本研究通过开展蝉花菌质小鼠经口急性毒性试验、 雌性小鼠和雄性小鼠的小鼠骨髓细胞微核试验和小鼠的精子畸形试验评价其安全性,为蝉花菌质作为饲料原料在畜牧行业的应用提供理论依据.研究结果表明,受试的所有ICR小鼠在试验观察期内均未见中毒症状和死亡情况,在试验结束后大体剖检小鼠的肾脏、肺脏、脾脏、肝脏、胃肠道、心脏等组织器官均未发现异常变化,根据本试验判定蝉花菌质对ICR小鼠经口急性毒性试验的半数致死量大于5000 mg·kg-1体重;蝉花菌质在1250～5000 mg·kg-1体重剂量范围内经口染毒后,各小鼠骨髓细胞中含微核嗜多染红细胞率和小鼠精子畸形率与阴性对照组比较均无显著性差异(P>0.05),说明小鼠骨髓细胞微核试验结果和小鼠精畸形试验结果均为阴性.以上试验表明,蝉花菌质具有很好的安全性,可作为饲料添加剂或饲料原料进一步研究开发.

为研究不同虫草菌质添加对肉鸡生长性能和免疫性能的影响,本研究选取了500只同日龄体重相似的健康淮南麻黄鸡,随机分为5组,每组4个重复,每个重复25只鸡.对照组(CK)饲喂基础饲粮,4个处理组分别在基础饲粮上添加5％广东虫草菌质(T1)、4.8％蝉花菌质+0.2％地顶孢霉发酵物(T2)、4.8％蝉花菌质+0.2％蝉花FY提取物(T3)、5％蝉花菌质(T4),进行45 d饲喂试验.结果表明:与对照组相比,添加不同虫草菌质对肉鸡生长性能影响不显著;T2、T3组显著提高了血清免疫球蛋白A(Ig A)和免疫球蛋白G(Ig G)含量,T3组显著提高了血清免疫球蛋白M(Ig M)含量;在肉质性能方面,T3组显著提高了鸡肉的嫩度和保水能力,减缓屠宰后鸡肉pH的降低速度,提高了鸡肉肌苷酸含量.由此可见,饲粮添加4.8％蝉花菌质和0.2％蝉花FY提取物能提高淮南麻黄鸡的免疫性能和肉质性能,为虫草菌质的应用提供坚实基础.

根据考古和史料证据推断,人们对虫草的认识有着5 000多年的历史,涉及文化、艺术、历史、哲学、宗教、习俗、医药及生物科学等方面.根据各阶段的特点可分为崇拜时代、本草时代、描述时代和分子时代.(1)崇拜时代(红山文化-神农本草经问世):中国考古发掘出众多玉蚕和玉琀蝉,反映在远古时期对虫草的蒙昧认识以原始的轮回崇拜为特点.至今中外仍遗留着一些古代虫草崇拜的习俗.(2)本草时代(《神农本草经》问世-1818年虫草属建立):古代苏美尔人可能使用过一种虫草入药;而中国人2 000年来一直使用白僵蚕、蝉花和冬虫夏草等入药.此时期物化观念对东西方都有较大影响,对于虫草东西方均有"动物化植物""竹根化蝉""虫草互变"等认知,反映了物化论的深刻影响.(3)描述时代(1818年-20世纪末):1818年Fries建立虫草属,揭开虫草菌科学发展300年的篇章.物化论逐渐被近代科学取代;庞大的虫草家族逐渐形成.欧洲和日本流行虫草绘画,加快了虫草知识的普及.19世纪后期兴起利用虫草菌防治害虫,并在20世纪中期形成规模较大的真菌杀虫剂产业.中国将虫草用于食品和药品的古老传统得以传承并发展,在20世纪后期形成较大产业;但欧美各国发展较慢.(4)分子时代(21世纪初以来):在现代生物科学和技术的带动和支撑下,虫草研究从上世纪末开始进入分子时代.生物药物素研究缓慢进展,而虫草的多基因系统发育、虫草侵染昆虫的分子致病机制以及以基因组学引领的组学研究则快速进展.国际和国内学术交流活跃,对于弘扬虫草文化起到有力的促进作用.

研究添加蝉花菌质的饲料对产蛋鸡的生产性能以及鸡蛋品质的影响.试验表明,喂食加入蝉花菌质饲料,试验组产蛋鸡的产蛋率、平均蛋重和死淘率显著优于对照组.对鸡蛋品质研究发现,相比对照组,喂食含有蝉花菌质饲料的蛋鸡的营养成分发生变化,但指标差异不显著,只有缬氨酸和蛋氨酸显著高于对照.结果表明,生产中应用蝉花菌质制剂可提高蛋鸡生产性能,改善鸡蛋品质,为开发特色功能蛋品生产提供了坚实的研究基础.

试验探讨蝉花基质的养分含量及饲粮添加蝉花基质对绵羊瘤胃发酵和消化率的影响.采用常规法和色谱法对蝉花基质的一般养分含量及氨基酸组成进行分析.粗精比列80:20日粮中配合精料部分以0、5％、10％、15％和20％的比例替换为蝉花基质饲料进行体外消化试验.探究日粮中添加20％的比例的蝉花基质对绵羊生产性能的影响.结果显示,蝉花基质粗蛋白含量152.30g/kg、氨基酸总量98.50 mg/g、维生素A含量266.59 mg/100 g、维生素E含量62.98 mg/100g.随着蝉花基质替换比例的增加,产气量、总挥发性脂肪酸浓度、体外干物质消化率(IVDMD)呈增加趋势.在苜蓿和青贮饲料等量饲喂条件下,蝉花基质组和对照组采食量为1.43 kg/d和1.39kg/d.试验表明,蝉花基质以5％～20％的比例添加在绵羊日粮可以提高采食量和消化率,对肉质无负面影响.

在江苏泛亚虫草健康农场内开展蝉花菌质有机肥种植小麦试验.试验结果表明,蝉花菌质有机肥作为基肥施用不影响小麦生育期,但可以显著提高小麦的千粒重、有效穗和产量;对小麦籽粒的蛋白质、总膳食纤维、VE含量和容重没有显著影响,但能显著提高淀粉含量、降低脂肪含量.

[目的]拟通过蝉花野外繁育菌株的子实体培养筛选和分子标记分析,建立蝉花野外繁育菌株鉴别体系,获得可用于生产的优质菌株.[方法]以蝉花A17-7-1菌株野外繁育获得的7个蝉花菌株进行子实体培养筛选,并用A17-7-1菌株特异的SCAR分子标记对菌株进行分析.经SCAR标记确认的繁育菌株再以ISSR分子标记分析判定繁育菌株遗传性状.[结果]经子实体培养筛选,2个菌株子实体产量高于A17-7-1;SCAR分子标记分析显示,从这2个子实体产量提高的菌株基因组NDA中扩增出A17-7-1菌株特有的DNA片段;ISSR分子标记分析表明,一株子实体产量明显提高的菌株与A17-7-1具有完全相同的条带,另一个子实体产量提高不显著的菌株有2个条带缺失.[结论]野外繁育蝉花可提高子实体产量,SCAR标记可快速鉴别菌株是否为繁育菌株,ISSR标记能够初步判断菌株遗传特性.

我国重要药用真菌蝉花的分类地位和学名在国内外长期混乱,因其有性型未被发现,长期以来误作为根据巴西标本命名的Isaria(Paecilomyces)cicadae.作者最近在井冈山发现了其有性型,研究了标本及分离物的形态特征及多位点系统发育特征,并与GenBank中相关种类的序列进行了对比,证明l.cicadae是物种复合群,确定蝉花是虫草科虫草属中的新种,使用传统药用真菌蝉花的古老名称将其命名为Cordyceps chanhua.蝉花子座淡橙色到淡桔黄色,子囊壳半埋生,475-602×222-319μm,子囊孢子246-360×1.5-1.8μm,分孢子圆筒形,6.4-13.8×2.1-3.1μm.孢梗束淡黄色至淡黄褐色,分生孢子长椭圆形或圆筒形,3.5-10.5×1.5-4.5μm.

蝉花是我国重要药用真菌,但长期以来其名称特别是学名的使用一直混乱.本文从古代医药典籍记载确认,"蝉花"是历史最久、使用最广的中名,对于其他中名具有优先权.其学名Isaria cicadae系Miquel(1838)根据巴西标本命名,但模式标本己失,原描述文字及插图均极其简单,与蝉花形态差异较大.其有性型迄今未发现,曾先后被认为是小蝉草Ophiocordyceps sobolifera和大蝉草Tolypocladium dujiaolongae(=Cordyceps cicadae Shing).本文根据文献考证澄清了国内外关于小蝉草和大蝉草的误用,分析了长期以来大量日本文献中的命名混乱对我国认知蝉花的影响,并质疑I.cicadae在中国及其他地区的分布,提出它是一复合种,因此蝉花的分类地位及学名需要进一步研究.

目的 评价复方蝉花片对2型糖尿病患者的治疗作用及安全性评价.方法 选择中国人民解放军第二四五医院血糖偏高的成年2型糖尿病患者109例,随机分为2组,对照组(n=54)采用常规治疗,治疗组(n=55)在常规治疗基础上口服复方蝉花片2片/次、2次/d,服用量2.4 g/d,连续服用2个月,评价其疗效与安全性.结果 两组治疗前空腹血糖、餐后2h血糖、尿糖比较无差异.治疗后,两组空腹血糖、尿糖均较治疗前降低,治疗组餐后2h血糖降低;治疗组空腹血糖降低率(13.50±6.71)％与对照组比较差异显著(P＜0.01)、餐后2h血糖降低率(13.85士8.74)％,与对照组比较差异显著(P＜0.01);治疗组尿糖积分下降率72.2％,对照组尿糖积分下降率10.52％,两组比较差异有显著性(P＜0.001);且两组无不良反应发生.结论 复方蝉花片对于2型糖尿病患者具有治疗作用,且比较安全,值得推广应用及深入开发.

目的 研究蝉花子实体的抗疲劳、增强运动耐力作用.方法 ICR雄性小鼠随机分为对照组、人参乙醇提取物(阳性药,2.5 g/kg)组以及蝉花子实体低、中、高剂量(0.075、0.150、0.300g/kg)组,连续ig给药15d后,测定小鼠负重游泳力竭时间,试剂盒法检测小鼠经游泳运动后肝糖原、肌糖原、全血乳酸(LD)、血清尿素氮(BUN)、超氧化歧化酶(SOD)和乳酸脱氢酶(LDH)等与疲劳相关联的生化指标变化.结果 与对照组比较,蝉花子实体低、中剂量对小鼠力竭游泳时间有显著延长作用(P＜0.05),低剂量组LD水平显著下降(P＜0.05),高剂量LDH含量显著升高(P＜0.05),低剂量组SOD含量显著升高(P＜0.05);中、高剂量组BUN含量显著降低(P＜0.05),低剂量组肝糖原水平显著升高(P＜0.05);中剂量组肌糖原水平显著升高(P＜0.05).结论 蝉花子实体对运动后的小鼠有抗疲劳作用.

分析检测蝉棒束孢菌株BAI0101在培植过程中不同时间点孢梗束的转化率和孢梗束中多糖、虫草酸、腺苷和N6-(2-羟乙基)腺苷含量的变化规律,对配伍的孢梗束复方辅助改善睡眠功能进行了初步评价.结果 表明,从培植18d起,孢梗束的转化率呈现上升趋势,在培植30d左右,有保持稳定趋势;孢梗束中的多糖、虫草酸和腺苷含量均随着培植时间的延长呈现增高趋势,均在22-24d达到最高值,其后开始呈现降低趋势,而孢梗束中的N6-(2-羟乙基)腺苷含量随着培植时间的延长呈现降低趋势,在24-26d左右达到最低值,其后呈现上升趋势,在培植至36d左右达到含量的最高值并保持稳定;对利用该菌株培植的孢梗束,经中药配伍组成的保健品小复方进行了辅助改善睡眠保健功能的初步评价,结果表明该复方有明显促进阈下剂量戊巴比妥钠诱导的小鼠睡眠作用,能明显降低巴比妥钠诱导小鼠睡眠潜伏期,且无直接睡眠作用,不影响戊巴比妥致小鼠睡眠时间,根据《保健食品检验与评价技术规范》,判定该复方具有辅助改善睡眠的保健功能.

目的 对人工培植的蝉花孢梗束进行毒理学研究,评价其口服安全性.方法 利用急性毒性试验、体外中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验和孕鼠致畸试验进行毒理学评价.结果 急性毒性试验结果表明蝉花孢梗束对雌、雄大鼠急性经口最大耐受量(MTD)均＞10 g/kg,属于无毒级;中国仓鼠肺细胞染色体畸变试验、骨髓细胞微核试验、鼠伤寒沙门氏菌回复突变试验以及3项遗传毒性试验的结果皆为阴性,未显示致突变性;蝉花孢梗束各剂量组在大鼠孕期体质量、死胎率、吸收胎率与阴性对照组比较差异无显著性(P＞0.05),各剂量组胎鼠质量、胎鼠身长、前囟宽度与阴性对照组比较差异无显著性(P＞0.05);各剂量组在胎鼠外观、内脏发育、骨骼发育检查上与阴性对照组比较差异无显著性(P＞0.05).结论 在本研究条件下,未见蝉花孢梗束有急性毒性、遗传毒性,对孕鼠无致畸作用,具有良好的安全性.

本研究以蝉花菌质为试材,采用常规分析法测定一般营养成分;氯仿-甲醇改良法提取总脂肪,硅胶柱层析法分离总脂肪中的极性、中性脂质,TLC分析鉴定其功能性脂质成分;高效液相色谱法和气相色谱法分别测定氨基酸及脂肪酸组成,结果表明:蝉花菌质干物质中的粗蛋白、总脂肪、灰分和粗纤维含量分别为15.22％、1.47％、1.33％和5.54％.钙和磷以及维生素A和维生素E含量分别为0.27％、0.13％、266.59 mg/100 g、62.98 mg/100 g.TLC分析表明脂肪成分中含有鞘磷脂(SM)、卵磷脂(PC)、脑磷脂(PE)和甘油三酯(TG)等功能性脂肪.蝉花菌质富含多不饱和脂肪酸,占脂肪酸总量的48.06％,其中亚油酸含量高达47.94％.蝉花菌质含17种氨基酸,总量为88.27mg/g,其中必需氨基酸占氨基酸总量的53.11％.综上结果,蝉花菌质富含各类营养素,可作为食品或动物饲料添加剂开发利用.

Mice were divided into one negative group (given 1％ sodium carboxymethyl cellulose) and three treatment groups at different doses,i.e.,low-dose,middle-dose and high-dose groups.Mice were fed with Chanhuabao tablets by five,ten and thirty times of the dose recommended to human beings for 4 weeks,respectively.The abilities of natural killer (NK) cells were tested.The delayed type hypersensitivity (DTH) test and splenic lymphocyte proliferation test were carried out thereafter.The results showed that compared to the negative group,the three treatment groups showed significant swelling of mice (P＜0.01).The level of serum hemolysin (P＜0.01),hemolytic plaque number (P＜0.01) as well as the phagocytosis rate and phagocytic index (P＜0.01) were significantly improved in the middle-and high-dose groups.The killing activity of NK cell was significantly increased in the high-dose group (P＜0.05).In conclusion,Chanhuabao tablet could significantly improve the immunological function of mice.