目的观察阳离子脂质体介导的HSV-TK/ACV系统对人脑胶质瘤细胞的杀伤作用.方法将新近克隆的含HSV-TK基因的真核表达载体pCR3-TK,用阳离子脂质体Lipofectamine转染至人脑胶质瘤细胞株TJ905中,筛选出阳性克隆,给予不同浓度的ACV,观察不同时间对细胞的杀伤情况,并用MTT方法检测不同细胞对ACV的反应情况 .结果转染TK基因的胶质瘤细胞对ACV的杀伤敏感性明显提高( P <0.01),ACV对转染TK基因的胶质瘤细胞有特异性抑制和杀伤作用.结论阳离子脂质体Lipofectamine是一种简便、安全、有效的基因转移方法.可用阳离子脂质体介导pCR3-TK转移,进行胶质瘤HSV-TK/GCV基因治疗的研究,为胶质瘤的治疗提供一种新方法.

目的研究含双启动子表达载体在真核细胞中的表达活性。方法构建分别含有CMV及CMV-SV40启动子的pC-LacZ及pCS-LacZ真核表达载体。用阳离子脂质体Lipofectamine将其转染至TJ905真核细胞中。对转染后24～72h的细胞提取物进行β-半乳糖苷酶活性检测；并与转染标准pSV-gal载体的细胞提取物的酶活性进行比较分析。结果 TJ905细胞中转染pCS-LacZ的β-半乳糖苷酶活性明显高于其它两种载体(P<0.05)，且转染后48h是酶活性达高峰的时间。结论两种启动子同时启动的基因表达效率较高，这为今后基因治疗中提高外源基因表达效率提供了一条有益的探索之路。