旨在建立检测猫疱疹病毒Ⅰ型(Feline herpesvirus 1,FHV-1)、猫杯状病毒(Feline calicivirus,FCV)、支气管败血波氏杆菌(Bordetella bronchiseptica,Bb)多重TaqMan荧光定量PCR方法.基于FHV-1的胸苷激酶(TK)基因、FCV的衣壳蛋白VP1基因、Bb的皮肤坏死毒素基因(DNT1)序列保守区域设计并合成TaqMan荧光定量PCR引物和探针,以FHV-1、FCV、Bb、猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌为模板验证引物和探针的特异性.制备重组质粒pMD18T-FHV-TK、pMD18T-FCV-VP1、pMD18T-Bb-DNT1作为标准品,经矩阵法确定最佳反应体系.以10倍梯度稀释的标准品为模板检测方法的灵敏性.应用建立的方法对32份临床具有上呼吸道感染症状的猫眼、口、鼻拭子检测,以评估该方法的可行性.结果显示:该方法可特异性检出FHV-1、FCV、Bb,且与猫细小病毒、沙门菌、金黄色葡萄球菌无交叉反应;灵敏度试验表明该方法对FHV-1、FCV、Bb的最低检出限分别为10、10和100拷贝/μL;应用该方法从32份猫临床样品中检测出FHV-1阳性11份、FCV阳性21份、Bb阳性4份,并经PCR测序验证.本研究初步建立了 FHV-1、FCV、Bb多重TaqMan荧光定量PCR检测方法,具有特异性强、敏感性高的特点,为临床猫上呼吸道疾病病原的分子检测提供参考.

为了探究蒲公英散及其水提物对奶牛临床型乳房炎疗效,试验将12头健康奶牛作为对照组(A组),试验过程中不给予任何药物;将24头临床型乳房炎奶牛随机分为蒲公英散灌服组(B组,灌服蒲公英散,每头每天250 g)和乳房灌注蒲公英散水提物组(C组,乳房灌注蒲公英散水提物,每头每天100 mL),1次/d,连续给药7 d,观察至第12天.给药后根据乳房或患病乳区的临床症状、产奶量、泌乳和乳汁质量判断治愈情况,统计治愈率、有效率和无效率;分别在试验第1,4,7,12天检测试验奶牛的产奶量、乳汁体细胞数和炎性因子[肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-8(IL-8)、白细胞介素-1β(IL-1β)]的质量浓度.结果表明:B、C组治疗的有效率分别为41.67％和75.00％,治愈率分别25.00％和58.33％.B、C组奶牛乳汁体细胞数及乳清IL-1β、IL-6、IL-8和TNF-α质量浓度在试验第1,4,7,12天均极显著高于A组(P＜0.01),但随用药时间延长呈下降趋势;而B、C组产奶量在试验第1,4,7,12天均极显著低于A组(P＜0.01),并随用药时间延长呈上升趋势.C组产奶量在试验第4,7,12天极显著高于B组(P＜0.01);B、C组奶牛乳汁体细胞数在试验第1天均极显著高于A组(P＜0.01),而C组在试验第4,7,12天极显著低于B组(P＜0.01).C组乳清IL-1β质量浓度在试验第1,4,7,12天均极显著低于B组(P＜0.01),IL-6、IL-8和TNF-α质量浓度在试验第4,7,12天均极显著低于B组(P＜0.01).说明蒲公英散及其水提物对奶牛临床型乳房炎具有良好的治疗效果,且乳房灌注蒲公英散水提物治疗效果更优.

[目的]探究热应激对不同泌乳阶段奶牛应激、抗氧化和肝功能相关指标的影响,以期为不同泌乳阶段奶牛更有效预防热应激提供理论支持.[方法]选择四川省某规模化奶牛场热应激期泌乳牛856头和非热应激期泌乳牛896头,按泌乳天数分为新产(0～21 d)、泌乳前期(22～120 d)、泌乳中期(121～200 d)和泌乳后期(201～305 d),分别随机选择处于热应激中期和非热应激期体况、年龄、泌乳天数相近的各泌乳阶段健康经产(2～4胎次)泌乳奶牛10头,采集各试验牛尾静脉血,检测热应激蛋白70(Heat shock protein 70,HSP70)、皮质醇(Cortisol,Cor)、超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase,SOD)、总抗氧化能力(Total antioxidant capacity,T-AOC)、丙二醛(Malondialdehyde,MDA)、游离脂肪酸(Non-esterified fatty acid,NEFA)、结合珠蛋白(Haptoglobin,HPT)和谷氨酸脱氢酶(Glutamate dehydrogenase,GDH)水平.[结果]热应激各泌乳阶段奶牛应激指标HSP70、Cor水平和抗氧化指标SOD活性均极显著上升(P<0.01);新产、泌乳前期奶牛T-AOC水平极显著降低(P<0.01),泌乳中期奶牛T-AOC水平显著降低(P<0.05);新产奶牛MDA水平显著上升(P<0.05),泌乳前期、中期奶牛MDA水平极显著上升(P<0.01).各泌乳阶段奶牛GDH活性极显著升高(P<0.01);新产奶牛、泌乳前期奶牛NEFA水平极显著提高(P<0.01),泌乳中期显著提高(P<0.05);新产、泌乳前期和中期奶牛HPT水平均极显著上升(P<0.01).[结论]不同泌乳阶段奶牛均受热应激影响而发生不同程度应激反应和氧化损伤,且肝功能均不同程度损伤,新产、泌乳前期和中期奶牛尤为严重.

某发酵床模式自繁自养猪场,仔猪断奶后每批次均有消瘦、腹泻、呕吐、神经症状等临床症状发生,造成了一定的损失.根据临床症状、剖检变化、病原检测以及血清抗体检测,诊断为猪弓形虫感染.通过制定和实施以磺胺类药物为主,辅以加强生物类媒介(猫,狗,鼠)管理,垫料堆积发酵等防治手段,成功控制了疫情.经过为期1年的预防措施的实施,后面批次的保育猪未复发,且母猪和仔猪的猪弓形虫血清抗体阳性率普遍下降,说明制定和实施的发酵床模式下猪弓形虫防治方案合理有效.

为探究白头翁皂苷B4对临床型乳房炎奶牛生理生化及抗氧化性指标的影响,以12头健康奶牛为对照组(不注射药物)、12头临床型乳房炎奶牛为试验组,按体重0.05 mL·kg-1颈部肌肉注射白头翁皂苷B4注射液,每天1次,连续6 d.试验期间,使用IDEXX ProCyteDx全自动五分类血细胞分析仪检测对照组及试验组1、3、5、7 d血液常规指标,分别用BS-240VET全自动生化分析仪和ELISA法检测对照组任一天及试验组1、3、5、7 d血清生化指标血糖(GLU)、肌酐(CREA)、尿素(UREA)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、球蛋白(GLOB)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALKP)、谷氨酰转肽酶(GGT)、总胆红素(TBIL)、胆固醇(CHOL)、淀粉酶(AMYL)、脂肪酶(LIPA)和总抗氧化能力(T-AOC)、超氧化物歧化酶(SOD)、丙二醛(MDA)、过氧化氢酶(CAT)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、一氧化氮合酶(NOS)水平.结果表明:①对照组和试验组奶牛血常规和血清生化指标均处于正常生理值范围,且试验组生理生化指标较对照组有显著改善;②白头翁皂苷B4显著或极显著促进临床型乳房炎奶牛抗氧化因子SOD、MDA、CAT和NOS恢复至健康水平(P＜0.05或0.01),用药后7 d试验组除GSH-Px和T-AOC水平显著低于对照组外,其余各抗氧化性指标差异均不显著.综合而言,白头翁皂苷B4可促进临床型乳房炎奶牛血清生化指标均在生理范围内显著改善,有效减轻乳腺炎氧化损伤,有助于奶牛临床型乳房炎治疗.

为了解猪伪狂犬病毒(PRV)流行变异株的病原学特性及分子遗传变异特点,从江苏扬州市某发病猪场采集病料,经无菌处理后接种BHK-21细胞并连续传代,分离获得1株病毒.通过细胞病变观察、PCR鉴定、电镜观察和动物感染试验,证明该毒株为伪狂犬病毒,将其命名为YZ株.利用PCR扩增、测序,获得YZ株的gB与gE基因序列,基因同源性分析与遗传进化分析表明:YZ株gB与gE基因与我国猪伪狂犬变异毒株同源性均在99.2％以上,且位于同一进化分支,提示该毒株与流行于我国的猪伪狂犬变异毒株亲缘关系较近.进一步研究YZ株的致病性,将该毒株P5代细胞培养液人工感染60日龄PRV阴性健康猪.结果 表明:试验猪在感染病毒后出现发热、呕吐、腹泻、咳嗽、呼吸困难和神经症状,发病率达100％.感染猪剖检病变为脑组织水肿出血、肝脏组织表面出现灰白色坏死灶.综上,PRV-YZ株遗传进化分析与致病性研究表明该毒株为猪伪狂犬变异毒株.这一研究可为江苏省PRV的流行病学、遗传进化分析以及免疫防控提供参考.

为探究江苏苏北、苏中地区规模化猪场伪狂犬病(PR)免疫效果和伪狂犬病毒(PRV)野毒流行动态,2016-2018年采用ELISA血清学检测方法和PCR方法对采自苏北、苏中8市规模化猪场的5 385份血清和319份病料分别进行PRV抗体和核酸检测,并对检测结果进行比较.结果表明:2016、2017、2018年PRV gB抗体阳性率分别为93.78％、93.18％和94.16％,PRVgE抗体阳性率分别为23.77％、21.84％和21.17％.8市间PRV gE抗体阳性率有明显差异,宿迁市最高(31.61％),徐州市最低(16.31％).公猪PRV gE抗体阳性率为7.88％,其余类型猪的PRV gE抗体阳性率在20％～30％之间.采集的组织样品PRV野毒2016年野毒阳性率为17.45％,2018年野毒阳性率降为14.45％.调查结果说明2016-2018年间江苏省8市规模化猪场PRV免疫情况良好,而PRV野毒感染依然比较普遍,但检出率呈下降趋势,为江苏地区PR净化策略的制定和实施提供了流行病学依据.

为分离、鉴定猪盖他病毒(GETV)并对其灭活疫苗的免疫原性和免疫保护性进行评价,本研究对猪腹泻病样品进行了二代测序,用Vero细胞分离病毒并进行了qRT-PCR和IFA鉴定及遗传进化分析;用该分离株制备油乳剂灭活疫苗,并在猪体进行了免疫抗体水平测定和免疫攻毒保护研究.结果 显示,二代测序检测出腹泻样品中存在GETV;经细胞分离、qRT-PCR和IFA鉴定证实,成功分离到一株猪源GETV,将其命名为GETV JS18株;该分离株与我国其他猪源分离株同属于基因Ⅲ型,与我国2017年分离株AH9192株的亲缘性最近,序列同源性为99.7％.GETV JS18株以0.005 MOI接种Vero细胞48 h毒价最高,达7.6±0.2 Log10TCIDJmL;该毒株制备的油乳剂灭活疫苗免疫仔猪,可有效阻止GETV感染引起的临床症状和平均日增重(ADWG)下降,降低GETV感染引起的病毒血症并阻止排毒和组织带毒,对攻毒保护率为100％;疫苗免疫后的平均中和抗体滴度最高可达9.8±0.8 Log2,且持续较高水平至少7个月.上述结果表明,本研究成功分离了一株猪源基因Ⅲ型GETV JS18株,其油佐剂灭活疫苗具有良好的免疫保护效力和免疫持续期.

2018年以来,江苏地区部分养殖场病鸭表现短喙、生长延滞.为确定该病的病原特征,本研究团队从某发病樱桃谷肉鸭场采集病料,经无菌处理后接种11日龄鸭胚连续传代培养,分离获得1株病毒,传至第3代次时可致感染鸭胚死亡,第5代次病毒滴度达5.3 log10 ELDs0/mL.通过PCR鉴定、电镜观察、基因遗传进化分析和动物回归试验,证明该毒株是短喙型小鹅瘟病毒(short beak and dwarfism syndrome-gooseparvovirus,SBDS-GPV),遂将其命名为SBDS-GPV JS01株.为了进一步研究SBDS-GPV JS01株对不同品种鸭的易感性与致病力,将该毒株第5代病毒分别经皮下接种1日龄GPV阴性健康高邮鸭、金定鸭与苏邮1号鸭.结果 显示,JS01株对各品种试验鸭均易感,感染鸭出现发育迟缓、腹泻、跛行瘫痪及上下喙萎缩变短等临床症状,发病率100％,死亡率10％～25％.上述结果表明,本研究成功分离鉴定出1株SBDS-GPV,该毒株具有较广的宿主感染谱.

本文主要解析高职院校宠物医学专业顶岗实习教学模式,从顶岗实习经济投入不足、对顶岗实习的学生实施监管的难度大、顶岗实习评价机制不完善、学生不重视顶岗实习等现状出发,提出增加顶岗实习经济投入、提升实习质量,增加顶岗实习单位、完善对实习学生的监管,规范设计顶岗实习教学、提升管理力度,增强学生对顶岗实习的认识、提升学生的基本技能水平等建议,以期加强顶岗实习在高职宠物医学教学中的运作效率.

本文主要以积件思想在宠物医学教学资源库建设中的运用为重点进行阐述,结合当下宠物医学教学现状为依据,首先介绍积件思想概述、其次分析积件思想在宠物医学教学资源库建设中运用的价值,最后从加强对素材与资源的收集、构建积件服务平台两个方面深入说明并探讨积件思想在宠物医学教学资源库建设中运用的有效措施,旨意在为相关研究提供参考资料.

[背景]沙门氏菌是一种重要的人兽共患食源性致病菌,控制沙门氏菌在动物中的感染和在食品生产链中的污染对于畜牧生产、公共卫生和食品安全具有重要意义.[目的]调查苏北地区某白羽肉鸡父母代种鸡及其商品鸡的沙门氏菌感染和流行情况,为其沙门氏菌防治提供参考依据.[方法]于2018-2019年从江苏泰州、宿迁、盐城、徐州、连云港等地区分别采集某白羽肉鸡父母代种鸡场产蛋鸡及其商品鸡场1-2日龄弱雏和10日龄雏鸡的泄殖腔拭子样品共360份,进行沙门氏菌的分离与鉴定,用纸片法和PCR方法对菌株耐药表型及相关耐药基因进行检测,通过多位点序列分型(multilocus sequence typing,MLST)技术对分离菌株的亲缘关系进行研究.[结果]从120份父母代产蛋鸡分离到3株沙门氏菌,从120份商品代1-2日龄弱雏分离到25株沙门氏菌,从120份商品代10日龄雏鸡分离到82株沙门氏菌.分离的沙门氏菌对多粘菌素B、亚胺培南、多西环素、甲氧苄啶、替加环素、氟苯尼考、头孢噻肟、恩诺沙星表现为全部敏感,对呋喃妥因、青霉素、利福平、利奈唑胺、万古霉素均表现为全部耐药;对阿莫西林耐药的菌株有30株(占27.27％),敏感的有80株(占72.73％).耐药基因的PCR检测结果显示:p内酰胺类耐药基因blaTEM存在于所有沙门氏菌分离株中,但其他常见耐药基因在本研究的分离株中未发现.通过对分离菌7对管家基因进行PCR扩增、测序和MLST分型,发现所有沙门氏菌分离株的ST型均为ST11,属于肠炎沙门氏菌.MLST分型结果结合药敏试验结果表明,分离的沙门氏菌属于同一进化系统,具有相同或相似的来源.[结论]被调查商品鸡群的肠炎沙门氏菌感染很可能是其同一来源的父母代种鸡场垂直传播所致,这为该地区白羽肉鸡的沙门氏菌防治提供了参考.

为了解江浙地区牛病毒性腹泻病毒(BVDV)的流行情况,于2016～2017年在江浙部分地区采集了145份临床腹泻犊奶牛血清样品,并对其进行RT-PCR检测,对阳性样品的5'-UTR和Npro基因进行序列与遗传进化树分析.145份血清样品中共有19份样品为BVDV阳性,阳性率为13.1％,其中江苏和浙江地区的阳性率分别为14.1％和11.9％.根据阳性样品的5'-UTR和Npro基因序列进行遗传进化树分析,18份样品为BVDV-1型,包括1a(n=2)、1b(n=6)、1c (n=2)、1m(n=7)和1q(n=1)亚型;1份样品为BVDV-2型,其5'-UTR和Npro基因序列分析均显示与我国吉林分离株BVDV-2 SD1301同源性最高,分别为99.0％与97.0％.同时,对BVDV-2型阳性样品进行病毒分离、RT-PCR检测和IFA鉴定,证实成功分离到1株非致细胞病变型(ncp) BVDV-2病毒,命名为BVDV-2 JZ21.结果表明:江浙部分地区存在较高比例的BVDV感染,且基因型多样,其中BVDV-1b与1m亚型为该地区感染的主要亚型,分别占33.3％和38.9％.此外,该地区已存在BVDV-2感染.这一研究丰富了BVDV的分子流行病学数据,也为BVDV疫苗研制提供了一定的理论基础.

创新是社会发展的不竭动力,创新型国家从很大程度上取决于创新人才的教育质量,高职院校作为我国创新人才发展的培养阵地,构建创新创业人才培养新模式是高职院校发展的新方向.本文通过分析高职院校创新创业人才培养现状,提出了高职院校在创新创业人才培养中的问题做出了相应的对策,希望能够为高职院校创新创业人才培养模式的构建提供思路.

为了给更好地适应行业企业需求,提高高职院校宠物类专业的人才培养质量,以《宠物内科病》课程建设为研究对象,着重系统地阐述了课程建设的目标与内容以及具体的实施方案.为高职院校宠物类专业其他课程的建设提供范式及参考.

哺乳动物泌乳启动都是在一系列激素的调控作用下完成的.奶牛的泌乳启动受到多种激素的共同调控,处于非妊娠期的奶牛乳腺在经过特定激素的刺激后,都会在一定程度上出现泌乳现象.本文对奶牛催乳素PRL、雌激素E、胰岛素INS、生长激素GH和孕酮P4与泌乳启动的关系进行了综述,为研究泌乳启动和奶牛产奶量等提供重要理论基础.

病例教学是宠物医疗类课程教学的一种经典方法,优质的病例资源是关键.本文以信息化科病病例库建设为个案,从病例库建设意义、建设思路、建设内容及应用等方面详细阐述了病例库建设过程,对提高宠物类专业教学质量和推进教学改革具有重要意义.

选取规模化养殖场正常分娩奶牛54头,按犊牛初生质量划分为A组(≤40 kg)9头、B组(40～45kg) 25头、C组(≥45 kg) 20头共3组,母牛分娩后立即采集脐静脉血,ELISA法检测血液脂联素、胰岛素和胰岛素样生长因子-1(IGF-1)含量,分析其间的相关性及与犊牛初生质量的相关性.结果表明,3组脐静脉血中均有脂联素、胰岛素和IGF-1表达,随犊牛初生质量增加,脐静脉血中脂联素、胰岛素和IGF-1含量均逐渐增加.其中A组脂联素含量显著低于C组(P＜0.05),A、B组和B、C组脂联素含量均分别差异不显著(P＞0.05);A、B组胰岛素、IGF-1含量均分别显著低于C组(P＜0.05);A、B组胰岛素、IGF-1含量均分别差异不显著(P＞0.05);脐静脉血脂联素、胰岛素和IGF-1含量均分别与犊牛初生质量呈极显著性正相关(P＜0.01);脐静脉血脂联素、胰岛素和IGF-1含量两两间均呈极显著性正相关(P＜0.01);公犊牛脐静脉血脂联素和胰岛素含量均略高于母犊牛脐静脉血,而公犊牛脐静脉血IGF-1含量略低于母犊牛脐静脉血,但脐静脉血脂联素、胰岛素、IGF-1含量在公、母犊间差异均分别不显著(P＞0.05).据此得出,脐静脉血均有脂联素、胰岛素和IGF-1表达;脐静脉血脂联素、胰岛素和IGF-1含量均对犊牛初生质量影响较大;但脐静脉血脂联素、胰岛素、IGF-1含量在公、母犊间差异性均不显著;为进一步研究脐静脉血脂联素、胰岛素和IGF-1对犊牛宫内生长发育的影响机理提供参考.

为了探究三种不同干奶方法对干奶期奶牛乳房炎发病率的影响,试验选择江苏省某规模化奶牛场体重(582±41)kg、2～4胎、体况良好,乳房、乳汁均正常,即将进入回乳期,泌乳量为(15±2) kg的妊娠后期中国荷斯坦奶牛60头,随机分成A、B、C3个组,每组20头,分别采用骤然干奶法、快速干奶法和逐渐干奶法进行干奶.在干奶后密切观察乳房情况,并记录奶牛发生乳房炎的头数.结果表明:A组、B组、C组奶牛乳房炎发病率分别为35％、25％和15％.说明逐渐干奶法最优,比较适合广泛应用.

对江苏农牧科技职业学院实习动物医院收治的45例犬肠阻塞病例的临床症状、鉴别诊断进行了总结,重点论述了肠阻塞手术治疗中大网膜的巧妙应用,大网膜可与受损肠管发生粘连,使受损肠管被包裹密闭,可加速受损肠管的修复,经过科学的术后护理,45例犬肠道手术病例全部康复.