Цель: изучение ассоциации полиморфизмов rs2278420, rs2278415, rs4986773 гена ZNF350 с риском развития увеальной меланомы. Методы. В исследовании принимали участие 226 добровольцев, подписавших информированное согласие, в числе которых 65 пациентов с новообразованиями хориоидеи. По данным клинико-инструментальных методов обследования все больные, в свою очередь, были разделены на две группы – опытную (пациенты с увеальной меланомой и прогрессирующим невусом хориоидеи, n=42) и группу риска (пациенты со стационарным невусом хориоидеи, n=23). Контрольную группу (n=61) составили лица без внутриглазных новообразований. В популяционную выборку вошли лица русской национальности (согласно проведенному анкетированию), случайным образом выбранные в г. Москве. Генотипирование по полиморфизмам гена ZNF350 (rs2278415, rs2278420 rs4986773) выполнено методом ПЦР с последующей рестрикцией ДНК. Результаты. При сравнении частот аллелей и генотипов по полиморфным локусам rs2278415 и rs498677 гена ZNF350 статистически значимых различий между изученными группами не выявлено. В контрольной группе генотип AA и аллель А по полиморфизму rs2278420 гена ZNF350 обнаруживались значимо реже, чем в опытной группе, группе риска и популяционной выборке. Заключение. В ходе проведенного исследования показано, что генотип АА и аллель А по полиморфному локусу rs2278420 гена ZNF350 ассоциированы с увеальной меланомой, прогрессирующими невусами хориоидеи и стационарными невусами хориоидеи. Также более высокие частоты указанных генотипа и аллеля обнаружены в популяционной выборке, что может быть связано с эффектом «случайной выборки» и отсутствием данных об отягощенном онкологическом семейном анамнезе. Aim: to investigate the association of ZNF350 (rs2278420, rs2278415, rs4986773) gene polymorphisms with the risk of uveal melanoma development. Methods. The study involved 226 volunteers who signed an informed consent, including 65 patients with UM and choroidal nevi (study group). According to the results of the clinical and instrumental examination, all patients were divided into two groups – a study group (patients with uveal melanoma and progressive choroidal nevus, n=42) and a risk group (patients with benign choroidal nevus, n=23). The control group (n=61) included individuals without intraocular neoplasms. The population group included Russian individuals (according to the survey data) randomly selected in Moscow. Genotyping for the ZNF350 rs2278415, rs2278420, and rs4986773 gene polymorphisms was carried out by PCR followed by DNA restriction. Results. Comparing the allele and genotype frequencies for the ZNF350 rs2278415 and rs4986773 gene polymorphisms, no statistically significant differences were found between the studied groups. In the control group, the genotype AA and allele A for the ZNF350 rs2278420 gene polymorphism were determined significantly less frequently than in the study, risk, and population groups. Conclusion. Our study has revealed, the AA genotype and A allele at the polymorphic locus rs2278420 of the ZNF350 gene are associated with UM, progressive, and benign choroidal nevi. Additionally, the higher frequencies of the genotype and allele found in the population sample may be related to the «random sampling» effect and insufficient information of their tumor family history.

В настоящее время в патогенезе эндокринной офтальмопатии (ЭОП) большое внимание уделяют роли клеток-мишеней (орбитальные фибробласты и адипоциты), мутаций в генах рецептора тиреотропного гормона (рТТГ) и инсулиноподобного фактора роста-1(рИФР-1), а также соответствующим им антителам для разработки потенциально эффективных методов лечения. ЦЕЛЬ: определить встречаемость полиморфизма гена рТТГ у пациентов с ЭОП. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: для проведения молекулярно-генетического исследования (МГИ) взяты образцы крови у 111 больных, обратившихся ФГБУ НМИЦ ГБ им. Гельмгольца МЗ РФ с подтвержденным диагнозом ЭОП. Из них, 80 женщины в возрасте от 20 до 79 лет (в среднем 46,6 ± 9,8) и 31 мужчин в возрасте от 26 до 71 лет (в среднем 51 ± 3,5). МГИ проводили в НИИ общей патологии и патофизиологии методом ПДРФ-анализа лейкоцитов периферической крови, исследуя наличие полиморфизмов гена рТТГ 157561G>A/rs12885526, 15678A>G/rs179247. Определяли наличие мутаций в гене по типу «замены единичного нуклеотида» или SNP (Single Nucleotide Polymorphism). Производили расчет встречаемости дикого, гомозиготного и гетерозиготного типов полиморфизма гена рТТГ. РЕЗУЛЬТАТЫ: за последние десятилетия доказана важность рТТГ в патогенезе болезни Грейвса и ЭОП. Активация рТТГ на орбитальных фибробластах, запускает каскад реакций, приводящих к увеличению продукции гликозамингликанов, влияет на дифференцировку фибробластов в адипоциты. Тем самым, рТТГ стал терапевтической «мишенью» и исследования мутаций его кодирующего гена актуальны на сегодняшний день. В нашем исследовании проведено МГИ гена рТТГ, расчет частоты встречаемости его полиморфизмов (157561G>A/rs12885526, 15678A>G/rs179247) у пациентов с ЭОП. Оба исследуемых полиморфизма в большинстве случаев имели мутации (по типу замены единичного нуклеотида). Так для полиморфизма 157561G>A/rs12885526 гена рТТГ дикий тип (GG) (вариант нормы) встречался в 18 из 111 случаев. Мутации данного полиморфизма выявлены в 84% случаев (93 пациента), преимущественно по гетерозиготному типу (GА) у 53 пациентов и реже по гомозиготному типу (АА) у 40 человек. Таким образом, можно предположить, что мутация данного гена может быть звеном в патогенезе ЭОП. Во втором исследуемом полиморфизме гена рТТГ 15678A>G/rs179247 в 58,6% случаев выявлены мутации, дикий тип (АА) (вариант нормы) встретился в 46 из 111 случаев. Мутации данного полиморфизма встречались преимущественно по гетерозиготному типу (АG) - 72% (47 человек из 65) и реже по гомозиготному типу (GG) 28% (18 пациентов из 65). Полученные результаты могут указывать на роль полиморфизма данного рецептора по гетерозиготному типу в патогенезе заболевания. ВЫВОДЫ: МГИ крови позволило выявить преобладание гетерозиготного варианта мутаций исследуемых полиморфизмов (157561G>A/rs12885526, 15678A>G/rs179247) гена рТТГ, что свидетельствует о взаимосвязи между наличием мутаций гена рТТГ и развитием ЭОП.

Тяжелое течение эндокринной офтальмопатии (ЭОП) развивается, примерно, у 5 - 6% больных и сопровождается угрозой снижения зрения, вплоть до полной его потери. По мнению большинства исследователей, одним из основных методов лечения остается пульс-терапия глюкокортикоидами (ГК). ЦЕЛЬ: оценить эффективность комплексной медикаментозной терапии активной стадии ЭОП. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ: в исследование включено 84 пациента (168 глаз и орбит) с активной стадией ЭОП, из них 63 женщины и 21 мужчина. Возраст пациентов на момент начала лечения составил от 26 до 75 лет, в среднем 49,0±11,39 лет, среди них женщины в возрасте от 26 до 75 лет (49,1±9,52 лет), мужчины от 26 до 67 лет (48,0±10,48 лет). До начала лечения и через 6 месяцев после полного его окончания всем проводили полное клинико-инструментальное офтальмологическое обследование, сравнение полученных результатов в динамике. Обработку данных проводили при помощи программ Excel, IBM SPSS Statistics 26, различия считались статистически значимыми при значении p <0,05. РЕЗУЛЬТАТЫ: все пациенты получали комплексную медикаментозную терапию, включающую пульстерапию метилпреднизолоном (по протяженной схеме с суммарной дозой 6,5 г на протяжении 3х месяцев). По данным EUGOGO, внутривенное введение ГК демонстрирует большую эффективность и вызывает значительно меньше побочных эффектов, чем пероральный прием ГК (77% - 88% против 51% - 63%) и используется в качестве первой линии лечения активной стадии ЭОП. Наряду с внутривенным введением ГК в режиме пульс-терапии, в протокол лечения включали другие группы препаратов, необходимость включения которых определяли на основании особенностей клинической картины и результатов дополнительных инструментальных исследований (электрофизиологические методы для оценки состояния зрительного нерва и сетчатки, допплерографию для изучения особенностей кровоснабжения в орбите и оптическую когерентную томографию макулярной области и диска зрительного нерва). Анализ полученных результатов исследования позволил дополнить протокол лечения нейропротекторами, антигипоксантами, антиоксидантами, ангиопротекторами, м- и х-холиномиметиками, в т.ч. антихолинэстеразными средствами, корректорами микроциркуляции в глазу, а так же препаратами, улучшающими обменные процессы в поперечно-полосатой мускулатуре, в разных сочетаниях. Наше исследование показало, что применение индивидуального плана комплексной консервативной терапии повысило клинический эффект лечения в 81 наблюдении (96,4%). При оценке динамики клинических симптомов получены статистически значимые данные, свидетельствующий об снижении активность заболевания: исчезновение болей при движении глаз (р<0,001); уменьшение отека век (р=0,031), конъюнктивы (р<0,039), полулунной складки (р<0,001) и гиперемии конъюнктивы (р<0,001), улучшение контрастной чувствительности (увеличение порога светочувствительности (p=0,02), снижение среднего дефекта поля зрения (p=0,001), улучшения/восстановления кровотока в орбите и укорочения латентности зрительно-вызванных потенциалов. Отмечено повышение зрительных функций у всех больных. ВЫВОДЫ: персонифицированный подход к составлению индивидуального плана комплексной медикаментозной терапии повышает эффективность лечения больных с активной стадией ЭОП.

В структуре онкологических заболеваний глаза опухоли придаточного аппарата встречаются наиболее часто, их дифференциальная диагностика может представлять значительные сложности, окончательный диагноз ставится по результатам морфологического исследования. Известно, что опухолевые клетки отличаются от нормальных не только морфологически, но и более высоким уровнем клеточного метаболизма. Это обуславливает способность опухолевых клеток с высокой скоростью восстанавливать катионы и генерировать in situ биогенные наночастицы из искусственно внесённого источника катионов серебра. Цель исследования: разработка нанобиотехнологического метода экспресс- диагностики опухолей придаточного аппарата глаза. Материалы и методы. Образцы опухолевых тканей придаточного аппарата глаза и здоровых тканей из того же глаза помещали в стерильные аликвоты раствора соли серебра и оценивали их восстановительную активность по уровню синтеза биогенных наночастиц. Формирование наночастиц регистрировали спектрометрическим методом. Результаты. При сравнительном анализе восстановительной активности зафиксирован более высокий уровень формирования in situ биогенных наночастиц серебра в реакционной смеси со злокачественными опухолями (3.8±0.5) придаточного аппарата глаза по сравнению с доброкачественными (2.2±0.4). Выводы. Разрабатываемый метод позволяет проводить экспресс-диагностику злокачественных и доброкачественных опухолей придаточного аппарата глаза для оптимизации тактики хирургического лечения. Для уточнения уровней восстановительной активности различных видов опухолей проводятся дальнейшие исследования. In the structure of ocular oncological diseases, tumors of eye adnexa are most common, their differential diagnosis can present significant difficulties, the final diagnosis is made according to the results of morphology study. It is known that tumor cells differ from normal ones not only morphologically, but also by a higher level of cellular metabolism. This determines the ability of tumor cells to restore cations at a high rate and generate in situ biogenic nanoparticles from artificially introduced source of silver cations. Aim: development of nanobiotechnological method for express diagnostics of ocular adnexal tumors based on the biogenic synthesis of silver nanoparticles. Materials and methods. Ocular adnexal tumors samples and healthy tissues from the same eye were placed in sterile aliquots of a silver salt solution and their reducing activity was evaluated by the level of biogenic nanoparticle synthesis. The formation of nanoparticles was recorded by the spectrometric method. Results. A comparative analysis of the reducing activity revealed a higher level of in situ formation of biogenic silver nanoparticles in the reaction mixture with malignant 94 tumors (3.8±0.5) of ocular adnexa to benign ones (2.2±0.4). Conclusion. The developed method allows for express diagnostics of malignant and benign tumors of ocular adnexa to optimize surgical treatment tactics. Further studies are being conducted to clarify the levels of restorative activity of various types of ocular adnexal tumors.

СОВРЕМЕННЫЕ МЕТОДЫ ДИАГНОСТИКИ ОПТИЧЕСКОЙ НЕЙРОПАТИИ ПРИ ЭНДОКРИННОЙ ОФТАЛЬМОПАТИИСаакян С

A clinical and morphological description of a case of pilocytic astrocytoma (astrocytic hamartoma) of the retina and optic nerve in an 11-year old girl is presented. The clinical and instrumental characteristics of the tumor are determined by ultrasound and MRI tests. Detailed cytological and pathomorphological description of the tumor, which is rarely observed, is given. The tumor poses a threat to the eye and requires that the eyeball be removed.

The immune response to any antigen includes the induction of effector and regulatory T lymphocytes. In tumors, an imbalance in the subpopulation of lymphocytes is noted. Ophthalmotropic pathogens of herpes virus infections play a role in the etiopathogenesis of some oncological processes in the tissues of the eye. Their “cancer modulating” role is to regulate the functions of immunocompetent cells by viruses and reprogram it in the direction of greater progression of tumor growth. The aim of our study was a comparative analysis of the content of effector subpopulations of blood lymphocytes in patients with uveal melanoma during activation and the chronic course of herpes virus infection. The study involved 141 people: with uveal melanoma 70 patients, with corneal ulcers and involvement of the uveal tract - 38 patients and 33 healthy donors. Immunophenotyping was performed by flow laser cytofluorimetry using a monoclonal antibody system to differentiate lymphocyte subpopulations. IgM and IgG antibodies to herpes virus infections were determined in an enzyme-linked immunosorbent assay (ELISA) on an automatic ELISA analyzer "Lazurite" (USA) with diagnostic kits of CJSC Vector-Best (Koltsovo). The results of the study showed that the absolute number of blood lymphocytes (CD45 +) in patients with uveal melanoma, regardless of the presence of active or chronic herpes virus infection, did not differ from the values in healthy donors. In patients with corneal ulcers involving the uveal tract, an increase was noted. A decrease in the relative and absolute content of T cells (CD3+) was revealed in patients with uveal melanoma during activation and the chronic course of herpes virus infection. An increase in the absolute content of CD3 + was noted in patients with active and chronic herpesvirus infection in patients with inflammatory lesions of the eye. There was no difference in the relative and absolute contents of the subpopulation of CD3 + CD4 + helpers / inducers upon activation of herpes virus infections in tumor. With corneal ulcers - a significant increase in the absolute content of CD3 + CD4 + helpers / inducers with active and chronic infection. In chronic herpes virus infection, an increase in the relative and absolute number of cytotoxic T-lymphocytes (CD3 + CD8 +) with uveal melanoma was revealed. With active infection, a decrease in the relative number of T-lymphocytes (CD3 + CD8 +) in the tumor was noted. With corneal ulcers involving the uveal tract, an increase in the absolute content during activation and chronic infection and a decrease in the relative content compared to the norm were determined. When analyzing the “double positive” T cells in a tumor, an increase in relative and absolute indices was observed in chronic and active infection with herpes viruses. The same trends were observed with inflammatory eye diseases. Analysis of the content of B-lymphocytes (CD19 +) in blood with melanoma showed an increase in the absolute number during activation and the chronic course of herpes virus infection. When analyzing the indicators of the absolute and relative content of B-lymphocytes (CD19 +) with inflammation of the membranes of the eyes, their increase was revealed regardless of activation or chronic infection. The relative number of natural killers (CD16 + CD56 +) of blood with uveal melanoma increased with infection activation. In inflammatory eye diseases, a decrease in the relative content of natural killers (CD16 + CD56 +) was found in chronic infection and active herpes virus infection. With melanoma, no changes in the index of the ratio CD4 + / CD8 + were detected, with ulcerative lesions of the cornea involving the uveal tract, its increase was noted in acute and chronic infections with herpes virus infections. (p <0.05). Thus, our own studies suggest a deep suppression of the immune system of the body of patients with uveal melanoma, which does not allow the activation of antiviral protection. Tumor causes multidirectional shifts in the relative and absolute content of lymphocytes during activation and chronic infection with herpes virus infections. The results obtained are important for the development of personalized approaches to the prognosis and treatment of patients with uveal melanoma.

IV (XXVII) Национальный конгресс эндокринологов с международным участием «ИННОВАЦИОННЫЕ ТЕХНОЛОГИИ В ЭНДОКРИНОЛОГИИ» 22-25 сентября 2021 года ДИАГНОСТИКА ДОКЛИНИЧЕСКИХ ПРИЗНАКОВ ОПТИЧЕСКОЙ НЕЙРОПАТИИ ПРИ ЭНДОКРИННОЙ ОФТАЛЬМОПАТИИ Саакян С .В ., Пантелеева О .Г ., Мякошина Е

Введение. Увеальная меланома – злокачественная опухоль сосудистой оболочки глаза с наиболее частой локализацией в хориоидее. Диагностика и лечение опухоли на начальных стадиях ее развития имеет большое медикосоциальное значение в связи со склонностью к раннему метастазированию и плохому витальному прогнозу. До настоящего времени не оценивали эффективность лазерного лечения пациентов с начальной меланомой хориоидеи при наличии артифакии. Цель. Оценить эффективность лазерного лечения пациентов с начальной меланомой хориоидеи при артифакии. Материал и методы. Проведено лечение 30 пациентам с начальной меланомой хориоидеи и артифакией в возрасте 74,1±5,3 года. Уровень проминенции опухолей, по данным УЗИ, составил 1,1±0,3 мм, диаметр основания – 8,1±0,6 мм. В зависимости от размеров новообразования пациентам выполняли разрушающую лазеркоагуляцию и транспупиллярную термотерапию, проводился 1 сеанс лазерного лечения. Срок наблюдения составил 5,1±0,6 месяца. Результаты. После лечения в 22 (73,3%) из 30 случаев на глазном дне выявили хориоретинальный рубец, что подтверждалось УЗИ и СОКТ. Недостаточный эффект отмечен у 8 (26,6%) из 30 пациентов с локализацией опухоли на средней периферии в виде светло-серой остаточной опухоли, что также подтверждалось инструментальными методами исследования. Биомикроскопический осмотр интраокулярной линзы показал сохранность ее положения и прозрачности.- Заключение. У пациентов с начальной меланомой хориоидеи и артифакией разрушающая лазерная коагуляция и транспупиллярная термотерапия являются методами выбора. Морфометрические исследования с большей точностью позволяют выявить хориоретинальный рубец или остаточную опухоль хориоидеи. Для повышения эффективности лазерных операций начальной меланомы хориоидеи и оптимизации параметров воздействия необходимо учитывать аберрации искусственного хрусталика, особенно при локализации образования на средней периферии глазного дна. Background. Uveal melanoma is a malignant tumor of the vascular membrane of the eye with the most frequent localization in the choroid. Diagnosis and treatment of the tumor at the initial stages of its development is of important medical and social importance due to the tendency to early metastasis and poor vital prognosis. So far the effectiveness of laser treatment of patients with primary choroidal melanoma in the presence of pseudophakia was not evaluated. Purpose. To evaluate the effectiveness of laser treatment of patients with primary choroidal melanoma in the presence of pseudophakia. Material and methods. The treatment of 30 patients with small choroidal melanoma and pseudophakia at the age of 74,1±5.3 years was conducted. The level of prominence of tumors, according to ultrasound data, was 1.1±0.3 mm, the diameter of the base-8.1±0.6 mm. Depending on the size of the tumor, patients underwent destructive laser coagulation and transpupillary thermotherapy, and 1 session of laser treatment was performed. The follow-up period is 5.1±0.6 months. Results. After treatment, in 22 (73,3%) of the 28 cases we revealed a chorioretinal scar on the fundus, which was confirmed by ultrasound and ОСT. Insufficient effect was observed in 8 (26,6%) from 30 patients with tumor localization in the middle periphery as a light-gray residual tumor, which was also confirmed by instrumental research methods. Biomicroscopic examination of the intraocular lens showed the stability of its position and transparency. Conclusion. Laser photocoagulation and transpupillary thermotherapy are the methods of choice in patients with early choroidal melanoma and pseudophakia. Morphometric studies can reveal a chorioretinal scar or residual tumor of the choroid with greater accuracy. To increase the effectiveness of laser operations for the early choroid melanoma and optimize the impact parameters, it is necessary to consider the aberrations of the artificial lens, especially when the formation is localized on the middle periphery of the fundus.

Цель исследования – определить морфометрические и генетические предикторы опухолевой транс- формации меланоцитарных внутриглазных новообразований. Материал и методы. В проспективном исследовании проанализирован 81 пациент (84 глаза) с мела- ноцитарными внутриглазными новообразованиями. Всем больным проводили стандартное офталь- мологическое обследование и специальные инструментальные методы диагностики (ультразвуковое исследование – УЗИ, оптическая когерентная томография в режиме улучшенного глубокого изображения – ОКТ в режиме «EDI» с ангиографическим режимом – ОКТ−А). Больные были разделены на 3 группы с учетом особенностей клинической картины. Всем пациентам проводили органосохранное лазерное лечение (n=36) и брахитерапию (n=1). Для исключения отдаленных метастазов больным выполняли магнитно-резонансную томографию органов брюшной полости с контрастированием и компьютерную томографию органов грудной клетки. Изучение мутаций в генах GNAQ/GNA11 осуществляли с помощью анализа кривых плавления и метода определения полиморфизма длины рестрикционных фрагментов (ПЦР-ПДРФ-анализ). В качестве контрольной группы использовали выборку лиц без онкологических заболеваний, сопоставимую по возрасту и полу (n=31). Результаты. При сравнительном анализе выявлены значимые предикторы прогрессии стационарного невуса хориоидеи в прогрессирующий, к которым относятся конвекс-деформация ретино-хориоидального профиля, ослабление гиперрефлективности на уровне хориокапилляров, расширение перитуморальных хориоидальных сосудов и компримирование их в центральной зоне, локальная отслойка и выраженная гиперплазия ретинального пигментного эпителия, щелевидная и локальная отслойка нейроэпителия, интраретинальные микрокисты, дезорганизация структуры фоторецепторов. Кроме того, определяли предикторы озлокачествления прогрессирующего невуса в начальную меланому хориоидеи. Количест- венный анализ плотности сосудов на уровне хориокапилляров показал увеличение изучаемого пара- метра при прогрессирующем невусе хориоидеи по сравнению с начальной меланомой и стационарным невусом, что могло служить предиктором опухолевого роста. Заключение. В настоящей работе впервые с помощью ОКТ в режиме «EDI» и ОКТ-А выявлен симп- томокомплекс предиктивных маркеров, включающих хориоидальные и опухоль-ассоциированные ре- тинальные изменения, характеризующие прогрессию и озлокачествление невусов хориоидеи. Кроме того, диагностированы молекулярно-генетические особенности в периферической крови у пациентов с невусами и начальной меланомой хориоидеи. Выявленные показатели могут быть использованы для скрининга пациентов с невусом хориоидеи с высоким риском малигнизации, а также для разработки современных подходов к прогнозированию течения меланомы хориоидеи на ранних стадиях онкогенеза. Aim. To determine OCT-morphometric and genetic predictors of the malignant transformation in melanocytic intraocular tumors. Material and methods. 81 (84 eyes) previously untreated patients with melanocytic intraocular tumors were examined. All patients underwent standard ophthalmological examination and special instrumental diagnostic assessment (ultrasound examination (US), enhanced depth imaging (EDI) optical coherence tomography (OCT), OCT angiography). The bilateral form was diagnosed in 2 (2.4%) patients: in the first case, the benign and suspicious choroidal nevi were detected in the paired eye, in the second case, small choroidal melanoma in both eyes. Multifocal lesions were determined in 3 (4%) patients: in the first case, foci with small melanoma and suspicious choroidal nevus were diagnosed. In the second and third cases, two and three foci with a benign choroidal nevus were identified. Patients were assigned to the following groups: 1st group – with benign choroidal nevus (n=26 foci; mean age 61.1±13.6 years). Gender distribution: female – 18, male – 5. Multifocal lesions were diagnosed in 2 patients (2 and 3 lesions). Thus, the study included 26 benign choroidal nevi. US showed no detectable tumor. 2nd group consisted of patients with suspicious choroidal nevus (n=24 foci; mean age 55±13 years). Gender distribution: female – 22, male – 3. Mean tumor thickness was 0.5±0.1 mm, basal diameter – 5.4±1.9 mm. 3rd group – small choroidal melanoma (n=37 foci; mean age 56.2±14.8 years). Genotyping was performed by high resolution melting analysis. Gender distribution: female – 27, male – 9. Average tumor size according to US was 1,3±0,4 mm (thickness) and 6.9±2.1 mm (basal diameter). All patients underwent laser treatment (n=36) and brachytherapy (n=1). To exclude distant metastases, the patients underwent contrast-enhanced magnetic resonance imaging of the abdominal organs and computed tomography of the chest. Mutations in GNAQ/GNA11 oncogenes were detected using the high resolution melting and polymerase chain reaction-restriction fragment length polymorphism (PCR-RFLP) analyses. The control group was a cohort of individuals without malignancies, comparable in age and sex (n=31). Results. Comparative analysis revealed statistically significant predictors of benign choroidal nevus progression into a suspicious choroidal nevus, which include convex deformation of the retino-choroidal profile, weakening of hyperreflectivity at the choriocapillaries level, expansion of the peritumoral choroidal vessels and their compression in the central zone, local detachment and severe hyperplasia of the retinal pigment epithelium (RPE), slit-like and local detachment of the retinal neuroepithelium (NE), intraretinal microcysts, disorganization of the photoreceptor structure (p<0.05). In addition, predictors of a suspicious nevus transformation into the small choroidal melanoma were determined, which include choroidal “excavation”, defects in RPE, «shaggy» photoreceptors, accumulation of subretinal hyperreflective deposits (p<0.05). A quantitative analysis of vascular density at the choriocapillaries level showed an increase in the studied parameters in suspicious choroidal nevus compared with small melanoma and benign nevi (p<0.05), which could be a predictor of tumor growth. A significant increase in the density of perfusion of small choroidal melanoma was revealed when compared with group 2 (p=0.02). A comparative analysis of three groups and the control group revealed that mutations in the GNAQ and GNA11 genes in circulating tumor DNA are significantly more common in patients with small melanoma and choroidal nevi. In the control group, oncogenes in circulating tumor DNA were not detected. In patients with small melanoma and suspicious choroidal nevi, mutations in GNAQ/GNA11 in blood are significantly more common than in patients with benign choroidal nevi (1 and 3 groups; p=0.0004; 1 and 2 groups: p=0.0008). In groups 2 and 3, there were no significant differences depending on the presence of mutations in GNAQ and GNA11 genes (p>0.05), which may indicate a high risk of transformation of a suspicious nevus into choroidal melanoma. Conclusion. In the present paper, a symptom complex of predictive markers was revealed for the first time using EDI-OCT and OCT-A, including the choroidal and the tumor-associated retinal changes that characterize the progression and malignancy of choroidal nevi. Genetic features in circulating tumor DNA were diagnosed in patients with nevi and small choroidal melanoma. The revealed features can be used for screening in patients with high-risk choroidal nevi, as well as for developing modern approaches to predict the course of choroidal melanoma in the early stages of oncogenesis.

Purpose : to analyze the frequency and possible associations of GNAQ and GNA11 oncogenes in peripheral blood ctDNA, as well as the relationship of the ABCB1/MDR1 rs1045642 polymorphic marker gene with the clinical and instrumental characteristics of nevi and initial choroidal melanoma. Material and methods . A prospective study of 81 previously untreated patients (84 eyes, mean age 57.8 ± 13.8 years) included general ophthalmological examinations and special instrumental diagnostics: ultrasound checkups, spectral optical coherent tomography (SOCT), OCT angiography. Depending on the nature of the pathology, the patients were divided into three groups: I — with benign choroidal nevus (23 eyes, 28 %; mean age 61.1 ± 13.6 years); II — with suspicious choroidal nevus (24 eyes, 29 %; mean age 54.8 ± 13.0 years); III — small choroidal melanoma (37 eyes, 43 %; mean age 56.2 ± 14.8 years). Genotyping was performed by melting curve analysis. Results . A significant association was revealed between the presence of ctDNA (GNAQ/GNA11 oncogenes) and the CC genotype of the ABCB1 gene with the risk of developing a small melanoma of the choroid and choroidal nevi. In patients with suspicious choroidal nevus, there is an unfavorable significance of mutations in the GNAQ/GNA11 genes (ctDNA). A relative unfavorable predictive significance of the presence of mutations in the GNAQ/GNA11 genes in peripheral blood ctDNA of patients with a benign choroidal nevus was suggested. No significant associations between GNAQ/GNA11 mutations, ABCB1 gene polymorphism and clinical/instrumental tumor features were found. Conclusion . The revealed features can be used for screening the patients with melanocytic intraocular tumors and for developing modern approaches to predicting the course of UM in the early preclinical period.

Актуальность. При наследственной ретинобластоме герминальная мутация в одном из аллелей гена RB1 обусловливает предрасположенность к заболеванию и его семейную передачу. Наследственная ретинобластома манифестирует в более раннем возрасте по сравнению со спорадической формой и носит в большинстве случаев мультифокальный и билатеральный характер. Однако некоторые семьи с ретинобластомой (два и более носителя одинаковой герминальной мутации в родословной) демонстрируют более мягкий фенотип с неполной пенетрантностью (у части носителей герминальной мутации заболевание не развивается) и вариабельной экспрессивностью (одинаковая мутация у разных членов семьи может проявляться уни- или билатеральной формой заболевания). Выявление низкопенетрантных мутаций в гене RB1 и изучение характера их наследования способствует пониманию механизмов, лежащих в основе развития наследственной ретинобластомы с низкой пенетрантностью, и крайне важно как для дальнейшего расширения знаний о молекулярной генетике ретинобластомы, так и для медико-генетического консультирования и последующего клинического ведения семей с такой формой заболевания. Цель. Установить спектр генетических нарушений в гене RB1 у больных с наследственной ретинобластомой с неполной пенетрантностью и вариабельной экспрессивностью в выборке российских пациентов и определить влияние родительского происхождения мутации в RB1 на её фенотипическое проявление. Методы. Методом высокопроизводительного параллельного секвенирования проведено молекулярно-генетическое обследование 332 неродственных больных с ретинобластомой. Для верификации выявленных точковых мутаций и анализа их сегрегации в родословных использовали секвенирование по Сэнгеру. Результаты. В группе пациентов без семейного анамнеза ретинобластомы у 3,5% больных определен наследственный характер заболевания, при котором один из родителей являлся бессимптомным носителем герминальной мутации в гене RB1. Выявлено 10 низкопенетрантных мутаций в гене RB1 и установлен спектр мутаций, приводящих к развитию наследственной ретинобластомы с низкой пенетрантностью. В 91,7% случаев наследственной ретинобластомы с низкой пенетрантностью мутантный аллель получен пробандом от отца, у которого отсутствовали клинические признаки заболевания или наблюдалась более легкая форма. Выводы. Полученные результаты подтверждают ранее высказанные предположения, что низкопенетрантные герминальные мутации в гене RB1, унаследованные от отца, чаще приводят к развитию ретинобластомы, и в более тяжелой форме по сравнению с таковыми, унаследованными от матери. Background. In hereditary retinoblastoma, a germline mutation in one of the alleles of the RB1 gene causes a predisposition to the disease and its transmission within the pedigree. Hereditary retinoblastoma manifests at an earlier age compared with the sporadic form and in most cases is multifocal and bilateral. However, some families with retinoblastoma (two or more carriers of the same germline mutation in the pedigree) exhibit a milder phenotype with incomplete penetrance (some carriers of the germline mutation are asymptomatic) and variable expressivity (the same mutation in different family members may manifest as either a unilateral or bilateral form). Identification of low-penetrant mutations in the RB1 gene and studying their inheritance in pedigrees contributes to understanding the mechanisms underlying the development of retinoblastoma with low penetrance. It is extremely important both for further expansion of knowledge in the field of molecular genetics of retinoblastoma, and for competent genetic counseling and subsequent clinical management of families with this form of the disease. Objective. To establish the spectrum of genetic disorders in the RB1 gene in Russian patients with hereditary retinoblastoma with incomplete penetrance and variable expressivity and to determine the effect of the parental origin of the RB1 mutation on its phenotypic manifestation. Methods. Using high-performance parallel sequencing, a molecular genetic survey of 332 unrelated patients with retinoblastoma was performed. Sanger sequencing was used to verify the identified point mutations and analyze their segregation in pedigrees. Results. In the group of patients without a family history of retinoblastoma, in 3.5% the hereditary nature of the disease was determined, where one of the parents was an asymptomatic carrier of a germline mutation in the RB1 gene. Ten low-penetrant mutations in the RB1 gene were identified. In 91.7% of cases of hereditary retinoblastoma with low penetrance, the mutant allele was obtained by a proband from a father with no clinical signs of the disease or with a milder form. Conclusion. The results confirm the previously suggested assumptions that low-penetrant germline mutations in the RB1 gene inherited from the father more often lead to the development of retinoblastoma, and in a more severe form than those inherited from the mother.

Aim of the study – to evaluate the long-term results of the radiosurgical method using microsurgical techniques for the treatment of small benign eyelid tumors. Material and methods . In Ocular Oncology Centre of Helmholtz Moscow Research Institute of Eye Diseases for the period from 2012 to 2018 year 248 patients were examined and treated (108 children aged 12 ± 1.2 years and 140 adults aged 46 ± 8.1 years) with benign eyelid tumors: pigmented (nevus), vascular (capillary hemangiomas), epithelial (follicular keratosis, keratopapilloma). The Surgitron EMC radiosurgery device was used as surgical aids. All patients used microsurgical technique. The longitudinal size of the tumors was 3.4 ± 0.5 mm, transverse – 6 ± 0.8 mm. All patients after surgical treatment underwent histopathological study. The observation period is on average 6 ± 1.4 years. Results . In 133 (53.6 %) of 248 patients, nevi were detected, in 76 (30.7 %) – keratopapilloma and inverted follicular keratosis, in 39 (15.7 %) – capillary hemangioma. Various modifications of radiosurgical treatment were used depending on the location of the tumor, its size, the degree of activity using different modes and powers from 1 to 4 Wt. Intraoperative complications were not noted. The early postoperative period was accompanied by the presence of signs of mild inflammation, which was stopped by local therapy. The formation of a tender scar was observed on average after 7 ± 2 days. Two cases (0.8 %) of recurrence of keratopapilloma were noted 2 years after the first operation. Tumors were removed by radio excision. Conclusion . Benign eyelid tumors, especially of melanocytic origin, are subject to obligatory dynamic observation, and if minimal signs of their progression are detected, their surgical removal is indicated. Radiosurgical treatment using microsurgical techniques is the method of choice in the treatment of small benign eyelid tumors and depends on the size of the tumor, its localization and the nature of the tumor process. The use of the radiosurgical method with obligatory microsurgical technique for treating benign tumors of small sizes with the observance of the rules of radicalness and antiblasticity allows maintaining visual functions with simultaneous surgical treatment, providing normal anatomical and topographic correlations of the anterior segment of the eye and high quality of life of the patient.

Актуальность. Кавернозные гемангиомы орбиты наиболее часто встречающиеся доброкачественные новообразования, методом лечения которых являются только хирургические операции. Однако до настоящего времени не разработана тактика ведения пациентов с малыми кавернозными гемангиомами орбиты, которые являются, как правило, случайной находкой. Цель работы. Разработка оптимальной тактики ведения больных малыми кавернозными гемангиомами орбиты. Материал и методы. За период с 2015 по 2017 г. в отделении офтальмоонкологиии радиологии ФГБУ МНИИ ГБ им. Гельмгольца Минздрава России обследованы и пролечены 92 пациента с кавернозными гемангиомами орбиты в возрасте в среднем 46,43,6 года. Малые опухоли выявлены у 17 (18,5) пациентов (3 мужчины, 14 женщин), они локализовались во внутреннем хирургическом пространстве параневрально. До операции проводили комплексное ультразвуковое исследование (УЗИ) с режимом цветового допплеровского картирования (ЦДК), компьютерную томографию (КТ) и/или магнитнорезонансную томографию (МРТ) орбиты. Спектральную оптичес кую когерентную томографию сетчатки (морфометрию) осуществляли до и после операции. Проведены трансконъюнктивальная (11) и транскутанная (6) орбитотомия. Диагнозы гистологически верифицированы. Сроки наблюдения в среднем 1,80,6 года. Результаты. Клиническая симптоматика отсутствовала у 13 из 17 больных. При этом на томограммах выявлено ограниченное гетерогенное образование с четкими контурами округлой или овальной формы, плотностью в среднем 46,7711,7 HU, диаметром в среднем 6,01,8 мм параневральной локализации, расположенное у заднего полюса глаза, в средних отделах и у вершины орбиты. Объем кавернозной гемангиомы, при котором зафиксирован кровоток в ткани новообразования по УЗИ с режимом ЦДК, составил 1 см3 (13x12x12 мм). Сравнительный анализ допплеровских характеристик регионарного кровотока не выявил асимметрии в показателях больной и здоровой орбит при опухолях малых размеров (р0,05). Морфометрические показатели до операции в норме. После проведения орбитотомии (транскутанной 3 больным и трансконъюнктивальной 5 пациентам) в раннем послеоперационном периоде у 8 из 17 пациентов подвижность глазного яблока была сохранена во все стороны, верхнее веко поднималось, зрительные функции сохранены. Морфометрически отмечали утолщение сетчатки макулы в среднем до 23018 мкм (р0,05) и перипапиллярного слоя нервных волокон в среднем до 12014 мкм (р0,05) во всех квадрантах. В те же сроки после транскутанной (2) и трансконъюнктивальной (1) орбитотомии у 3 из 17 больных наблюдали отклонение и ограничение подвижности глаза, птоз верхнего века, морфометрически отмечалось увеличение толщины сетчатки макулы (в среднем до 23419 мкм р0,05) и перипапиллярного слоя нервных волокон (в среднем 12216 мкм р0,05) во всех квадрантах. Нарушение функций глаза в виде мидриаза, снижение остроты зрения в среднем на 0,40,02 наблюдали у 6 из 17 больных после орбитотомии (4 трансконъюнктивальных и 2 транскутанных). На глазном дне диагностировали макулярный отек сетчатки с увеличением ее толщины в среднем до 32612,8 мкм(p0,001), утолщение перипапиллярного слоя нервных волокон в среднем до 23019 мкм (p0,001) во всех квадрантах. Учитывая параневральную локализацию опухоли всем больным во время операции и в раннем послеоперационном периоде проводили интенсивную нейропротекторную, противовоспалительную и дегидратационную терапию. После проведения курса интенсивной медикаментозной терапии через 3 месяца отмечалось улучшение показателей остроты зрения и морфометрических критериев. Заключение. Показанием к орбитотомии при кавернозной гемангиоме орбиты параневральной локализации является наличие клинической симптоматики, размер опухоли по данным инструментальных методов 1 см3 (13x12x12 мм), подтвержденный КТ и МРТ, снижение всех скоростных характеристик кровотока и повышение индексов периферического сопротивления сосудов. Показано применение морфометрических исследований до операции и в раннем и отдаленном послеоперационных периодах после орбитотомии кавернозных гемангиом параневральной локализации с целью прогноза зрительных функций. Персонализированное планирование лечения кавернозных гемангиом орбиты с использованием современных высокотехнологичных методов исследования имеет большое значение для зрительного прогноза и качества жизни больных. Background. Cavernous hemangiomas are the most common benign neoplasms of the orbit, whose treatment is surgery only. However, the optimal management of patients with small cavernous hemangiomas, which most often are an occasional finding, has not been developed to date. Purpose. To develop an optimal treatment tactics for patients with small cavernous orbital hemangiomas. Material and methods. From 2015 to 2017 92 patients with cavernous hemangiomas of orbit (average age 46.43.6 years) were examined and treated in the department of ophthalmic oncology and radiology of the Helmhotz Moscow Research Institute of Eye Diseases. Seventeen (18.5) patients (3 men, 14 women) had small lesions localized in the internal surgical space perineurally. Before surgery, all patients underwent a complex examination: ultrasound with a color Doppler mapping mode, computed tomography and / or a magnetic resonance imaging of the orbit, while spectral optical coherence tomography (morphometry) was performed before and after the operation. Transconjunctival (11) and transcutaneous (6) orbitotomy were performed. Diagnoses were histologically confirmed. The observation period was 1.80.6 years. Results. Clinical symptoms were absent in 13 of 17 patients. CT and MRI scans showed a local heterogeneous lesion with distinct contours of a round or oval shape with an average density of 46.7711.7 HU with an average diameter of 61.8 mm, located paraneurally at the posterior pole of the eye, in the central part and at the apex of orbit. The volume of cavernous hemangioma defined by Doppler was 1 cm3 (13x12x12 mm). Comparative analysis of Doppler characteristics of regional blood flow did not reveal asymmetry in the parameters between the lesion and normal orbital tissue (p0.05). Morophometric parameters before surgery were normal. In the postoperative period 8 patients showed good mobility of the eyeball in all directions, the upper eyelid was raised, the visual functions were preserved. Morphometry revealed thickening of macular retina (up to 23018 m, in average, p0.05) and the peripapillary layer of nerve fibers (on average 12014 m, p0,05) in all quadrants. Deviation and limitation of eye mobility, ptosis of the upper eyelid were seen in 3 of 17 patients in the early postoperative period, morphometry showed increased thickness of the macular retina (up to 23419 m, in average, p0.05) and peripapillary layer of nerve fibers (12216 microns, p0,05) in all quadrants. Dilation of the pupil and decreased visual acuity by 0.40.02 were detected in 6 of 17 patients. Macular edema of the retina with an increased thickness to an average of 32612.8 m (p0.001) was found in the ocular fundus, with thickening of the peripapillary layer of nerve fibers (average 23019 m p0.001) in all quadrants. Improvement in visual acuity and morphometric criteria was observed at 3 months after intensive therapy. Conclusion. 1. Patients with small orbital paraneural cavernous hemangiomas are subjected to orbitotomy in case of the presence of clinical symptoms, tumor size of 1 cm3 (13x12x12mm), confirmed by CT and MRI, decreased blood flow velocity characteristics and increased peripheral vascular resistance indices. 2. The use of morphometry before the operation and in the early and late postoperative period after orbitotomy may preserve visual functions. 3. Personalized planning of treatment using modern visualization methods is essential for patients with cavernous hemangiomas of the orbit.

Background: Retinoblastoma is a malignant tumor of the eye retina that occurs mostly in children. In the absence of treatment, the disease leads not only to vision loss, but also to death of the child. At present, combined organ-preserving methods of treatment are preferred. These include polychemotherapy and a local intervention on the tumor, the "golden standard" of which being brachytherapy. Aim: To study the effectiveness of brachytherapy against the background polychemotherapy. Materials and methods : We analyzed retrospectively medical files of 104 children with retinoblastoma aged from 5 months to 5 years (mean age 21  months), who underwent brachytherapy as a local component of management from 2010 to 2015 in the Moscow Helmholtz Research Institute of Eye Diseases. Multifocal lesions were identified in 43 cases and bilateral tumors in 87 children. In 33 cases, the worst eye was removed. Endophytic and mixed forms of tumors growth were most prevalent. Before the brachytherapy, all children received polychemotherapy (2 to 3 courses). The average tumor thickness was 2.74 mm (from 1 to 6.4 mm); its mean maximal transverse dimension was 6.27 mm. Indigenous ophthalmic applicators with isotopes 90 Sr + 90 Y and 106 Ru + 106 Rh were used. The average dose on the tumor apex with the strontium applicator was 142.1 (120–170) Gy, with ruthenic one, 107.4 (69–168) Gy; the scleral doses were 751.3 и 504.4 Gy, respectively. The median follow-up was 51 months. The patients were assessed every 3 to 4 months with ophthalmoscopy and ultrasound examination. The following effectiveness criteria were used: complete resorption, the tumor cannot be identified; partial resorption, a decrease in the initial tumor size by at least 50%; no effect, a decrease in the initial tumor size by less than 50% or an increase in the size of the tumor. Results: Complete resorption of the tumor occurred in 60.6% (n = 63) of the patients at 3 months and in additional 24% (n = 25) at 6 months. During the first year after the radiation, complete resorption of retinoblastoma was achieved 93.3% (n = 97) of the children. All children are alive, no distant metastases have been found. Early complications after brachytherapy were noted in 3  children: hemophthalmia, in 1, retinal detachment, in 1, hemophthalmia with retinal detachment, in  1, when the radiation dose on the sclera exceeded 1000  Gy. Continued tumor growth or relapses were detected in 7 (6.7%) patients. The reason to enucleate two eyes was the tumor invasion into the orbit (1.9%). Visual functions are preserved in 85 (81.7%) children, with a high visual acuity (0.9–1.0) in 21 children, and 0.1–0.8 in 21 children, as well. Conclusion : Brachytherapy is a highly effective method of local destruction of retinoblastoma, which, in the vast majority of cases, allows for complete resorption of the irradiated tumor and for maintenance of high visual acuity in almost half of patients.

Choroidal melanoma is a primary malignant intraocular tumor with unfavorable vital prognosis. Factors predisposing to invasion of choroidal melanoma into the optic nerve include its juxtapapillary localization, the large tumor size, its diffuse growth, the presence of necrosis in the tumor, increased intraocular pressure and the epithelioid cell type of the tumor. The authors describe the clinical case of a 31-year-old patient with a primary diagnosis of an optic nerve neoplasm. Peripapillary edema and indistinct optic disc margins were found by ophthalmoscopy. There was a slightly protruding gray-slate lesion with indistinct boundaries near the optic nerve disc. The retina was edematous with multiple merging hemorrhages. The data obtained by echography (the focus protruding both inside the eye and along the optic nerve trunk), color Doppler mapping (single own vessels in the projection of the orbital part of the mass) and computed tomography allowed for the suspicion of the primary choroidal melanoma. To clarify the nature of the process, a trans-conjunctival orbitotomy with a revision of the orbit and the optic nerve was performed. The expansion of the proximal part of the optic nerve with partial breakthrough of the optic nerve shells was revealed intraoperatively. The patient underwent enucleation with morphological and molecular genetic verification of the primary choroidal melanoma with invasion of the optic nerve. The data obtained (absence of chromosome 3 monosomy, deletion of the short arm of chromosome 1, methylation of promoter regions of the RASSF1A gene, mutations in the 4 and 5 exons of the GNAQ gene, CT genotype of the polymorphic marker C3435T of the ABCB1 gene) indicate a relatively favorable vital prognosis, despite the extrascleral growth of the tumor and its mixed cell type. The patient underwent a course of anti-relapse proton irradiation of the orbit with a total dose of 58.8 Gy at 80–90% isodose. Currently, 7 years after the treatment, the patient continues to be followed up by ophthalmologists and oncologists, without any signs of local recurrence and distant metastases. This clinical example demonstrates the possibility of extraocular extension of a small intraocular choroidal melanoma simulating an optic nerve tumor, and confirms the need for a thorough clinical and instrumental examination for a correct diagnosis and adequate management of the patient.

We performed a comprehensive molecular genetic examination of patients with retinoblastoma. For establish molecular diagnosis of the disease, we applied a set of new medical technologies, including targeted high-throughput parallel DNA sequencing (NGS) and multiplex ligation probe amplification (MLPA). Search for point mutations and small indels in RB1 gene was carried out with next generation sequencing on the Ion Torrent PGM. To detect extended deletions in the RB1 gene MLPA method was used. In a group of patients with a bilateral form of the disease, mutations in the RB1 gene were detected in 96.4% of cases. In a sample of patients with a unilateral form of the disease, genetic abnormalities were found in 31.7% of patients. MLPA technique has allowed us to identify somatic deletions in the RB1 gene in tumors of 47.6% patients and germline deletions in 4.4% patients.