为了研究油菜素内酯(brassinolide,BL)对甘蔗组织培养的影响,本研究以"植物器官从头再生""体细胞胚再生"2种组培快繁体系为基础,通过添加适宜浓度的2,4-表油菜素内酯(2,4-epibrassinolide,2,4-EBL)于基础培养基中,设计了6套适用于甘蔗快繁的组合培养基方案.并于不同诱导阶段(不定根诱导、愈伤组织诱导、成苗诱导)对接种材料的形态特征及内源植物激素(油菜素内酯、玉米素核苷、生长素、脱落酸)的含量变化进行了统计与测定,探讨了油菜素内酯应用于甘蔗组织培养快繁技术的可行性.结果表明,将不定根培养基MS+0.2 mg/L 2,4-D+0.2 mg/L LFS与成苗培养基MS+0.5 mg/L KT+(0.2 mg/L IBA/0.2 mg/L 2,4-EBL)+300 mg/L Pro进行组合,为甘蔗组培快繁的较优方案,油菜素内酯可应用于甘蔗组织培养快繁技术,且体细胞胚再生成苗优于愈伤组织再生成苗,成苗时间可缩短至32 d.

试验旨在评价淫羊藿提取物的安全性,为临床用药提供参考依据.试验选取20只小鼠进行急性毒性试验,未检测出半数致死量(LD50),另选取20只小鼠一次性灌服淫羊藿提取物(20 g/kg·BW)进行最大耐受量试验.将80只大鼠随机分为空白对照组,高、中、低剂量组(20、10、5 g/kg·BW),除空白对照组外,连续30 d灌服淫羊藿提取物并观察其变化.停药后继续观察7d.观察大鼠体征和体重变化,采集血液进行血液生理生化指标测定,并进行病理组织学检查.结果 显示,急性毒性试验各组小鼠均存活,体态无异常,未能测出LDs0,小鼠对淫羊藿提取物的最大耐受量为20 g/kg·BW.30 d喂养试验中,各给药剂量组大鼠体重、血液生理生化指标和脏器指数与空白对照组相比,均无显著差异(P＞0.05).剖检心脏、肝脏、脾脏、肺脏、肾脏、胃肠、睾丸、卵巢和子宫等组织器官未见异常变化,镜检未见明显的病理组织学变化.结果 表明,淫羊藿提取物属于无毒物质,对连续用药1个月的大鼠无毒性作用.

为明确三黄连散(SHLP)体内和体外抗炎效果,体外试验采用CCK-8法筛选三黄连散对RAW264.7细胞安全浓度,同时建立LPS诱导RAW264.7细胞的体外炎症模型,以评价药物效果;体内试验用二甲苯诱发小鼠急性炎症模型,测定小鼠耳郭肿胀度、脏器指数及小鼠血清TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-8和COX-2含量.结果显示,三黄连散对RAW264.7细胞的安全浓度为50μg/mL;高、中、低剂量的三黄连散能不同程度降低细胞IL-8、TNF-α、IL-β、COX-2的分泌水平(P<0.05,P<0.01);高剂量的三黄连散能极显著降低细胞上清液中NO的分泌水平(P<0.01);高、中、低剂量的三黄连散均可极显著降低模型小鼠耳郭肿胀和血清炎症因子IL-1β、IL-6、IL-8、TNF-α和COX-2分泌水平(P<0.01);不同浓度三黄连散对小鼠脏器系数无显著影响(P>0.05).综上表明,三黄连散体内外抗炎效果显著.

[目的]制备特异性识别对硫磷(PA)的单克隆抗体,建立其间接竞争酶联免疫吸附分析方法(ic-ELISA),为实现对硫磷的农残快检提供技术支持.[方法]以化合物4-(二乙氧基硫代磷酸酯基)苯甲酸为半抗原,分别与牛血清白蛋白(BSA)和卵清白蛋白(OVA)偶联制备人工抗原,免疫7周龄Balb/c雌性小鼠,取抗血清效价最高、特异性最优小鼠的脾脏细胞与SP2/0骨髓瘤细胞进行细胞融合,采用间接酶联免疫方法(i-ELISA)及ic-ELISA分别评价融合细胞株的阳性和特异性,通过有限稀释法筛选稳定分泌对硫磷抗体的单克隆细胞株.再通过棋盘格试验筛选出抗原抗体最佳工作浓度组合建立对硫磷ic-ELISA标准曲线,并基于对硫磷单克隆抗体与各结构类似物的交叉反应率,评估ic-ELISA的特异性.采购西红柿样品进行对硫磷的添加回收试验,运用气相色谱法(GC)验证ic-ELISA的准确性.[结果]成功合成对硫磷人工抗原PA-BSA和PA-OVA,经5次免疫后融合小鼠的血清效价为8×103;通过有限稀释法筛选获得灵敏度高、特异性最强的对硫磷单克隆细胞株4F11A10.以2μg/mL包被抗原PA-OVA、0.25μg/mL细胞株4F11A10分泌抗体为最佳抗原抗体工作浓度组合,建立对硫磷ic-ELISA及其标准曲线,其半抑制浓度(IC50)为50 ng/mL,检测范围(IC20～IC80)为2.34～300 ng/mL;所建立的对硫磷ic-ELISA与5种有机磷农药(丙溴磷、杀扑磷、倍硫磷、水胺硫磷和甲拌磷)均无交叉反应.对比ic-ELISA和GC测定西红柿样品中对硫磷的添加回收试验结果,发现ic-ELISA的添加回收率为84.86％～100.27％,GC的添加回收率为97.60％～106.40％,两种方法的检测结果一致性较好.[结论]建立的ic-ELISA可用于快速检测蔬菜、水果等农产品中的对硫磷残留.

为评价苦白石颗粒对仔猪白痢的治疗效果,选取85头7日龄～21日龄自然患白痢的仔猪进行临床试验研究.设苦白石颗粒高、中、低剂量组,苦参止痢颗粒组,感染对照组和空白对照组.各试验组病例于用药前进行肠道致病性病原菌的分离鉴定,开始给药及连续给药5d后,根据症候分级标准和疗效判断标准,观察、记录猪的临床症状和体重.结果显示,从25份检测样品中分离出23株大肠埃希菌,其中2株O157、2株O55和1株O44,对小鼠有致病力;用药5d后,苦白石颗粒高、中、低剂量组和苦参止痢颗粒药物对照组仔猪的症候积分均显著低于感染对照组(P＜0.05),与空白对照组差异不显著(P＞0.05);苦白石颗粒高、中、低剂量组和苦参止痢颗粒药物对照组仔猪的平均增重显著高于感染对照组(P＜0.05),中剂量组仔猪的平均增重显著高于空白对照组(P＜0.05);苦白石颗粒高、中剂量组的治愈率为85％,低剂量组治愈率为80％,均高于苦参止痢颗粒的75％.结果表明,苦白石颗粒中剂量组对仔猪白痢具有较好的治疗效果.

[目的]明确淫羊藿提取物对红螯螯虾生长性能的影响并对其安全性进行评价.[方法]将150尾健康红螯螯虾随机分为5组:空白对照组,淫羊藿提取物临床推荐剂量1倍、3倍、5倍和10倍给药组.4个不同剂量给药组饲料中分别添加0.1％、0.3％、0.5％、1.0％淫羊藿提取物,每组设3个平行,每个平行10尾,分箱饲养.混饲给药7d,观察临床症状,测定红螯螯虾形态学参数、血液生理生化指标以及肝胰腺指数.[结果]与空白对照组比较,淫羊藿提取物在临床推荐剂量10倍范围内,对红螯螯虾增重率、特定生长率、肥满度均无显著(P＞0.05)影响;1倍和3倍临床推荐剂量的淫羊藿提取物能极显著(P＜0.01)提高红螯螯虾血细胞总数,极显著(P＜0.01)降低血清谷丙转氨酶(ALT)活性,极显著(P＜0.01)提高总蛋白(TP)水平;1倍临床推荐剂量的淫羊藿提取物能显著(P＜0.05)降低大颗粒细胞比例.各剂量给药组红螯螯虾血清TG、BUN、T-CHO水平以及肝胰腺指数与空白对照组比较均无显著(P＞0.05)差异,肝胰腺组织学结构均正常.[结论]淫羊藿提取物在临床推荐剂量的3倍量范围内连续给药7d,对靶动物红螯螯虾是安全的.

为进一步探讨海藻多糖可溶性粉作为饲料添加剂在猪的规模化生产中大面积应用的临床效果及安全性,选取35～50日龄临床自然感染猪圆环病毒2型(PCV2)仔猪150头,随机分为3组,每组50头,分别设供试药物组(在饲料中添加海藻多糖可溶性粉200 mg/kg,连用7 d)、药物对照组(在饲料中添加黄芪多糖粉200 mg/kg,连用7 d)和阳性对照组(不处理).于用药前1 d、用药后第7天和第14天每组随机选择10头试验猪测定血清中猪白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-6(IL-6)、干扰素-γ(INF-γ)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)等细胞因子和免疫球蛋白G(IgG)水平.结果表明,在临床自然感染猪圆环病毒2型(PCV2)的仔猪日粮里添加200 mg/kg海藻多糖可溶性粉能升高猪血清中IL-2、IL-6、TNF-α、IFN-γ和IgG水平;试验期间,在仔猪日粮中添加200 mg/kg海藻多糖可溶性粉连用7 d无不良反应出现.由该试验结果可以得出,海藻多糖可溶性粉能够提高猪的免疫功能,临床使用是安全的.

为评价苦白石颗粒对靶动物(猪)的安全性,为临床应用提供依据.将苦白石颗粒按临床推荐剂量的1、3、5、10倍剂量连续拌料给药5d.从喂药第1天开始,连续观察14 d;测定给药前、给药后第7天和第14天试验猪的体重、血液常规指标、血液生化指标.结果 表明,苦白石颗粒按临床推荐剂量1、3、5、10倍剂量应用,猪的体重、血液常规指标、血液生化指标等与对照组相比较差异均不显著(P＞0.05).表明苦白石颗粒按临床推荐剂量的1倍～10倍范围内应用,对靶动物(猪)是安全的.

为进一步验证苦白石颗粒对仔猪白痢的治疗效果和安全性,本试验选择7～18日龄具有较典型的仔猪白痢临床症状的仔猪102头,以发病顺序随机分为苦白石颗粒组和苦参止痢颗粒组,按照临床推荐剂量连续灌喂3～5d,观察临床症状,统计症状积分.结果显示,用药后3～5d,各组临床症状明显改善,腹泻减少或停止;根据症状积分变化趋势发现,苦白石颗粒组用药后第2d的止痢效果明显.本试验结果表明,苦白石颗粒连续用药3～5d对于仔猪白痢具有显著的临床效果,临床用药安全且止痢见效快.