD-NA3.1-S-NP6-IL-18,采用间接免疫荧光法检测靶基因的表达情况.结果 成功构建了含有双抗原的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18.脂质体介导真核表达载体转染CHO细胞,间接免疫荧光法检测细胞浆中有黄绿色荧光.结论 构建的真核表达载体pcDNA3.1-IL-18-P6-S,pcDNA3.1-IL-18-NP6-S,pcDNA3.1-S-P6-IL-18和pcDNA3.1-S-NP6-IL-18能在CHO细胞中有效表达.
