Предложена новая методика получения аффинных сорбентов на основе лигандов – тирамина и триптамина. Для полученных хроматографических материалов были исследованы сорбционные характеристики. Показано, что триптамин-сефароза и тирамин-сефароза эффективно связывают IgG, IgA, липопротеид (а) (Lp(a)) и липопротеиды низкой плотности (LDL) из плазмы крови. Сорбционная емкость (мг/мл геля) составила IgG – 4–9, IgA – 2–4, Lp(a) – 3–5 и LDL – 5–7. Обнаружено, что Lp(a) и IgG могут связываться с сорбентом как независимо, так и в виде комплекса Lp(a) с IgG, существование которого может говорить о наличии у некоторых пациентов аутоантител к Lp(a). Новые сорбенты просты в синтезе, стабильны при использовании и хранении, могут применяться в медицинских и биотехнологических целях для связывания Lp(a), LDL, IgG, IgA.

Получены гемосовместимые аффинные сорбенты на основе полисахаридной матрицы и лигандов – пептидов WY, WTY, WNY, связывающиe иммуноглобулины G человека (IgG). Проведено сравнение характеристик сорбентов по связыванию как общего IgG так и подклассов IgG. Обнаружено, что все новые сорбенты имеют хорошие характеристики по удалению IgG из плазмы крови, но сорбент на основе WNY в полтора раза эффективней остальных связывает IgG подкласса 3 (IgG3). Определены физико-химические характеристики процесса связывания IgG. Для сорбентов на основе пептидов WY, WTY, WNY константы десорбции IgG составили 10 ± 3, 28 ± 4 и 13 ± 3 мкМ. Максимальная расчетная сорбционная емкость по IgG составила 43 ± 2, 45 ± 3 и 46 ± 3 мг IgG на 1 мл сорбента. Показана гемосовместимость сорбентов, пригодность для медицинского использования.

Для сорбции IgE из плазмы крови человека синтезированы три аффинных сорбента на основе полисахаридной матрицы с использованием ДНК-аптамеров в качестве лигандов. Cорбенты показали высокую сорбционную эффективность: в зависимости от ориентации ДНК-аптамеров на матрице экспериментальные значения констант сорбции IgE составили 0.11–0.17 нМ. Показана стабильность разработанных аффинных сорбентов при многократном использовании и подобраны условия их регенерации.

The article deals with specification of technique of immune-enzyme analysis to detect autoantibodies to beta-adrenergic receptors (beta1-AP) using compound of oligopeptids representing the fragmentations of extracellular sites beta1-AP and chimeric molecule of extracellular section of receptor This technique significantly exceeds the analogues defined in publications by its sensitivity and correlation with diagnosis.

New chromatographic material based on tryptophil-threonil-tirosine was prepared. This sorbent effectively binds human, sheep, goat and cow immunoglobulins G. New sorbent shows high selectivity for removing immunoglobulins from blood plasma. Effective sorption capacity is 15-25 mg of immunoglobulin G per ml of matrix. Optimal method of covalent attachment ligand to polysaccharide matrix allows achieving high stability of the sorbents in terms of use and storage. This sorbent can be used in medicine and biotechnology.

Получен хроматографический материал на основе триптофилтреонилтирозина, эффективно связывающий иммуноглобулины G человека, барана, козла и быка. Показана высокая селективность сорбента при извлечении иммуноглобулинов из плазмы крови. Эффективная сорбционная емкость составляет 15–25 мг иммуноглобулина G на 1 мл матрицы. Оптимизация метода ковалентного присоединения триптофилтреонилтирозина к полисахаридной матрице позволила достичь высокой стабильности сорбентов в условиях использования и хранения. Данный сорбент может найти применение в медицине и биотехнологии.

It is established that atherosclerotic patients with impaired major arteries of the head have high concentration of blood lipoprotein (a) following ischemic disorder of cerebral circulation. Irrespectively of the clinical picture, atherosclerosis of the major head arteries correlated in severity with blood levels of lipoprotein (a). It is suggested that lipoprotein (a) can serve an essential biochemical marker of major head arteries atherosclerosis.

Lipoprotein (a) [L(a)] is an atherogenic lipoprotein, its human plasma concentration correlates with the occurrence of coronary heart disease. The procedure for selectively removing L(a) with an anti-L(a) immunosorbent was performed to treat 3 patients who had high L(a), normal total cholesterol and other lipoprotein levels. All the patients had coronary stenosis as documented by angiography. After L(a)-apheresis, the level of L(a) decreased by 72%, while that of other plasma components, including low density lipoproteins virtually unchanged. Thus, the procedure of L(a)-apheresis is an effective and safe method for lowering human blood L(a) concentrations. In addition, this in vivo model allows information on L(a) metabolism to be obtained.

Three methods for purification of lipoprotein (a) [Lp(a)] from human plasma were compared. Method I: two-stage ultracentrifugation with subsequent gel-filtration of Lp(a) containing fractions (1.063-1.090 g/ml) on Sepharose CL-4B. Method II: ultracentrifugation followed by affinity chromatography of plasma fraction (1.063 g/ml) on anti-apoB sorbent. Method III: affinity chromatography of the whole plasma on anti-apo(a) sorbent. The Lp(a) yield of these methods is 35, 54 and 41%, respectively. The method III is preferable of these three because it permitted high purification of a large amount of Lp(a) by single-step chromatography.