It was found that the level of Calponin h1 (CaP h1) mRNA was significantly up-regulated by Estrogen in the myometrium of sheep towards the end pregnancy. Although the CaP h1 has been widely used as a reference gene to observe the changes of expression level of other genes, the full-length gene in sheep has not been obtained. With the oligo nucleotide primers according to human, mouse and pig CaP h1 mRNA, the full-length cDNA of CaP h1 was cloned by 5'- and 3'-RACE (Genbank accession number = AY327118). The cDNA was 1499bp in length and contained a complete open reading frame of 891 bp, encoding a protein of 297 amino acid residues. 5'-and 3'-UTR was 79 bp and 529bp, respectively. With PCR-SSP approaches,the genomic DNA of sheep CaP h1 was obtained .It showed that the gene has 7 exons and 6 introns, spanning over 8kb(Genbank accession number of introns : AY771807,AY771808, AY771809, AY771810.) Homologous comparison indicated that the cDNA sequences are highly conserved across the species. The highest homology was found in wild pig (92%), followed by human (88%), rat (81%), mouse (81%) and chicken (79%). The intron sequence and length showed a large variation among species (>50%).

目的 研究实验小鼠H - 2抗原单克隆抗体在初建时和经冷冻保存后的效价变化规律 ,为长期保存小鼠H - 2抗原单抗及规模性推广这一遗传监测方法奠定技术基础。方法 制备 6种抗小鼠H 2抗原的单克隆抗体 ,将具备一定抗体效价 （16 0倍以上 ）的细胞株保存在 - 196℃的液氮中 ,数月后将复苏后的部分细胞株培养 4 8h后 ,取其上清液用微量细胞毒试验法测定抗体的效价 ,并与其原有效价进行比较。结果 单抗初建时效价达到 16 0倍以上的细胞株占总株数的 37%～ 5 3% ,H 2K抗体复苏后效价持平的细胞株占 13% ,效价下降的为 74 % ,效价上升的是 13% ;H 2D抗体效价持平的细胞株占 5 3% ,下降的为 31% ,上升的是 16 %。复苏后的抗体效价大部分与原效价持平或略有下降 ,个别的会有所提高。结论 单克隆抗体的效价略低于同种单价特异性抗血清 ;能否使冻存后的抗体保持原有的效价是抗体能否大量生产并推广的关键 ;要长期保存和生产H 2抗原单抗 ,应加强克隆和检测工作 ,建立稳定的制备、保存和检测系统 ,才能为实验动物的遗传监测提供技术服务

在免疫遗传学中,能引起强烈的移植排斥反应的抗原系统称为主要组织相容性抗原系统.小鼠的主要组织相容性系统称为H-2复合体,是定位于小鼠第17号染色体上的一个区段,与人类HLA系统在遗传规律上十分相似[1].H-2复合体是参与免疫遗传的一个基因复合体[2],其内部的各种结构导致了众多的特异性基因产物.在近交系小鼠中不同的品系有其免疫遗传学特性,即H-2单倍不尽一致;因此,建立一系列特异性基因产物的抗体(抗血清或单克隆抗体)对于进行有效的遗传监测是非常必要的.单抗的特异性意味着它对抗原的反应是专一的,能在纷杂繁多的物质环境内识别出对应抗原物,即使该对应物的存在只有微量,仍有可能反应与识别无误[3].因此,单克隆抗体的应用被广泛地引入生命科学领域,成为寻找、识别、定型、定位、定量、分离提纯各种生物分子的高效试剂.制备小鼠H-2单克隆抗体为提高实验小鼠遗传监测水平开创了新的技术途径[4],目前国际上美、日等国家均建立了小鼠H-2复合体单抗株[5],但我国在此领域内研究甚少.为此,作者在用同类系小鼠(Congenic Mice)成功制成H-2单价特异抗血清的基础上,开展了小鼠H-2抗原单克隆抗体的制作研究.

应用生物化学同工酶电泳方法,对京、沪和昆明市三个重点地区的昆明种小鼠在八个位点上进行群体间调查,在被监测的三个群体中,基因位点的等位基因分布基本趋于一致,只有上海地区的昆明种小鼠与其它两个群体在Hbb和Pgm-1位点有明显的差异,在聚类分析中表明北京地区的昆明种小鼠与昆明地区的昆明种小鼠种接近为一类,上海地区的昆明种小鼠与NIH小鼠接近为一类,因此,我们认为上海地区被调查单位的昆明种小鼠,可能是由于长期饲养在不同的技术和条件下,在遗传特性方面发生了变化,应加强遗传监控.