为了明确重庆市某规模猪场舍内环境中葡萄球菌的病原特性及耐药情况,试验采用空气细菌培养自然沉降法和物体表面采样法采集猪场舍内环境样本 20 份,进行葡萄球菌的分离纯化,提取分离株基因组DNA,扩增 16S rRNA基因序列,构建系统进化树,检测其生化指标,确定敏感药物,并分析病原菌耐药基因的携带情况.结果表明:分离纯化得到2 种革兰氏阳性球菌,分别与头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌相似性较高(均为 99%),在系统进化树中也分别与其聚为一簇,两种菌的硝酸盐还原、MR-VP和甘露醇等7 种指标检测结果均为阳性,确定为头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,均对多西环素、复方新诺明和阿奇霉素耐药;头状葡萄球菌携带vanA、rpoB、ermB和tetM 4 种耐药基因,沃氏葡萄球菌携带ileS、rpoB、blaZ、ermC、aacA-aphD、tetK和tetM 7 种耐药基因,两种菌均含有rpoB和tetM基因,并证实头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌的耐药类型与耐药基因具有相关性.说明该猪场舍内环境中存在头状葡萄球菌和沃氏葡萄球菌,在生猪养殖和人畜共患病防控方面应加强对环境中病原微生物的监测.

In order to understand the effect of different disinfectants on disinfection of pig farms.In this study,different disinfectants and different disinfection time were used to disinfect pig farms,so as to evaluate the disinfection effect of the disinfectants and provide a basis for biosafety prevention and control of pig farms.In this study,16S rRNA technology was used to identify common bacteria in the environment of pig farms,and then potassium persulfate,disinfectant and titanium oxide,commonly used disinfectants in pig farms,were selected as experimental drugs.The total number of bacteria in the environment after disinfection was taken as the research index to investigate the disinfection effects of different disinfectants. The experimental results showed that: Escherichia coli, Pseudomonas proteus and Staphylococcus cephalis are common bacteria in pig farm environment.Used potassium hydrogen sulfate and disinfection spirit and new materials such as titanium oxide disinfection disinfection disinfection,within 7 d after settlement of gestation crates air bacterium total reduced to some extent,potassium hydrogen sulfate and disinfection disinfectant in disinfection of spirit after 3,7 d growth trend,the new titanium oxide in disinfection disinfection materials within 7 d after decreasing the total number of bacteria,Compared with that before disinfection,the difference was very significant（P ＜ 0.01）.Conclusion: Potassium bisulfate,sanitizing and titanium oxide have certain disinfection effect, but the new disinfection material titanium oxide is more significant.

AbstractBackgroundQing Chang oral liquid (QOL) is a veterinary drug, which mainly composed of Artemisiae annuae herba, Dichroae radix, Agrimonia pilosa and Sanguisorbae radix.ObjectivesThis study aims to explore the effect of Qing Chang Oral Liquid (QOL) on the treatment effect of artificially infected chicken coccidiosis and to the cellular immunity.MethodsHealthy Roman chickens were randomly divided into five groups: blank group, model group, QOL high‐, medium‐ and low‐dose groups. All the groups were orally administered with 1 × 104 sporulated oocysts (except the blank group). After 5 days of oral administration, the high‐, medium‐ and low‐dose groups of QOL were added to the drinking water at 2.4, 1.8 and 1.2 ml/kg, respectively. The blank and model groups were fed normally, and this experiment lasted for 7 days. The clinical signs were observed, and the relative weight gain, survival rate, cecum lesion score and oocyst value were measured to evaluate the effect of QOL. Meanwhile, the peripheral blood T‐lymphocyte subsets and cecal IL‐2, IL‐17, IFN‐γ mRNA expression were detected by flow cytometry and fluorescent quantitative PCR.ResultsThe chickens in the model group were in poor mental state, gathered together, had loose stools or bloody stools and had less food intake and less exercise. The chicken mental state improved, the food intake and drinking water increased, and the faeces are normal in the high‐, medium‐ and low‐dose groups, especially in the high‐dose group, the anti‐coccidial indexes were up to 173.08. No significant differences were observed (p > 0.05) in the peripheral blood CD3+, CD3+CD4+ between the experimental groups. Compared with the blank group, there were different degrees of increase in each dose drug group of the cecal IFN‐γ, IL‐2 and IL‐17 mRNA expression, but the high‐dose group was significantly reduced compared with the model group (p < 0.01), but there was no significant difference (p > 0.05).ConclusionsThis study suggests that QOL has positive anti‐coccidial effect but has no obvious effect on the cellular immunity.

将60只健康罗曼粉鸡随机分为正常组和模型组,每组30只,模型组灌服1×104个孢子化卵囊进行人工复制鸡球虫病模型,正常组灌服等体积生理盐水,感染5 d,剖杀试验鸡,无菌采集鸡盲肠内容物,并通过Illumina PE250型高通量测序仪对肉鸡盲肠内菌群进行16S rDNA基因V3～V4可变区检测,对肠道菌群可操作分类单元(OTUs)数、α 多样性、β 多样性及差异菌门与菌属进行综合性分析与评价,探究柔嫩艾美耳球虫感染对鸡盲肠菌群结构和多样性的影响.结果表明:与正常组相比,感染柔嫩艾美耳球虫后鸡肠道菌群的OTUs数、Chao1指数极显著降低,Shannon指数显著降低,Simpson指数显著升高;门水平上,模型组变形菌门的相对丰度极显著升高,而厚壁菌门的相对丰度显著降低,拟杆菌门和柔膜菌门的相对丰度显著降低;属水平上,正常组的优势菌属为拟杆菌属、瘤胃菌属–UCG014、副拟杆菌属,而模型组瘤胃球菌属–uncultured、球藻菌属、埃希菌–志贺菌属相对丰度极显著升高.可见,艾美耳球虫破坏了盲肠菌群的完整性,促进潜在致病菌的建立和生长,尤其使埃希菌–志贺菌属大量繁殖,快速生长.

目的 建立一种壳聚糖稀释液的制备方法,并制备一种生物相容性较好、安全性高、可有效提高疫苗免疫效果的兽用疫苗稀释液,以用于草原牧区大规模动物免疫.方法 在酸性条件下溶解壳聚糖,向上清中滴加NaOH使已溶解的可溶壳聚糖析出,制备再生壳聚糖.用不同pH的0.2 mol/L磷酸-柠檬酸缓冲液、醋酸-醋酸钠缓冲液和磷酸盐缓冲液配制1％～5％的壳聚糖以及再生壳聚糖溶液,并在115℃条件下湿热灭菌.通过溶解特性以及外观等条件筛选最佳缓冲体系.利用不同浓度的可溶壳聚糖稀释液(soluble chitosan diluent,SCD)及再生壳聚糖稀释液(regenerated chitosan diluent,RCD)稀释山羊痘活疫苗,通过免疫山羊后的安全性及ELISA抗体水平筛选最佳稀释液配方,并建立最佳稀释液的制备流程.利用制备的稀释液稀释山羊痘活疫苗及猪瘟活疫苗并免疫动物,检测制备的稀释液的安全性及免疫增强作用.结果 筛选得到的最佳稀释液配方及其制备过程为:0.2 mol/L pH 4.0醋酸-醋酸钠缓冲液配制3％浓度的壳聚糖溶液,离心去除杂质后,上清滴加NaOH至沉淀完全析出;收集再生壳聚糖,用0.2 mol/L pH 4.6醋酸-醋酸钠缓冲液配制成2％浓度的再生壳聚糖溶液,115℃湿热灭菌30 min;用1 mol/L无菌醋酸钠溶液调pH至6.0并稀释至终浓度0.5％,即为0.5％ pH 6.0的RCD.使用该稀释液配制疫苗,仅免疫1次即可达到其他稀释液配制疫苗免疫2次后的抗体水平,免疫增强作用高于铝胶稀释液,同时具备与生理盐水一致的安全性.结论 本研究利用再生壳聚糖制备了性状优良、pH接近中性、生物相容性好的兽用疫苗稀释液.基于壳聚糖良好的抗原吸附及缓释特性,稀释液可在疫苗注射剂量不足的情况下达到理想的免疫效果,较为适合大规模动物免疫时使用.

旨在对重庆武隆区某鸡场种用鸡群进行禽白血病检测,并开展病原净化工作.分别采集鸡场种用鸡群的泄殖腔试子、鸡蛋和精液样本,利用ELISA检测技术对禽白血病感染性抗原进行检测,对比分析不同样本对检测结果的影响以及禽白血病在不同品种中的检出率,评价种用鸡群的禽白血病感染情况,并制定合理的病原净化措施.检测结果表明,该鸡场种用鸡群中存在禽白血病,总检出率为18.9％,其中,母鸡阳性率为16.88％,公鸡阳性率为30.07％.建议对该鸡场扩大检测规模,重点对种用鸡群不同世代进行禽白血病监测,及时淘汰阳性感染病例.

Herein, we report a novel Carnobacterium -like organism, CS13 T , isolated from the blood of sheep with persistent diarrhea from a grassland pasturing area in Xilingol League, Inner Mongolia Municipality, China. Homology analysis indicated that CS13 T belongs to the genus Carnobacterium and is 100% related to the reported environmental microorganism Carnobacterium antarticum sp. CP1 ( C. CP1 ), which was isolated from sandy soil near Davis Station, Antarctica; the following strains are closely related: Carnobacterium mobile DSM 4848 (97%) and Carnobacterium funditum DSM 5970 (96%). Similar to those of the C. CP1 , the short rod-shaped cells of CS13 T are 0.4-0.8 μm wide and 1.0-1.5 μm long; exist singly, paired or catenoid; are gram positive, non-spore forming, and facultatively anaerobic; and produce hemolysin. CS13 T cannot produce gas or H 2 S but can ferment sucrose, galactose, salicin, and esculin to produce acid. However, in contrast to C. CP1 , CS13 T can produce acid from cellobiose and maltose and is weakly positive for D-mannose fermentation; the growth temperatures range from 20-37°C, the pH range is 5.0-9.0, and the G+C content is 37.84% (4-36°C, pH 6.0-9.5, and 38.1% for C. CP1 ). Furthermore, based on gene annotation analysis, we found that CS13T has 31 more specific genes than C. CP1 (133 to 102) and that the nonredundant protein similarity to C. CP1 is only 84.2%. Based on the physiological-biochemical and genetic analysis results, we infer that the organisms isolated from the Mongolian Plateau and sandy soil in Antarctica belong to the same novel species of the genus Carnobacterium ; therefore, this novel species probably has distributed globally and should not be called species antarticum .

为阐明女黄扶正颗粒对大鼠体液免疫功能和抗氧化力的影响,将80只大鼠随机分为空白对照组、女黄扶正颗粒高、中、低剂量组,每组20只,女黄扶正颗粒高、中、低剂量组分别按照3 g/kg,2 g/kg,1 g/kg剂量给药,每天1次,连续灌胃14 d,空白对照组给相同剂量的生理盐水.试验结束时,Elisa法检测大鼠血清免疫球蛋白IgA,IgM,IgG和细胞因子IL-10,IL-6水平,同时检测血清中丙二醛(MDA)水平和过氧化物酶(POD)及超氧化物歧化酶(SOD)活力.结果显示:女黄扶正颗粒中剂量组大鼠血清IgG,IL-6质量浓度升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(p＜0.01);女黄扶正颗粒中剂量组大鼠血清IL-10质量浓度升高,与空白对照组相比,差异有统计学意义(p＜0.05);女黄扶正颗粒各剂量组大鼠血清SOD,POD活性及MDA浓度与空白对照组相比,差异无统计学意义(p＞0.05).表明一定剂量的女黄扶正颗粒可通过提高机体IgG,IL-6及IL-10质量浓度从而提高机体的体液免疫功能,但其抗氧化力不明显.

兔场环境监控助手是基于物联网、移动互联网等技术开发的一款手机APP,功能是实现兔场环境监控,辅助生产管理人员采集、查看兔场中的环境数据.以此为例从需求分析、界面设计规范、原型设计、交互式设计4个方面进行兔场环境监控助手APP界面设计,为兔场工作人员提供良好的人机交互接口,有效满足兔场工作人员体验需求,解决生产过程中出现的各类问题.

为了调查重庆某猪场大量仔猪腹泻死亡的病因,对该猪场仔猪进行临床症状观察、剖检及实验室诊断.临床观察发现,仔猪突发急性腹泻,先吐后拉症状(水样腹泻),发病2～3d后死亡.剖检发现胃黏膜充血,肠系膜淋巴结充血、水肿,小肠壁变薄,呈透明状,肠管膨胀,初步诊断为病毒性腹泻,抗原快速检测试剂盒诊断流行性腹泻抗原阳性,RT-PCR诊断为流行性腹泻.建议猪场加强消毒、保温、补液、疫苗紧急免疫等措施后,病情得以缓解,仔猪发病率和死亡率大幅降低.

依据《兽药研究技术指导原则汇编》中“兽药急性毒性试验指导原则”和“兽药30天和90天喂养试验指导原则”,研究中药女黄颗粒对小鼠的急性毒性和对大鼠的亚慢性毒性.药物组以16、4、1、0.5 g/kg的剂量一次性灌服女黄颗粒药液,观察7d并记录小鼠的表现及死亡情况,测定女黄颗粒的半数致死量(LD50);以90 g/kg的剂量灌服女黄颗粒药液,观察14 d并记录小鼠的反应及死亡情况,测定女黄颗粒的最大给药剂量;药物组以18、6、2 g/kg的剂量连续灌服女黄颗粒药液30d,期间观察大鼠的临床表现和体质量变化,试验结束时检测其血液学、血液生化指标和组织病理学指标,确定其亚慢性毒性.结果 表明:急性毒性试验中,女黄颗粒各剂量组均未发现小鼠死亡,无法测出女黄颗粒的LD50;最大给药量试验期间,小鼠临床表现正常,未发现死亡,女黄颗粒的最大给药量为90 g/kg;亚慢性毒性试验期间,大鼠精神状态良好,血液学、血液生化指标均在正常范围内,组织病理学检查未发现病变.可见,女黄颗粒毒性评价为实际无毒,临床用药安全性较高.

为贯彻落实党中央、国务院以及省委、省政府对新冠肺炎疫情防控工作的部署和要求,各地教育部门要求学校延迟春季开学时间,全面实施线上教育教学工作.通过问卷调查,对疫情期间新津职高线上教学开展情况、家长监督情况和学生学习情况等进行了全面了解,发现存在家长配合度低、终端设备受限、影响学生视力等问题,可通过统筹安排、整合资源、及时反馈、家校合力,提高线上教学效果.

[目的]明确柔嫩艾美耳球虫感染对罗曼粉鸡盲肠组织病理学和细胞免疫相关基因mRNA表达量的影响.[方法]将100只鸡随机分为空白组、感染Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组,每组20只,感染Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ和Ⅳ组分别口服3×104、2×104、1×104和0.5×104个孢子化鸡柔嫩艾美耳球虫卵囊,空白组口服相同体积的生理盐水.试验结束时,剖解试验鸡,采集盲肠制作病理切片,观察组织病理学变化并进行评分;采用荧光定量PCR方法检测盲肠IL-2、IL-17、TGF-β1和IFN-y基因mRNA表达量.[结果]感染Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ组试验鸡黏膜层破坏严重,出血明显,大量炎性细胞浸润,腺上皮细胞内见大量虫体,病理损伤评分为重度损伤;感染柔嫩艾美耳球虫第5、7天,感染组盲肠组织IL-2、IL-17、TGF-β1和IFN-γ基因mR.NA表达量均升高,与空白组相比差异极显著(P＜0.01).[结论]不同剂量的柔嫩艾美耳球虫可造成鸡盲肠组织不同程度损伤,且能上调盲肠组织IL-2、IL-17、TGF-β1和IFN-γ基因的表达.

为监测重庆兔管家科技发展有限公司的兔球虫感染情况,采用饱和氯化钠盐水漂浮法计数球虫卵囊.结果显示:球虫无感染占61.76％,轻度感染占38.24％,无中度感染和重度感染.说明重庆兔管家公司的兔场球虫病防控效果较好.

兔场环境监控助手是基于物联网、移动互联网等技术开发的一款手机APP,功能是实现兔场环境监控,辅助生产管理人员采集、查看兔场中的环境数据.以此为例从需求分析、界面设计规范、原型设计、交互式设计四个方面进行兔场环境监控助手APP界面设计,为兔场工作人员提供良好的人机交互接口,有效满足兔场工作人员体验需求,解决生产过程中出现的各类问题.

目的:探索复方中药女黄扶正提取液中女贞子的薄层鉴别方法.方法:采用超声提取女贞子标志性成分特女贞苷,经不同的萃取试剂萃取获得供试品溶液,以特女贞苷为对照品,将乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水按照不同的比例配制不同的展开剂,1％香草醛硫酸乙醇溶液和10％硫酸乙醇为显色剂进行薄层层析.结果:采用乙醚和正丁醇制备女黄扶正提取液供试品效果较好,展开剂为乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(6∶3∶0.5∶1),显色剂为1％香草醛硫酸乙醇溶液,可见光下检视,供试品在与对照品相应位置上显相同的紫色斑点,显色清晰.结论:女黄扶正提取液中女贞子的薄层鉴别方法,采用乙醚和正丁醇制备供试品溶液,乙酸乙酯-丙酮-甲酸-水(6∶3∶0.5∶1)为展开剂,1％香草醛硫酸乙醇溶液进行显色后,可见光下检视,在与对照品相应位置上显示相同颜色的紫色斑点.

微信公众号中的学习资源具有耗费流量较少、资源开发成本较低、信息传播速率快、师生互动性强等特点.本文在中职专业课教学中开展以"安全用电常识"一课为例的教学探索,在微信公众号制作整合发布课程学习资源,为学生创设一个移动学习环境,学生利用碎片化时间实现课前信息化导学、课中信息化助学、课后信息化拓学,并对教学效果进行了验证.

【目的】筛选出对鸡球虫病具有良好治疗效果的中兽药处方,以确保养鸡业的持续健康发展。【方法】将84羽患有球虫病且每克粪便球虫卵囊数（OPG）超过10~5个的病鸡随机分为7组（处方①～处方⑥及感染对照组）,每组12羽,另取12羽同日龄的健康仔鸡作为空白对照组。各处方处理组均按2.4 mL/kg的剂量给药,每天1次,连用7 d,感染对照组及空白对照组不投喂任何药物。试验期间观察球虫病鸡的临床表现,测定其生长性能、存活率、血便和盲肠病变计分、卵囊值及抗球虫指数（ACI）,并采集盲肠组织制作病理切片,综合评价中兽药处方对鸡球虫病的临床治疗效果。【结果】给药后,各处方处理组球虫病鸡精神状态明显好转,采食量增加,血便减少,尤其以处方①和处方③的恢复效果较好;在6个抗球虫中兽药处方中以处方③的平均日增重最高、料重比最低,除处方③外,其他处方处理组均有病鸡死亡;处方③的ACI为170.41,依据药物效果判定标准可知,处方③对球虫病鸡的治疗效果良好;病鸡盲肠组织病理切片观察结果显示,处方①和处方③的盲肠组织结构正常,上皮细胞排列有序,未见有明显的组织病理损伤,与空白对照组相比无明显差异。【结论】处方③（青蒿∶常山∶仙鹤草∶地榆=5∶2∶2∶1）对鸡球虫病的治疗效果良好,其ACI为170.41,且能有效改善球虫病鸡受损的盲肠组织,加快其肠道功能恢复。

非洲猪瘟(ASF)是由非洲猪瘟病毒(ASFV)引起所有品种及各年龄阶段的猪均易感染的一种高接触性传染病,该病具有高度接触传染性、高热、出血性和极高致死率等特性.本研究就非洲猪瘟及其检测技术进行综述.

[目的]考察不同剂量女黄颗粒对免疫抑制小鼠外周血T淋巴细胞亚群及细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γ表达量的影响,旨在明确女黄颗粒对小鼠免疫的调节作用.[方法]选取50只健康昆明小鼠,随机分为阴性对照组、模型组及女黄颗粒高、中、低剂量组,每组10只.除阴性对照组外,其他处理组均通过腹腔注射环磷酰胺(80 mg/kg,1次/d,连续5 d)建立小鼠免疫抑制模型;建模后,阴性对照组和模型组灌胃生理盐水,女黄颗粒处理组则分别按0.5、1.0和1.5 g/kg剂量灌胃女黄粒颗溶液(以水稀释),1次/d,连续7 d.采用流式细胞仪检测小鼠外周血T淋巴细胞亚群CD3+、CD4+和CD8+的百分率及CD4+/CD8+比值,以实时荧光定量PCR检测小鼠脾脏细胞因子IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γ的表达情况.[结果]经腹腔注射环磷酰胺后,小鼠的CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率及CD4+/CD8+比值较阴性对照组小鼠极显著降低(P<0.01,下同),小鼠脾脏IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γmRNA的相对表达量极显著下降.灌胃给药(女黄颗粒)后,CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率及CD4+/CD8+比值均有所升高,其中女黄颗粒高、中剂量组小鼠的CD3+、CD4+和CD8+T淋巴细胞百分率较模型组小鼠极显著升高;除女黄颗粒高剂量组小鼠脾脏IL-2 mRNA的相对表量较模型组小鼠极显著下降外,各女黄颗粒处理组小鼠脾脏IL-2、IL-4、TNF-α和IFN-γmRNA的相对表达量均呈上升趋势,尤其是女黄颗粒中剂量组小鼠脾脏IL-4、TNF-α和IFN-γmRNA的相对表达量均极显著高于模型组小鼠.[结论]女黄颗粒通过上调CD3+、CD4+、CD8+T淋巴细胞百分率及提高IL-2、IL-4、TNF-α、IFN-γ的相对表达量以增强免疫抑制小鼠的免疫功能,临床推荐使用剂量为1.0 g/kg.