Objective:To investigate the clinical effect of improved right hemihepatectomy(MRH)in the treatment of hepatocellular carcinoma(HCC)under the guidance of indocyanine green(ICG)tracer and 3D visualization technology.Methods:Clinical data of 92 patients with HCC who received MRH from January 2018 to December 2020 were retrospectively analyzed,and the patients were divided into traditional group(n=50)and combined group(n=42)according to whether they were guided by ICG tracer combined with 3D visualization technology. Conventional imaging was used to evaluate MRH in the traditional group,and ICG tracer combined with 3D visualization was used to guide MRH in the combined group. The data were processed by SPSS 22.0 software,and measurement data such as perioperative indicators and liver function indicators were represented by(xˉ±s). Repeated measurement analysis of variance was performed for liver function indicators,and independent sample t test was performed for other indicators. The statistical data of postoperative complications were chi-square test. Survival analysis was performed by Kaplan-Meier method and Log-Rank test. P<0.05 was considered statistically significant.Results:Operation time,hilar occlusion time and intraoperative blood loss in combination group were significantly lower than those in traditional group(P<0.05). There was no interaction between time and method at albumin(ALB),total bilirubin(TBil)and alanine aminotransferase(ALT)levels(P>0.05),but the main effect of time and method was significant at ALB,TBil and ALT levels(P<0.05). The total incidence of postoperative complications in the combination group was significantly lower than that in the traditional group(11.9% vs. 30.0%,P<0.05). During the follow-up period,the cumulative overall survival rate and disease-free survival rate of the combination group were significantly higher than those of the traditional group(P<0.05).Conclusion:The treatment of HCC with MRH under the guidance of ICG tracer and 3D visualization technology can not only effectively shorten the operation time and reduce intraoperative injury,but also benefit the postoperative liver function recovery of patients,reduce the occurrence of postoperative complications and improve the prognosis of patients.
目的 检测胃癌组织及细胞中miR-505-3p表达,并探究其对胃癌细胞增殖、克隆形成、迁移和侵袭的影响及潜在分子机制.方法 利用实时荧光定量PCR实验(qRT-PCR)检测胃癌组织、癌旁正常组织及胃癌细胞和人正常胃黏膜细胞中miR-505-3p相对表达;构建miR-505-3p过表达、c-MYC过表达和敲低表达细胞系,通过CCK-8法,克隆斑点形成实验、Transwell侵袭/迁移实验检测miR-505-3p和c-MYC对胃癌细胞增殖、克隆形成及迁移、侵袭的影响;裸鼠皮下成瘤实验验证miR-505-3p对裸鼠肿瘤生长的影响;双荧光素报告实验验证miR-505-3p和c-MYC的靶向关系,并探究其两者间的表达调控作用;Western blot检测miR-505-3p和c-MYC对Wnt/β-catenin通路关键蛋白表达的影响.结果 临床胃癌组织中miR-505-3p表达水平较正常癌旁组织显著下调(0.92±0.37 vs 1.74±0.59),差异有统计学意义(t=3.723,P<0.01).胃癌细胞系MGC803(1.12±0.35),AZ521(2.31±0.24)和HGC-27(2.28±0.43)中miR-505-3p相对表达较人正常胃黏膜细胞系GES1(4.62±0.79)明显降低,差异有统计学意义(F=26.109,P<0.001).miR-505-3p过表达组细胞增殖(0.92±0.27)、克隆形成(51.67±21.75)、迁移(43.25±15.47)、侵袭(38.53±14.76)能力较NC组(1.85±0.34,128.36±36.42,100.08±2.12,100.12±1.94)明显降低,差异均有统计学意义(t=3.131~7.166,均P<0.05);miR-505-3p过表达抑制了裸鼠生长.c-MYC是miR-505-3p的靶基因,miR-505-3p靶向负调控c-MYC.c-MYC过表达组细胞增殖(2.72±0.68)、迁移(147.15±20.36)、侵袭(145.46±22.73)能力较NC组(1.85±0.34,100.08±2.12,100.12±1.94)明显增高,差异均有统计学意义(t=2.455~4.456,均P<0.05);c-MYC过表达可逆转miR-505-3p对胃癌细胞增殖、迁移和侵袭的抑制作用.miR-505-3p过表达组Wnt(0.46±0.07),β-catenin(0.50±0.05)蛋白相对表达水平明显低于NC组(1.01±0.02,1.02±0.02),差异均有统计学意义(t=8.139,7.342,均P<0.001);过表达c-MYC能够逆转miR-505-3p对Wnt和β-catenin蛋白表达的抑制作用.结论 胃癌中miR-505-3p显著低表达,其可通过靶向调控c-MYC表达介导Wnt/β-catenin信号通路激活进而发挥作用参与胃癌的发生发展过程.
目的 检测环状核糖核酸(circular RNA,cicrRNA)hsa_circ_0006950在胰腺癌(pancreatic cancer,PC)中的表达,探讨其对胰腺癌细胞增殖、迁移的影响及其潜在分子作用机制.方法 利用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测hsa_circ_0006950在胰腺癌组织及细胞中的相对表达水平;转染hsa_circ_0006950干扰载体构建低表达细胞系,通过CCK-8实验、克隆斑点形成实验和Transwell实验检测hsa_circ_0006950对胰腺癌细胞增殖、克隆形成及迁移的影响;利用生物信息学网站预测hsa_circ_0006950的miRNA分子靶标及其调控网络(hsa_circ_0006950-miR-124-3p-EZH2),双荧光素酶基因报告实验验证hsa_circ_0006950和miR-124-3p,miR-124-3p和EZH2的靶向结合关系;转染过表达/干扰miR-124-3p和过表达EZH2细胞系,探究miR-124-3p和EZH2及hsa_circ_0006950调控miR-124-3p/EZH2轴对胰腺癌细胞克隆形成及迁移的影响.结果 胰腺癌组织中hsa_circ_0006950表达明显高于癌旁正常组织(3.57±0.52 vs 1.01±0.03),差异有统计学意义(t=21.980,P<0.001).胰腺癌细胞PANC-1(7.51±0.62),AsPC-1(5.26±0.45),Capan-2(3.69±0.38),SW1990(3.25±0.32)and BXPC-3(3.86±0.35)中hsa_circ_0006950相对表达明显高于正常胰腺导管上皮细胞HPDE6-C7(1.00±0.01)中的表达,差异有统计学意义(F=88.585,P<0.001).与对照组相比,干扰hsa_circ_0006950表达组细胞增殖能力(0.79±0.17 vs 1.83±0.42),克隆形成率(51.42%±5.84%vs 78.76%±13.65%)和迁移数目(104.64±24.73 vs 218.21±31.57)明显降低,差异均有统计学意义(t=3.976,3.190,4.905,P=0.016,0.033,0.008).miR-124-3p是hsa_circ_0006950的下游靶基因,EZH2是miR-124-3p的直接靶标.hsa_circ_0006950靶向负调控miR-124-3p,miR-124-3p靶向负调控EZH2.与对照组相比,过表达miR-124-3p组PC细胞增殖(0.21±0.16 vs 1.75±0.47),克隆形成率(47.85%±4.13%vs 81.54%±2.33%)和细胞迁移数目(118.74±24.65 vs 202.36±31.45)明显降低,差异均有统计学意义(t=5.378,14.317,3.390,均P<0.001);共转染过表达EZH2后,miR-124-3p对细胞增殖、克隆形成率及迁移能力的抑制作用被逆转.在干扰hsa_circ_0006950组细胞中同时下调miR-124-3p或过表达EZH2后,hsa_circ_0006950对细胞克隆形成及迁移的抑制作用被逆转恢复.结论 胰腺癌中hsa_circ_0006950显著高表达,抑制其表达可以抑制胰腺癌细胞的增殖及迁移;hsa_circ_0006950可能通过靶向下调miR-124-3p表达,进而上调EZH2表达来发挥作用,参与胰腺癌的发生发展.
目的:研究Sox9基因过表达对人脂肪干细胞(hADSCs)增殖、凋亡及成软骨分化的影响及机制.方法:酶消化法分离hADSCs体外培养扩增,Lenti-Sox9-EGFP、Lenti-EGFP慢病毒液分别感染hADSCs,设为过表达组和空载组,另以无菌生理盐水代替设为对照组.比较各组Sox9蛋白表达、细胞增殖、转化生长因子β1(TGF-β1)、信号转导蛋白3(Smad 3)蛋白表达、细胞凋亡情况;hADSCs成软骨诱导分化2周检测成软骨分化情况;比较各组TGF-β1、Smad 3蛋白表达情况.结果:显微镜下观察hADSCs细胞形态正常,流式细胞计数鉴定hADSCs表面抗原符合生物学特征.与空载组和对照组比较,过表达组Sox9蛋白相对表达量更高,MTT试验24 h、48 h、72 h的A值与培养24 h、48 h、72 h后TGF-β1、Smad 3蛋白相对表达量较高,凋亡率降低(P<0.001).成软骨诱导分化2周后甲苯胺蓝染色显示过表达组hADSCs胞浆及细胞核为蓝紫色,空载组和对照组为微弱淡蓝色;Ⅱ型胶原免疫组化染色过表达组为强阳性,空载组和对照组为弱阳性.与对照组和空载组比较,过表达组TGF-β1、Smad 3蛋白相对表达量更高(P<0.001).结论:Sox9基因过表达可促进hADSCs增殖及成软骨分化,抑制hADSCs凋亡,其机制可能与上调TGF-β1、Smad 3蛋白的表达有关.
目的 探讨微小RNA(miR)-205通过调控核心结合因子α-1(Cbfα-1)表达促进人脂肪干细胞(hASCs)细胞系向软骨细胞方向分化的作用及机制.方法 慢病毒转染法将Lenti-miR-205、Lenti-control慢病毒液分别转染至hASCs细胞,命名为miR-205过表达组、miR-NC组,另取未处理细胞为对照组;RT-qPCR法检测转染后miR-205基因表达量,MTT比色法检测细胞增殖;用甲苯胺蓝染色、免疫细胞染色及免疫荧光染色观察转染后第3代hASCs细胞诱导分化情况,RT-qPCR、Western blot法检测诱导分化2周后各组Cbfα-1、Smad3、TGF-β1、ColⅡmRNA和蛋白表达.结果 转染后miR-205过表达组miR-205基因相对表达量高于miR-NC组和对照组(P<0.001).miR-205过表达组转染后hASCs细胞培养3、7 d MTT试验吸光度(A)值高于对照组和miR-NC组(P<0.05).诱导分化2周后,甲苯胺蓝染色显示,miR-205过表达组细胞染色呈强阳性深蓝染色,对照组和miR-NC组为微弱浅蓝色;免疫细胞化学染色显示,miR-205过表达组细胞及胞外基质强阳性棕黄染色,对照组和miR-NC组为弱阳性淡黄染色;免疫荧光染色显示,miR-205过表达组红色荧光强度较强,对照组和miR-NC组红色荧光强度较暗淡.miR-205过表达组诱导分化后Cbfα-1 mRNA和蛋白相对表达量低于对照组和miR-NC组,Smad3、TGF-β1、ColⅡmRNA和蛋白相对表达量高于对照组和miR-NC组(P<0.05).结论 miR-205过表达可促进hASCs细胞增殖、促进细胞向软骨细胞方向分化,可能通过抑制Cbfα-1、激活TGF-β1/Smad3信号通路发挥调控作用.
目的:分析探究保守治疗方法在高海拔地区急性上消化道穿孔患者中的应用及效果.方法:在2017年4月~2021年4月中选择150例患者展开分析,根据治疗方式的差异性分为观察组(n=80,保守治疗)和对照组(n=70,外科手术治疗),并比较两组治疗效果.结果:观察组治疗总有效率显著高于对照组(P<0.05).结论:对于高原地区急性上消化道穿孔的患者而言,若其生命体征稳定,年龄<60岁,且腹痛局限、腹腔积液量少的情况下可选择为其实施保守治疗方案,较之外科手术治疗其术后不良并发症的发生率更低,减轻了患者的治疗费用,值得推广应用.
目的 总结探讨急诊ERCP在ABP(急性胆源性胰腺炎)早期治疗中的应用效果.方法 选择2014年1月至2017年9月我院收治的144例急性胆源性胰腺炎患者为研究对象,随机分为观察组和对照组各72例,其中对照组应用常规治疗,观察组应用急诊ERCP治疗,观察两组临床预后及并发症情况.结果 观察组患者疼痛缓解时间(2.1±0.5)d、住院时间(10.5±2.6)d、治疗后的血淀粉酶(60.5±1.9)U/L及谷丙转氨酶(200.5±12.8)U/L、总胆红素水平(112.5±6.2)μmol/L均明显低于对照组,且组间差异具有统计学意义(P<0.05).两组并发症主要为胰腺脓肿、腹水,两组并发症发生率无统计学差异(P>0.05).结论 在ABP患者早期治疗中应用急诊ERCP治疗,有助于改善炎症症状,提高预后.