目的 探究核因子κB(NF-κB)抑制剂(BAY11-7082)联合核因子E2相关因子2(Nrf2)抑制剂(ML385)对人结肠癌细胞HCT116的作用机制.方法 体外培养人结肠癌细胞HCT116,将细胞分为4组:空白对照组、NF-κB抑制剂组、Nrf2抑制剂和联合组.空白对照组以RPMI-1640培养基进行培养,NF-κB抑制剂组以10μmol·L-1 BAY 11-7082干预,Nrf2抑制剂组以5μmol·L-1 ML385干预,联合组以10μmol·L-1 BAY 11-7082+5μmol·L-1 ML385干预,干预时间为24 h.MTT法检测人结肠癌细胞HCT116增殖抑制率,以流式细胞术和Hoechst 33342染色法检测细胞凋亡状况,以蛋白质印迹法检测凋亡相关蛋白及Nrf2、NF-κB通路相关蛋白表达水平.结果 ML385、BAY 11-7082均能显著抑制人结肠癌细胞HCT116增殖(均P<0.05);干预24 h,空白对照组、Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组的细胞凋亡率分别为(1.77±0.60)％,(19.41±1.87)％,(21.55±2.33)％和(39.84±1.22)％;这4组的B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)的相对表达量分别为1.00,1.53±0.28,1.43±0.30和3.47±0.70;这4组的生存素蛋白的相对表达量分别为1.00,0.60±0.11,0.32±0.10和0.32±0.12;这4组的X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)的相对表达量分别为1.00,0.50±0.11,0.19±0.06和0.25±0.04.空白对照组、Nrf2抑制剂组和NF-κB抑制剂组的NF-κB蛋白的相对表达量分别为1.00,0.71±0.10和0.44±0.06;这3组的IκB蛋白分别为1.00,0.37±0.15和0.33±0.13;这3组的Nrf2蛋白分别为1.00,0.14±0.09和0.75±0.08.Nrf2抑制剂组、NF-κB抑制剂组和联合组与空白对照组比较,上述指标的差异均有统计学意义(均P<0.05).结论 NF-κB抑制剂联合Nrf2抑制剂可协同诱导人结肠癌细胞HCT116凋亡,该效应可能与下调Survivin和XIAP的表达、上调Bax表达有关.

目的 筛选喉鳞状细胞癌(laryngeal squamous cell carcinoma,LSCC)预后相关免疫核心基因并构建预后风险评分模型.方法 利用癌症基因组图谱(The Cancer Genome Atlas,TCGA)数据库中LSCC转录组测序信息,筛选差异表达基因,并与已知免疫相关基因取交集,筛选LSCC中预后相关免疫核心基因.利用单因素Cox回归构建风险评分模型并采用Kaplan-Meier法验证风险评分模型与LSCC患者预后的关系,同时绘制受试者工作特征(receiver operating characteristic,ROC)曲线验证该模型准确度.结果 LSCC组织和癌旁组织中共有6800个差异表达基因,通过单因素Cox分析并与已知免疫相关基因取交集,从差异表达基因中筛选出34个预后枢纽基因.基于免疫核心基因构建风险评分模型,高危险组患者总生存期短于低危险组患者(P<0.01),风险评分模型预测LSCC患者预后的ROC曲线下面积为0.930.结合临床病理学参数分析发现,患者性别是LSCC预后的保护因素,N分期晚期和高风险评分为LSCC预后的危险因素(均P<0.05),而患者年龄和T分期与LSCC预后无关(均P>0.05).结论 LSCC中存在多个免疫核心基因异常表达,且与患者预后相关,基于其构建的风险评分模型可较好预测患者预后.

目的 基于网络药理学、分子对接技术结合体外实验,探讨益气解毒方及其活性成分槲皮素抑制鼻咽癌增殖的可能机制.方法 运用TCMSP、BATMAN-TCM、GEO、GeneCards、OMIM、TTD、PharmGkb等数据库检索益气解毒方的化学活性成分及鼻咽癌的作用靶点;STRING数据库构建可视化PPI网络;关键作用靶点进行GO和KEGG富集分析;采用分子对接验证槲皮素的可能靶点TP53、MYC、MDM2和AKT1;采用CCK-8法和RTCA法检测益气解毒方及主要活性成分槲皮素抑制鼻咽癌细胞CNE-2增殖的效应;采用Western blot检测药物对细胞增殖及PI3K/Akt信号通路关键蛋白表达的影响.结果 筛选得到益气解毒方有效化学成分197种,得到潜在共同作用靶点173个,核心基因为TP53、JUN、MAPK3、MYC等;KEGG分析主要富集在PI3K/Akt、MAPK等信号通路;分子对接结果示槲皮素与TP53、AKT1、MDM2、MYC均具有良好的结合位点;体外实验证实益气解毒方及槲皮素能抑制细胞增殖;药物能下调增殖相关蛋白XIAP、PCNA、Survivin及PI3K/Akt信号通路蛋白PI3K、AKT1、p-AKT1、mTOR的表达水平;激活PI3K/Akt信号通路后,槲皮素抑制细胞增殖的效应被削弱.结论 益气解毒方及主要活性成分槲皮素可能通过下调PI3K/Akt信号通路抑制鼻咽癌细胞增殖.

结直肠癌(CRC)是全球第三大常见恶性肿瘤,已严重威胁人类健康.尽管近年来在结直肠癌的治疗方面已经取得一定进展,但是迫切需要找到能够早期诊断和有效治疗患者的新靶标,故针对肿瘤前后微环境的分子作用机制和关键控点进行系统研究,是研究结直肠癌防治的重点.对核因子κB(NF-κB)和核因子E2相关因子2(Nrf2)信号通路转导与结直肠癌发生发展的关系,以及它们之间错综复杂的交互作用(Crosstalk)进行综述,以期进一步了解结直肠癌发生发展机制,最后归纳中医药以其为靶点防治结直肠癌的已有研究成果,为结直肠癌的中医药防治提供思路与方向,为相关药物研发与应用提供参考依据.

目的 研究益气解毒方水提物对结肠癌HCT116细胞凋亡及B细胞淋巴瘤-2相关X蛋白(Bax)、X连锁凋亡抑制蛋白(XIAP)、生存素(Survivin)和NF-κB信号通路相关蛋白表达的影响.方法 采用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度(1,0.5,0.25,0.125 g·L-1)益气解毒方水提物对HCT116细胞活性的影响;采用Hoechst 33342染色法及流式细胞术检测其对HCT116细胞凋亡的影响;采用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测其对HCT116细胞凋亡相关蛋白Bax、XIAP、Survivin及NF-κB通路相关蛋白NF-κB、IκK、IκB的影响.结果 MTT结果提示益气解毒方水提物能抑制HCT116细胞活性,呈时间-剂量关系(P<0.01);与对照组比较,Hoechst 33342染色及流式细胞术结果显示益气解毒方水提物处理后,凋亡率升高(P<0.01);XIAP、Survivin表达下降(P<0.01),Bax表达上升(P<0.05,P<0.01),NF-κB、IκK、IκB表达均下降(P<0.05,P<0.01).结论 益气解毒方水提物可抑制结肠癌HCT116细胞增殖,诱导其凋亡,其机制可能与抑制NF-κB信号通路相关蛋白NF-κB、IκK、IκB表达,下调XIAP、Survivin表达,上调Bax表达有关.