Деполимеризацией высокомолекулярного гепарина азотистой кислотой получен низкомолекулярный гепарин. Методом препаративной хроматографии из него выделены узкие по молекулярной массе фракции низкомолекулярных гепаринов, что подтверждено методом эксклюзионной ВЭЖХ. Средняя молекулярная масса продуктов, по данным капиллярной вискозиметрии, уменьшается за время синтеза (4 ч) с 14,0 до 3,4 кДа. Среди полученных продуктов выделены фракции, молекулярно-массовые характеристики, соотношение сульфо- и карбоксильных групп, а также специфическая активность которых соответствует показателям для низкомолекулярного гепарина, выделенного из промышленно выпускаемого препарата Фрагмин®. Показано, что в зависимости от продолжительности обработки высокомолекулярного гепарина азотистой кислотой в кислой среде возможно получение низкомолекулярных гепаринов, аналогичных по своим характеристикам субстанциям Дальтепарин и Надропарин.

Предложен УФ-спектрофотометрический метод определения содержания бензильных фрагментов в бензиловых эфирах гепарина. Проведена валидация этого метода по показателям линейность, правильность и прецизионность по критериям повторяемости и внутрилабораторной воспроизводимости. Метод предназначен для характеристики бензиловых эфиров гепарина, являющихся промежуточными продуктами при синтезе низкомолекулярного гепарина методом гидролитической деполимеризации высокомолекулярного гепарина

Исследована стадия этерификации при получении низкомолекулярного гепарина (эноксапарина) методом гидролитической деполимеризации нефракционированного гепарина, которая заключается в обработке предварительно синтезированного гепарината бензетония бензилхлоридом. С помощью методов ВЭЖХ, 1H и 13C ЯМР определено содержание бензиловых фрагментов в синтезированных бензиловых эфирах гепарина и оценена их степень бензилирования. По этим данным рассчитано содержание карбоксильных групп в исходном гепарине, которое составило (0,13 ± 0,01) моль/г. Это позволяет предложить новый способ оценки степени бензилирования гепарина по данным методов 1H ЯМР и ВЭЖХ. Показано, что с увеличением мольного избытка бензилхлорида содержание фрагментов бензила в бензиловых эфирах гепарина возрастает.

Исследована первая стадия получения низкомолекулярного гепарина (эноксапарина) методом гидролитической деполимеризации нефракционированного гепарина, которая заключается в химическом взаимодействии исходного гепарина с хлоридом бензетония в водно-солевых (NaCl) растворах. Показано, что с повышением концентрации хлорида натрия у нефракционированного гепарина определяется большее количество кислотных эквивалентов. Вероятно, это связано с влиянием ионной силы раствора на конформацию макромолекулы гепарина, что подтверждается данными метода динамического рассеяния света. Средний размер наблюдаемых центров светорассеяния в водных растворах гепарина падает с увеличением концентрации хлорида натрия. Показано, что для ускорения очистки гепарината бензетония от исходных реагентов, а также для снижения количества промывных вод целесообразно применять промывание водой, а не растворами хлорида натрия, а также использовать ультразвуковую обработку. Состав полученных и очищенных образцов гепарината бензетония подтвержден методом 1H ЯМР.