Предложена новая методика получения аффинных сорбентов на основе лигандов тирамина и триптамина. Для полученных хроматографических материалов были исследованы сорбционные характеристики. Показано, что триптамин-сефароза и тирамин-сефароза эффективно связывают IgG, IgA, липопротеид (а) (Lp(a)) и липопротеиды низкой плотности (LDL) из плазмы крови. Сорбционная емкость (мг/мл геля) составила IgG 49, IgA 24, Lp(a) 35 и LDL 57. Обнаружено, что Lp(a) и IgG могут связываться с сорбентом как независимо, так и в виде комплекса Lp(a) с IgG, существование которого может говорить о наличии у некоторых пациентов аутоантител к Lp(a). Новые сорбенты просты в синтезе, стабильны при использовании и хранении, могут применяться в медицинских и биотехнологических целях для связывания Lp(a), LDL, IgG, IgA.
A new procedure for the preparation of affinity sorbents based on tyramine and tryptamine ligands has been proposed. Sorption characteristics for the developed chromatographic materials were investigated. It was shown that tryptamine-sepharose and tyramine-sepharose efficiently bind IgG, IgA, lipoprotein (a) (Lp(a)) and low density lipoproteins (LDL) from blood plasma. The sorption capacity was 4–9 mg of IgG, 2–4 mg of IgA, 3–5 mg of Lp(a), and 5–7 mg of LDL per mL of gel. It was found that Lp(a) and IgG can bind to the sorbent either as themselves or as a complex of Lp(a) with IgG, the existence of which may indicate the presence of autoantibodies to Lp(a) in some patients. New sorbents are easy in synthesis, stable during use and storage, and they can be used for medical and biotechnological purposes to bind Lp(a), LDL, IgG, and IgA.
Получены гемосовместимые аффинные сорбенты на основе полисахаридной матрицы и лигандов пептидов WY, WTY, WNY, связывающиe иммуноглобулины G человека (IgG). Проведено сравнение характеристик сорбентов по связыванию как общего IgG так и подклассов IgG. Обнаружено, что все новые сорбенты имеют хорошие характеристики по удалению IgG из плазмы крови, но сорбент на основе WNY в полтора раза эффективней остальных связывает IgG подкласса 3 (IgG3). Определены физико-химические характеристики процесса связывания IgG. Для сорбентов на основе пептидов WY, WTY, WNY константы десорбции IgG составили 10 ± 3, 28 ± 4 и 13 ± 3 мкМ. Максимальная расчетная сорбционная емкость по IgG составила 43 ± 2, 45 ± 3 и 46 ± 3 мг IgG на 1 мл сорбента. Показана гемосовместимость сорбентов, пригодность для медицинского использования.
New chromatographic material based on tryptophil-threonil-tirosine was prepared. This sorbent effectively binds human, sheep, goat and cow immunoglobulins G. New sorbent shows high selectivity for removing immunoglobulins from blood plasma. Effective sorption capacity is 15-25 mg of immunoglobulin G per ml of matrix. Optimal method of covalent attachment ligand to polysaccharide matrix allows achieving high stability of the sorbents in terms of use and storage. This sorbent can be used in medicine and biotechnology.
Получен хроматографический материал на основе триптофилтреонилтирозина, эффективно связывающий иммуноглобулины G человека, барана, козла и быка. Показана высокая селективность сорбента при извлечении иммуноглобулинов из плазмы крови. Эффективная сорбционная емкость составляет 1525 мг иммуноглобулина G на 1 мл матрицы. Оптимизация метода ковалентного присоединения триптофилтреонилтирозина к полисахаридной матрице позволила достичь высокой стабильности сорбентов в условиях использования и хранения. Данный сорбент может найти применение в медицине и биотехнологии.
Chromatographic material based on tryptophil-threonyl-tyrosine and efficiently binding human, sheep, goat, and bovine immunoglobulin G was obtained. High selectivity of the sorbent for extraction of immunoglobulins from blood plasma has been demonstrated. Effective sorption capacity is 15–25 mg of immunoglobulin G per 1 ml of the matrix. Optimization of the method of triptophyl-threonyl-tyrosine covalent binding to the polysaccharide matrix allowed the achievement of high sorbent stability in conditions of use and storage. This sorbent may be used in medicine and biotechnology.
На основе фрагментной конденсации в растворе или на полимере Меррифилда разработаны два варианта синтеза тридекапептида аллоферона - действующего вещества противовирусного препарата аллокин-альфа. Показано, что твердофазный вариант синтеза более технологичен и позволяет получить продукт с более высоким суммарным выходом (40 для твердофазного и 17% для классического синтеза в расчете на исходные производные С-концевого дипептида). Идентифицированы побочные продукты, образующиеся в процессе синтеза аллоферона.
Two variants of the synthesis of tridecapeptide alloferon, the active principle of antiviral preparation allokine-alpha, were developed on the basis of fragment condensation in solution or on the Merrifield resin. The solid phase variant of the synthesis was shown to be more technological; it allows the preparation of the product at a higher total yield (40% vs. 17% for conventional synthesis in solution from the starting derivatives of the C-terminal dipeptide). The by-products formed during the synthesis of alloferon were identified.