BackgroundEbola virus disease (EVD) is one of the most dangerous and lethal diseases affecting humans. There are several licensed vaccines against EVD, but it remains one of the priority diseases for research and development of effective vaccines.MethodsA double-blind randomized placebo-controlled trial was performed to evaluate safety and immunogenicity of rVSV- and rAd5-vectored vaccine GamEvac-Combi in healthy adults of both sexes between 18 and 60 years. Safety and immunogenicity were assessed during the observation period of 12 months. Immunogenicity was assessed with GP-specific ELISA, IFN-γ ELISA, and plaque pseudoneutralization assay.ResultsVaccinated participants showed marked GP-specific IFN-γ response at day 28 and neutralizing response at day 42 (GMT = 32.6, seroconversion rate 96.3%). GP-specific IgG antibody levels in vaccinated participants peaked at day 42 (GMT = 9345) and persisted for a year after vaccination (GMT = 650).ConclusionThe vaccine showed favorable safety profile and induced robust cell-mediated immune response and strong humoral immune response that lasts at least for a year from the start of vaccination.Clinical trial registrationClinicalTrials.gov, identifier NCT03072030; Pan African Clinical Trial Registry, identifier PACTR201702002053400.

The number of multipotent stromal cells (MSC) in the splenic transplants of normal CBA mice in recipients immunized with inactivated type 5 group A streptococcal vaccine decreased by 3.5-1.8 times depending on the age of the recipients in comparison with that in the transplants grafted to the control recipients. Such immunization suppressed MSC transplantability, i.e., their potency to construct and maintain specific microenvironment of initial organs. In 24 h after administration of LPS to normal mice in vivo, the MSC content in the spleen and bone marrow increased by 1.8 and 1.6 times, respectively; in immunized mice, these parameters did not increase after LPS injection. The concentration of TNFα in the culture medium of bone marrow from normal mice increased pronouncedly after treatment with LPS both in vivo and in vitro (from 0 to 16.1±2.0 and to 14.2±0.1 pg/ml, respectively), while in the culture medium of bone marrow cells from of immunized mice, this cytokine was not detected after LPS treatment. Probably, immunization of mice with antigens of type 5 group A streptococci and resulting autoimmunity diminish animal sensitivity to LPS, which is reflected by examined parameters of the stromal tissue.

Monoclonal antibodies and recombinant antibody fragments are a very promising therapeutic tool to combat infectious diseases. Due to their unique paratope structure, nanobodies (VHHs) hold several advantages over conventional monoclonal antibodies, especially in relation to viral infections. Influenza A viruses (IAVs) remain a major threat to public health. The hemagglutinin (HA) protein is the main protective and immunodominant antigen of IAVs. In this study, three broadly reactive nanobodies (D9.2, E12.2, and D4.2) to H3N2 influenza strains were isolated and Fc-fusion proteins (VHH-Fcs) were obtained and characterized in vitro. This modification improved the nanobodies’ binding activity and allowed for their interaction with a wider range of strains. The D9.2-Fc antibody showed a 100% protection rate against mortality in vivo in a mouse lethal model. Furthermore, we demonstrated that the observed protection has to do with Fc-FcγR interactions. These results indicate that D9.2-Fc can serve as an effective antiviral agent against the H3N2 influenza infection.

One day after intraperitoneal injection of polyvinylpyrrolidone (PVP) to recipient CBA and CBA/N mice, the count of multipotent stromal cells (MSC) in the 4-month-old splenic transplants was minimum in CBA/N→CBA/N group in comparison with the transplants of intact recipients (0.6 from the control level), but increased by 2.3, 3.2, and 3.7 times in CBA/N→CBA, CBA→CBA, and CBA→CBA/N groups, respectively. In the blood serum of recipient CBA/N mice with 4-month splenic transplants of CBA donors, the levels of some cytokines (IL-5, TNFα, and IL-2) was significantly increased 1 and 24 h after PVP injection in contrast to mice with bone marrow transplants, which attests to activation of the innate immunity mechanisms in this (splenic) transplantation variant. Probably, this phenomenon can be explained by the fact that the splenic transplants contain a sufficient number of CD+B-1a lymphocytes that can restore the response of recipient CBA/N mice to PVP. Thus, similar to bone marrow transplants [5], MSC count in splenic transplants increased only in groups, where the recipients were capable of responding to PVP. In other words, after injection of PVP to recipient mice, MSC counts in the spleen and bone marrow at this moment are determined by availability of activated immunocompetent cells. Overall, the novel data attest to close relationships between the stromal tissue of hematopoietic and lymphoid organs, on the one hand, and immune system, on the other.

ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ Оценить изменения цитокинового профиля аспирата из трахеи и бронхов (ТБА) у пациентов нейрохирургического и неврологического профиля с вентилятор-ассоциированной пневмонией (ВАП) и возможность использования показателей его динамики для прогнозирования клинического течения пневмонии. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ В двухцентровое клиническое исследование включены 30 пациентов нейрохирургического и неврологического профиля с ВАП, находившихся на лечении в отделении реанимации и интенсивной терапии. Забор ТБА производили на 1-е и 3-и сутки антибактериальной терапии для изучения концентрации 59 цитокинов. Пациентов наблюдали в течение 5 суток и ретроспективно разделили на две группы: благоприятного и неблагоприятного течения пневмонии. РЕЗУЛЬТАТЫ Выявлена корреляция концентрации широкого спектра провоспалительных и противовоспалительных цитокинов с клиническим течением пневмонии. Концентрация 20 цитокинов ТБА до начала антибактериальной терапии оказалась статистически значимо выше у пациентов с более благоприятным в дальнейшем течением пневмонии. У пациентов с благоприятным течением ВАП, в отличие от пациентов с неблагоприятным течением, за трое суток проводимой антибактериальной терапии в ТБА статистически значимо снизалась концентрация таких цитокинов, как интерлейкин 1 бета, макрофагальный воспалительный белок 1 альфа и растворимые рецепторы 1-го и 2-го типов к фактору некроза опухоли. Показаны высокие специфичность и чувствительность показателей содержания этих цитокинов при прогнозировании клинического течения ВАП. ЗАКЛЮЧЕНИЕ Низкая концентрация некоторых провоспалительных и противовоспалительных цитокинов в аспирате из трахеи и бронхов предшествует неблагоприятному течению вентилятор-ассоциированной пневмонии. Отсутствие выраженной динамики концентрации интерлейкина 1 бета, макрофагального воспалительного белка 1 альфа и растворимых рецепторов к фактору некроза опухоли может быть предиктором тяжелого течения вентилятор-ассоциированной пневмонии.

Актуальность. Одним из осложнений, препятствующих восстановлению пациентов нейрореанимационного профиля, является вентилятор-ассоциированная пневмония. Цель исследования. Данное исследование было выполнено с целью изучения изменения цитокинового профиля в плазме крови больных с вентилятор-ассоциированной пневмонией и поиска прогностических маркеров эффективности антибактериального лечения этой патологии. Материалы и методы. Проведено двухцентровое клиническое исследование, в которое было включено 73 пациента в возрасте от 19 до 82 лет с нейрохирургической и неврологической патологией и признаками вентилятор-ассоциированной пневмонии (ВАП). На 1-е и 3-и сутки антибиотикотерапии у пациентов взяли образцы плазмы, в которых определили концентрацию 59 цитокинов. Ретроспективно пациентов разделили на группы благоприятного и неблагоприятного клинического течения ВАП. С помощью статистических методов, ROC-анализа и логистической регрессии были выявлены предикторы клинического течения заболевания. Результаты. Наиболее чувствительным предиктором клинического течения ВАП у пациентов нейрореанимационного профиля явилась матриксная металлопротеиназа-2 (ММР-2). По сравнению с группой благоприятного клинического течения ВАП в группе пациентов с неблагоприятным клиническим течением концентрация ММР-2 в плазме крови изначально была повышена, но к 3-м суткам значительно снижалась. Модель логистической регрессии позволила предсказать клиническое течение ВАП с точностью в 69,2 %. Менее чувствительными, но значимыми предикторами клинического течения заболевания оказались цитокины: антагонист рецептора интерлейкина-1, интерлейкин-6, гранулоцитарный колониестимулирующий фактор, белок надсемейства факторов некроза опухоли 14, остеокальцин, пентраксин, тимический стромальный лимфопоэтин, элемент 12 надсемейства лигандов фактора некроза опухоли, интерлейкин-12. Заключение. Исследование цитокинов плазмы является перспективным направлением для оценки эффективности антибактериальной терапии при ВАП. ММР-2 является чувствительным предиктором клинического течения ВАП у пациентов нейрореанимационного профиля.

Objectives. This study was performed to find changes in the plasma cytokine profile of neuroresuscitation patients with ventilator-associated pneumonia, and to search for prognostic markers of effectiveness of antibacterial treatment of ventilator-associated pneumonia. Materials and methods. A two-center clinical study, that included 73 patients aged 19 to 82 years with neurosurgical and neurological pathology and signs of ventilator-associated pneumonia (VAP) was conducted. On the 1st and 3rd days of antibiotic therapy, plasma samples were taken from patients, in which the concentration of 59 cytokines was determined. Retrospectively, patients were divided into groups of favorable and unfavorable clinical course of VAP. Predictors of the clinical course of the disease were identified using statistical methods, ROC analysis, and logistic regression. Results. Matrix metalloproteinase-2 (MMP-2) was the most sensitive predictor of the clinical outcomes of VAP in neuroresuscitation patients. In the group of patients with an unfavorable course of VAP, the concentration of MMP-2 in plasma was initially increased, but significantly decreased by the 3rd day, in contrast to the group with good outcomes. The logistic regression model predicted the clinical course of VAP with an accuracy of 69.2 %. Less sensitive but significant predictors of the clinical course of the disease were cytokines: interleukin-1 receptor antagonist, interleukin-6, granulocyte colony-stimulating factor, tumor necrosis factor superfamily member 14, osteocalcin, pentraxin, thymic stromal lymphopoietin, element 12 of the tumour necrosis factor ligand superfamily, and interleukin-12. Conclusions. Measurement of plasma cytokine levels is a prospective method to determine the effectiveness of antibacterial therapy in VAP. Matrix metalloproteinase-2 is a sensitive predictor of the clinical course of VAP in neuroresuscitation patients.

Hospital-acquired pneumonia is a common cause of mortality in intensive care units. Therapy effectiveness depends on the antibiotic regimen chosen. Serum cytokines concentrations could be used as sensitive predictors of hospital-acquired pneumonia outcomes and therapy response. Analysis of literature in the Pubmed database shows, that using the key terms “pneumonia”, “cytokines” and “biomarkers”, 1062 publications can be found. By narrowing the search with key terms “nosocomial pneumonia” and “cytokines” it is possible to discover 212 publications. The search for literature, regarding information on specific cytokines and their role in bacterial pneumonia yields another 258 articles. Both experimental and clinical studies revealed the potential prognostic value of cytokines as diagnostic biomarkers in bacterial pneumonia. In this paper we review the pathogenesis of pneumonia-related inflammation, related cytokines, and their practical value. Information regarding interleukins, interferons, tumor necrosis factor superfamily proteins, matrix metalloproteinases, colony-stimulating factors, chemokines, and anti-inflammatory cytokines was reviewed. Many inflammatory factors have yet to be thoroughly researched. Furthermore, more studies are necessary to determine the prognostic potential of cytokines as markers of the effectiveness of antibacterial therapy in nosocomial pneumonia.

Hospital-acquired pneumonia is a common cause of mortality in intensive care units. Therapy effectiveness depends on the antibiotic regimen chosen. Serum cytokines concentrations could be used as sensitive predictors of hospital-acquired pneumonia outcomes and therapy response. Analysis of literature in the Pubmed database shows, that using the key terms “pneumonia”, “cytokines” and “biomarkers”, 1062 publications can be found. By narrowing the search with key terms “nosocomial pneumonia” and “cytokines” it is possible to discover 212 publications. The search for literature, regarding information on specific cytokines and their role in bacterial pneumonia yields another 258 articles. Both experimental and clinical studies revealed the potential prognostic value of cytokines as diagnostic biomarkers in bacterial pneumonia. In this paper we review the pathogenesis of pneumonia-related inflammation, related cytokines, and their practical value. Information regarding interleukins, interferons, tumor necrosis factor superfamily proteins, matrix metalloproteinases, colony-stimulating factors, chemokines, and anti-inflammatory cytokines was reviewed. Many inflammatory factors have yet to be thoroughly researched. Furthermore, more studies are necessary to determine the prognostic potential of cytokines as markers of the effectiveness of antibacterial therapy in nosocomial pneumonia. Данная статья распространяется на условиях «открытого доступа», в соответствии с лицензией CC BY-NC-SA 4.0 («AttributionNonCommercial-ShareAlike» / «Атрибуция-Некоммерчески-СохранениеУсловий» 4.0), которая разрешает неограниченное некоммерческое использование, распространение и воспроизведение на любом носителе при условии указания автора и источника. Чтобы ознакомиться с полными условиями данной лицензии на русском языке, посетите сайт: https://creativecommons.org/licenses/by-nc-sa/4.0/deed.ru 78 ИНТЕНСИВНАЯ ТЕРАПИЯ НОВОЙ КОРОНАВИРУСНОЙ ИНФЕКЦИИ COVID-19 Роль провоспалительных и противовоспалительных цитокинов при бактериальной пневмонии факторов развития воспаления еще не были изучены как диагностические биомаркеры. Помимо этого, требуются дополнительные исследования возможности применения цитокинов в качестве маркеров эффективности антибиотикотерапии при бактериальной пневмонии. Ключевые слова: пневмония, бактериальная, биомаркеры, цитокины, интерфероны, воспаление, хемокины, интерлейкины u Для корреспонденции: Зинина Елизавета Павловна — врач анестезиолог-реаниматолог, отделение анестезиологии и реанимации No 1, ФГАУ НМИЦ «Лечебно-реабилитационный центр» МЗ РФ, Москва, Россия; e-mail: epzinina@gmail.com “ Для цитирования: Е.П. Зинина, С.В. Царенко, Д.Ю. Логунов, А.И. Тухватулин, А.В. Бабаянц, А.А. Аврамов. Роль провоспалительных и противовоспалительных цитокинов при бактериальной пневмонии. Обзор литературы. Вестник интенсивной терапии им. А.И. Салтанова. 2021;1:77–89. DOI: 10.21320/1818-474X-2021-1-77-89 o Поступила: 20.02.2021 K Принята к печати: 05.03.2021

COVID-19 vaccination campaign has been launched around the world. More than 8 billion vaccines doses have been administered, according to the WHO. Published studies shows that vaccination reduces the number of COVID-19 cases and dramatically reduces COVID-19-associated hospitalizations and deaths worldwide. In turn, the emergence of SARS-CoV-2 variants of concern (VOC) with mutations in the receptor-binding domain (RBD) of S glycoprotein poses risks of diminishing the effectiveness of the vaccination campaign. In November 2021, the first information appeared about a new variant of the SARS-CoV-2 virus, which was named Omicron. The Omicron variant is of concern because it contains a large number of mutations, especially in the S glycoprotein (16 mutation in RBD), which could be associated with resistance to neutralizing antibodies (NtAB) and significantly reduce the effectiveness of COVID-19 vaccines. Neutralizing antibodies are one of the important parameters characterizing the protective properties of a vaccine. We conducted a study of neutralizing antibodies in the blood serum of people vaccinated with Sputnik V, as well as those revaccinated with Sputnik Light after Sputnik V. Results showed that a decrease in the level of neutralizing antibodies was observed against SARS-CoV-2 Omicron (B.1.1.529) variant in comparison to B.1.1.1 variant. Analysis of the sera of individuals vaccinated with Sputnik V 6-12 months ago showed that there was a decrease in the level of neutralizing antibodies by 11.76 folds. While no direct comparison with other vaccines declines has been done in this study, we note their reported decline in antibody neutralization at a much more significant level of 40-84 times. At the same time, the analysis of sera of individuals who were vaccinated with Sputnik V, and then revaccinated Sputnik Light, showed that 2-3 months after revaccination the decrease in the level of neutralizing antibodies against the Omicron variant was 7.13 folds. Despite the decrease in NtAb, we showed that all revaccinated individuals had NtAb to Omicron variant. Moreover, the NtAb level to Omicron variant in revaccinated sera are slightly higher than NtAb to B.1.1.1 in vaccinated sera.

Нозокомиальная пневмония — частая причина смертности пациентов в отделениях реанимации и интенсивной терапии (ОРИТ). Эффективность лечения зависит от выбора режима антибиотикотерапии. Изменение концентрации цитокинов в крови может являться чувствительным предиктором исхода нозокомиальной пневмонии и ответа на антибактериальную терапию. Анализ литературы показал, что по запросу «pneumonia», «cytokines», «biomarkers» в базе данных Pubmed можно обнаружить 1062 публикации. При сужении поиска с использованием ключевых слов «nosocomial pneumonia», «cytokines» приведено 212 источников. Дополнительный поиск литературных данных о конкретных цитокинах и их роли при пневмонии позволяет обнаружить еще 258 публикаций. Результаты экспериментальных и клинических работ указывают на прогностическую ценность цитокинов при бактериальной пневмонии. В обзоре подробно рассмотрены механизмы развития иммунной реакции и воспаления при пневмонии, связанные с ней цитокины и исследования их практического применения. Рассмотрено значение интерлейкинов, интерферонов, белков суперсемейства фактора некроза опухолей, матриксных металлопротеиназ, колониестимулирующих факторов, хемокинов, противовоспалительных цитокинов. Многие из факторов развития воспаления еще не были изучены как диагностические биомаркеры. Помимо этого, требуются дополнительные исследования возможности применения цитокинов в качестве маркеров эффективности антибиотикотерапии при бактериальной пневмонии.

The Middle East Respiratory Syndrome (MERS) is an acute inflammatory disease of the respiratory system caused by the MERS-CoV coronavirus. The mortality rate for MERS is about 34.5%. Due to its high mortality rate, the lack of therapeutic and prophylactic agents, and the continuing threat of the spread of MERS beyond its current confines, developing a vaccine is a pressing task, because vaccination would help limit the spread of MERS and reduce its death toll. We have developed a combined vector vaccine for the prevention of MERS based on recombinant human adenovirus serotypes 26 and 5. Studies of its immunogenicity have shown that vaccination of animals (mice and primates) induces a robust humoral immune response that lasts for at least six months. Studies of the cellular immune response in mice after vaccination showed the emergence of a specific CD4+ and CD8+ T cell response. A study of the vaccine protectivity conducted in a model of transgenic mice carrying the human DPP4 receptor gene showed that our vaccination protected 100% of the animals from the lethal infection caused by the MERS-CoV virus (MERS-CoV EMC/2012, 100LD50 per mouse). Studies of the safety and tolerability of the developed vaccine in rodents, rabbits, and primates showed a good safety profile and tolerance in animals; they revealed no contraindications for clinical testing.

In 1 and 24 h after combined administration of TLR4 (LPS) and TLR3 (Poly I:C) ligands to CBA mice, the content of MSC in bone marrow increased to intermediate value between the levels attained by their individual injections. The content of osteogenic MSC assessed in 24 h postinjection corresponded to the control level in Poly I:C group, decreased in LPS group by 2.5 times relatively to the control, and increased by 1.6 times (relatively to control) after combined administration of the ligands. In 3 h after combined addition of LPS and Poly I:C in vitro to 12-day-old primary culture of mouse bone marrow stromal cells, the concentration of TNFα in culture medium was intermediate between the levels attained by their individual application. The data revealed dependence of activation of stromal tissue on intensity of innate immunity reactions; they also attested to marked elevation of osteogenicity of MSC pool after costimulation with Poly I:C and LPS, which can underlie augmented calcification of the tissues during combined viral and bacterial infections.

Introduction Middle East respiratory syndrome (MERS) is acute inflammatory disease of respiratory system with a high mortality, caused Ьу coronavirus MERS-CoV At present moment, we still lack specific therapeutic preparations and vaccines against MERS Vaccine administration can help to limit the spread of the disease and lower the mortality Duration of vaccine-induced immune response is one of the key characteristics of a vaccine, which is connected with duration of its protective effectiveness Unfortunately, the data on duration of vaccine-induced immune response against MERS is scarce The aim of the study was to determine duration of humoral immune response in mice and primates and duration of protective immune response in mice after immunization with the heterologous virus-vectored vaccine against MERS (BVRS-GamVac-Combi), developed earlier Ьу our research group Material and methods To study duration of humoral immune response, we used mice of C57BL/6 strain and common marmosets Animals were immunized with the vaccine BVRS-GamVac-Combi, based on recomЬinant adenoviral vectors rAd26 and rAd5 Antigen-specific-antibody titers were determined with ELISA, virus-neutralizing antibody titers were measured with virus neutralization assay using MERS-CoV (EMC/2012) To study duration of protective immune response, we used a model of lethal infection on transgenic mice, carrying human DPP4 gene of viral receptor Results In present research, we showed that vaccination of animals with BVRS-GamVac-Combi induced robust humoral immune response, which persisted at least 18 months after immunization In addition, our vaccine protected 100 % of animals from lethal infection for at least 7 months after immunization Concluslon Strength of vaccine-induced immune response is generally connected with a protective effectiveness of a vaccine One of the key problems of vaccine design is to find a way to provide as long and robust immune response as possible Duration of vaccine-induced immune response is one of the key characteristics of a vaccine, which demands quality control during multiple steps of a vaccine development Введение Ближневосточный респираторный синдром (БВРС) - это острое воспалительное заболевание дыхательной системы с высокой летальностью, возбудителем которого является коронавирус БВРС-КоВ В настоящее время в мире не существует специфических профилактических и терапевтических средств против БВРС Вакцино-профилактика позволит ограничить распространение данного заболевания и снизить летальность Одной из ключевых характеристик вакцин является длительность индуцируемого иммунного ответа, от которой зависит продолжительность протективного эффекта вакцины К сожалению, данных по длительности поствакцинального иммунного ответа для вакцин против БВРС сейчас недостаточно Цель исследования - определение длительности гуморального иммунного ответа у грызунов и приматов и протективного иммунного ответа после иммунизации комбинированной векторной вакциной против БВРС (БВРС-ГамВак-Комби), разработанной нами ранее Материал и методы Длительность гуморального иммунитета исследовали на мышах линии C57BL/6 и обыкновенных игрунках Животных иммунизировали вакциной БВРС-ГамВак-Комби на основе рекомбинантных векторов rAd26 и rAd5 Титр антиген-специфических антител определяли методом иммуноферментного анализа (ИФА) Титр вирус-нейтрализующих антител определяли с помощью реакции вирус-нейтрализации против вируса БВРС-КоВ (MERS-CoV EMC/2012) Длительность протективного иммунитета исследовали на модели летальной инфекции у трансгенных мышей, несущих ген человека DPP4, кодирующий рецептор к БВРС-КоВ Результаты Исследование длительности поствакцинального гуморального иммунного ответа у грызунов и приматов показало, что вакцинация животных БВРС-ГамВак-Комби индуцирует формирование напряженного гуморального иммунного ответа к гликопротеину S БВРС-КоВ, который сохраняется на протяжении не менее 18 мес Также было показано, что вакцинация позволяет защитить 100 % животных от летальной инфекции, вызванной БВРС-КоВ (MERS-CoV EMC/2012, 100 ЛД50/мышь), через 7 мес после иммунизации Заключение Напряженность поствакцинального гуморального иммунного ответа, как правило, связана с протективностью вакцины Одной из ключевых задач при дизайне вакцин является обеспечение наиболее длительного напряженного иммунного ответа Длительность поствакцинального иммунного ответа - одна из ключевых характеристик вакцин, которая требует контроля на различных этапах их разработки

Ближневосточный респираторный синдром (БВРС) – это острое воспалительное заболевание дыхательной системы, возбудителем которого является коронавирус БВРС-КоВ. Летальность при БВРС составляет 34.5%. В связи с высокой летальностью, отсутствием терапевтических и профилактических средств и сохраняющейся угрозой распространения БВРС за пределы эндемичных районов разработка вакцинного препарата является актуальной задачей, а вакцинопрофилактика против БВРС позволит ограничить распространение БВРС и снизить летальность. Нами была разработана комбинированная векторная вакцина для профилактики БВРС на основе рекомбинантных аденовирусов человека 26 и 5 серотипа. Проведенные исследования иммуногенности показали, что вакцинация животных (мыши и приматы) позволяет сформировать мощный гуморальный иммунный ответ, который сохраняется на протяжении не менее 6 месяцев. Исследования клеточного иммунного ответа у мышей после вакцинации показали формирование выраженного специфического CD4 + и CD8 + ответа. По результатам исследования протективности вакцины на модели трансгенных мышей, несущих ген рецептора DPP4 человека, было показано, что вакцинация обеспечивает защиту 100% животных от летальной инфекции, вызванной вирусом БВРС-КоВ (MERS-CoV EMC/2012, 100 ЛД 50 /мышь). Проведенные исследования безопасности и переносимости разработанной вакцины у грызунов, кроликов и приматов показали хорошую переносимость вакцины у животных и не выявили противопоказаний для проведения клинических исследований.

One hour after polyvinylpyrrolidone administration, the content of multipotent stromal cells in the spleen of CBA and CBA/N mice increased almost equally (by 2.5 and 2.9 times, respectively), but in 24 h, the effectiveness of multipotent stromal cell cloning in the spleen of CBA/N mice decreased almost to the control level, whereas in CBA mice, the number of multipotent stromal cells continued to increase. Serum concentration of IL-5, TNFα, and IL-2 in both lines was elevated in 1 h after polyvinylpyrrolidone administration, which is likely to reflect activation of the innate immunity. One day after polyvinylpyrrolidone administration, the number of multipotent stromal cells in bone marrow transplants in the CBA/N→CBA/N and CBA→CBA/N groups remained practically unchanged, while in groups CBA→CBA and CBA/N→CBA it was equally increased (by 3.6 and 3.4 times, respectively). Thus, the number of multipotent stromal cells in bone marrow transplants after 1 day was increased only in groups where recipients (CBA mice) were capable of responding to polyvinylpyrrolidone administration, i.e. the number of stromal cells by this term, was apparently determined by the presence of activated immunocompetent cells. These findings also indicate that activation of the stromal tissue dur ing immune response can have a two-phasic pattern: the first phase (1 h after antigen adminis tration) can be determined by activation of innate immunity receptors (in multipotent stromal cells or other cells) observed in CBA and CBA/N mice, and the second phase occurs during further development of the immune response (that was observed in CBA mice, but not in CBA/N mice due to absence of CD+B-1a lymphocytes). The findings attest to close interactions between the stromal tissue and the immune system.

The Middle East respiratory syndrome coronavirus (MERS-CoV) was identified in 2012 during the first Middle East respiratory syndrome (MERS) outbreaks. MERS-CoV causes an acute lower-respiratory infection in humans, with a fatality rate of ~35.5%. Currently, there are no registered vaccines or means of therapeutic protection against MERS in the world. The MERS-CoV S glycoprotein plays the most important role in the viral life cycle (virus internalization). The S protein is an immunodominant antigen and the main target for neutralizing antibodies. In the present study, the immunogenicities of five different forms of the MERS-CoV S glycoprotein were compared: the full-length S glycoprotein, the full-length S glycoprotein with the transmembrane domain of the G glycoprotein of VSV (S-G), the receptor-binding domain (RBD) of the S glycoprotein, the membrane-fused RBD (the RBD fused with the transmembrane domain of the VSV G glycoprotein (RBD-G)), and the RBD fused with Fc of human IgG1 (RBD-Fc). Recombinant vectors based on human adenoviruses type 5 (rAd5) were used as delivery vehicles. Vaccination with all of the developed rAd5 vectors elicited a balanced Th1/Th2 response in mice. The most robust humoral immune response was induced after the animal had been vaccinated with the membrane-fused RBD (rAd5-RBD-G). Only immunization with membrane forms of the glycoprotein (rAd5-S, rAd5-S-G, and rAd5-RBD-G) elicited neutralizing antibodies among all vaccinated animals. The most significant cellular immune response was induced after vaccination of the animals with the full-length S (rAd5-S). These investigations suggest that the full-length S and the membrane form of the RBD (RBD-G) are the most promising vaccine candidates among all the studied forms of S glycoprotein.