[目的]筛选有效防控烟草弯抱叶斑病的杀菌剂.[方法]采用菌丝生长速率法,测定13种杀菌剂对烟草弯孢菌叶斑病菌的生物活性,并选出生物活性较强的几种杀菌剂开展田间防效试验.[结果]室内生物活性测定筛选出的活性较强的5种杀菌剂为450 g/L咪鲜胺水乳剂、125 g/L氟环唑悬浮剂、42.4％唑醚·氟酰胺乳油、250 g/L吡唑醚菌酯乳油、10％苯醚甲环唑水分散粒剂,EC50值分别为0.2997、0.4054、1.4757、3.5247、3.9322 mg/L,田间防效试验防治效果较好的杀菌剂为450g/L咪鲜胺水乳剂和125 g/L氟环唑悬浮剂,防效均在59％以上.[结论]综合室内生物活性测定和田间防效试验的结果,推荐450 g/L咪鲜胺水乳剂和125 g/L氟环唑悬浮剂2种杀菌剂作为烟草弯抱菌叶斑病的优选防治药剂.

In order to effectively control the tobacco Corynespora leaf spot, the biocontrol strain YC2140 screened in the previous work of our laboratory was identified by Biolog automatic microbial identification systemlog automatic microbial identification system 16S rRNA and gyr B sequence molecular identification. Five fungicides commonly used in production and YC2140 were selected for pot and field control experiments. Results showed that the YC2140 strain was identified as Pseudomonas fluorescens by molecular method and Biolog identification system. The pot experiment results showed that under the recommended dosage（449.78 mL/hm~2 or 449.78 g/hm~2）, the control efficacy on Corynespora leaf spot from high to low was fluazinam 500 g/L SC（the control efficacy was78.77%）, prochloraz 450 g/L EW（77.85%）, tebuconazole 430 g/L SC（67.12%）, 1 × 10~8 cfu/mL YC2140 fermentation broth（61.64%） and boscalid 50% WG（46.12%）. The field trial results under the same dosage showed that the control efficacy from high to low was prochloraz 450 g/L EW（43.33%）,fluazinam 500 g/L SC（40.97%）, tebuconazole 430 g/L SC（27.94%）, 1 × 10~8 cfu/mL YC2140fermentation broth（26.15%）, 70% mancozeb WP（dosage 2998.50 g/hm~2, control efficacy 21.99%）. The results of this study can provide reference for the screening of fungicides for the control of tobacco Corynespora leaf spot disease.

[目的]明确贵州烤烟蛙眼病病原菌种类及生物学特性,为烤烟蛙眼病的综合防治提供科学依据.[方法]以采集自贵州烟区的烤烟蛙眼病病叶为材料,采用常规组织分离法和离体叶片接种法进行病原菌分离及致病性测定,利用形态学特征和分子生物学方法对病原菌进行种类鉴定,并对典型菌株进行生物学特性测定.[结果]从采集的病叶样本中共分离获得11株菌株,选取具有代表性的3株菌株YC1110、YC1111和YC1112接种到健康烤烟叶片上,接种6 d后出现典型症状,与田间症状一致,证明3株菌株为烤烟蛙眼病病原菌.ITS序列及系统发育分析表明,供试3株菌株与烟草尾孢(Cercospora nicotianae)的遗传关系很近,且菌落及孢子等形态特征亦符合烟草尾孢.生物学特性测定结果显示,病原菌在25℃、pH 7、光照条件为24 h全黑暗、碳氮源分别为果糖和牛肉浸粉、培养基为番茄琼脂培养基(TA2)时产孢量最多;在25℃、pH 7、碳氮源分别为甘露醇和蛋白胨、培养基为胡萝卜琼脂培养基(CA)和烟叶煎汁琼脂培养基(TA1)时生长最快.病原菌菌丝致死温度为54℃水浴10 min.[结论]引起贵州烤烟蛙眼病的病原菌为烟草尾孢.

为明确烟草棒孢霉叶斑病病原菌产孢的最适条件,采用制作孢子悬浮液于显微镜下计数的方法,研究不同温度、pH值、诱孢方式以及碳氮源等因素对病原菌产孢量的影响.研究结果表明,病原菌在不同的碳氮源中,以果糖和硝酸钠的产孢量最高;在PSA培养基上,病原菌产孢量最多的条件是:温度30℃,pH值7,诱孢方式为将健康离体烟叶洗净,剪成2 cm×2 cm长的方块,121℃高压灭菌20 min放凉后,置于接种的菌饼表面,12 h近紫外光照射/12 h黑暗交替培养.在PDA培养基上,病原菌产孢量最多的条件是:温度28℃,pH值6,诱孢方式为将健康离体烟叶洗净,剪成2 cm×2 cm长的方块,121℃高压灭菌20 min放凉后,置于接种的菌饼表面,12 h光照培养/12 h黑暗交替培养;12 h近紫外光照射/12 h黑暗交替培养.大量的产孢是病原菌试验研究的基础,本研究明确了烟草棒孢霉叶斑病病原菌产孢的最适条件,可为烟草棒孢霉叶斑病的致病机制等试验研究提供相关理论依据.

[目的]明确贵州省烟草附球菌叶斑病病原菌种类及生物学特性,为烟草附球菌叶斑病的防控提供理论依据.[方法]以采集自贵州省烟区的烟草附球菌叶斑病叶为材料,使用常规组织分离法和离体叶片接种法分别对其病原菌进行分离和Koch's法则验证,使用形态学特征结合核糖体内转录间隔区(ITS)、28S rRNA(LSU)、β-微管蛋白(tub2)和RNA聚合酶II第二大亚基(rpb2)部分序列的多核苷酸序列系统学分析方法对病原菌进行鉴定,并使用菌落生长法研究病原菌生物学特性.[结果]从烟草附球菌叶斑病叶片病斑上分离获得病原菌(标记为YC1105),经ITS、LSU、tub2和rpb24个核苷酸片段序列和系统发育分析,菌株YC1105与Epicoccum latusicollum聚为一支,且支持率为100％;在PDA培养基上菌丝为红色,分生孢子椭圆形,单胞,大小为4.35～6.44μm×2.10～3.27μm,分生孢子器椭圆形,无刚毛,NaOH颜色反应呈阳性,其特征与Epicoccum latusicollum相符,结合形态特征和分子生物学方法将病原菌鉴定为E.latusicollum.病原菌生物学特性测定结果表明,菌株YC1105菌丝生长最适培养基为胡萝卜琼脂培养基,在5和10℃生长缓慢,最适温度为28℃,最适碳源为麦芽糖,最适氮源为牛肉浸粉,尿素不利于菌丝生长;病原菌在pH 4～10范围内均能生长,最适pH为6,光照对菌丝生长影响不显著(P>0.05);菌丝致死温度为49℃,水浴10 min.[结论]明确引起贵州烟草附球菌叶斑病的病原菌为Epicoccum latusicollum,该病原菌适宜在弱酸性条件下生长,菌丝生长温度范围较宽.

为明确贵州烟草弯孢菌叶斑病病原菌种类及生物学特性,分别采用组织分离法和离体叶片接种法对其病原菌进行分离和致病性测定,使用形态特征结合分子生物学方法对病原菌进行分类鉴定,并对其生物学特性进行研究.结果表明,该病原菌在以ITS序列构建的发育树中与棒状弯孢(Curvularia clavata)聚为一支,且支持率为100％,结合形态特征将其鉴定为棒状弯孢.生物学特性研究表明,病原菌菌丝生长最适温度为28℃,最适pH为8,在燕麦琼脂(OA)培养基上生长最快,以可溶性淀粉为碳源、牛肉浸粉为氮源时对菌丝生长最有利;菌丝致死温度为53℃,10 min,光照对菌丝生长无显著影响.研究结果可为烟草弯孢菌叶斑病防治提供理论依据.

为明确贵州烤烟棒孢霉叶斑病病原菌种类及生物学特性,本研究采用常规组织分离法对贵州省采集的烟叶进行病原菌分离与纯化,根据柯赫氏法则进行致病性测定,得到两个代表菌株YC1002和YC1104,通过形态学特征及ITS序列将其鉴定为多主棒孢霉(Corynespora cassiicola).生物学特性研究结果表明:病原菌在胡萝卜琼脂培养基(CA)上生长最快,在燕麦琼脂培养基(OA)上产孢量最多,最适生长温度为30℃,最适宜pH 6,菌丝致死温度为52℃ 10 min,光照对菌落生长影响不大.最适碳源为麦芽糖和可溶性淀粉,最适氮源为甘氨酸和苏氨酸.研究结果可为生产上烤烟棒孢霉叶斑病的有效防治提供一定的理论依据.

为连作障碍的生态调控提供技术支撑,采用IonS5TM XL测序平台进行细菌16s RNA高通量测序分析,研究单作烤烟及其与甘薯、丹参和大豆间作对烤烟根际土壤细菌群落组成及功能的影响.结果 表明:不同作物间作烤烟根际土壤48份样品16s RNA的V3～V4区测序共获得3 667 900条有效序列,平均每个样品得到76 415条有效序列,质控有效率达93.77％,以97％的一致性将可分类单元(OTUs)聚类得到6 584个OTUs;间作烤烟根际细菌群落的丰富度提高,多样性降低;烤烟根际土壤细菌主要由44个子功能组成,其中包括水化合物代谢、氨基酸代谢、膜运输、翻译、复制与修复和能量代谢等,表现出功能上的丰富性.间作降低烤烟根际土壤细菌的整体代谢能力和遗传信息处理能力.