Trichoderma strains are used as biofungicides for some plant diseases. The aim of this research was to evaluate the effectiveness of Trichoderma harzianum isolates, applied alone and in combination with fungicides, to control Zymoseptoria tritici, the causal agent of Septoria tritici blotch of wheat, and their impact on wheat yield and its components. To this end, field experiments were performed in 2010 and 2011 and 10 different treatments were applied. The disease severity was assessed by visual estimation of the leaf area affected by Z. tritici at the first node, anthesis and early dough growth stages. The best results for reducing the area under the disease progress curve (AUDPC) were “coated seed only with T. harzianum” and “coated seed plus two foliar application of T. harzianum”. Regarding the increase in yield gain and the improvement of yield components, the fungicide treatment applied at seedling, and tillering in 2011 provided significant increase. Respect the treatments with the application of T. harzianum the best was only one application as coated seed of the biocontroler alone showing yield responses similar to the ones obtained with the fungicide treatments. We recommended the coated seed alone because the protective effect lasts until the early dough stage of ripening. This application produced a comparable yield to that obtained with three applications of T. harzianum at different phenological stages of wheat with as well as with more than one application of commercial fungicide. We found a strong relationship between the number of kernels per spike and the wheat yield in 2011 as a consequence of the best environmental conditions for the disease’s occurrence. Contrary, it was shown a non-significant association between thousand kernel weight (TKW) and the wheat yield.

Una alternativa al uso indiscriminado de fitosanitarios es la incorporación de microorganismos antagónicos competitivos para la protección de los cultivos de los patógenos habitantes del suelo. En este trabajo se evaluó la potencialidad del establecimiento de Trichoderma harzianum Rifai (cepa Th5cc) en el suelo bajo diferentes formulaciones, con el objeto de conocer cuál es la más efectiva en mantener la población del antagonista a niveles moderados. La población se cuantificó mediante la técnica del suelo diluido en placa utilizando un medio selectivo para Trichoderma. Los resultados muestran que tanto en el formulado líquido como en las semillas recubiertas aumenta la población de Th5cc hasta los 90 días desde que se incorporó el formulado al suelo (1,4 x 104 unidades formadoras de colonia/g de suelo). En contraste, con la aplicación de formulado sólido la población del antagonista comienza a disminuir a los 90 días. En el caso de la incorporación en la semilla, la población de T. harzianum al inicio fue menor a la del testigo, pero a los 60 y 90 días alcanzaron valores mayores a la población original del suelo (testigo). La eficiencia de la aplicación de T. harzianum como antagonista en plantas está estrechamente relacionada con su formulación, la cual tiene una clara influencia en la supervivencia en el suelo.

La ciudad de La Plata (Buenos Aires, Argentina), esta rodeada por un cinturon horticola (CHP) que produce frutas y hortalizas frescas. Alli se instalaron productores de diferentes nacionalidades que adoptaron una diversidad de hortalizas de la region, desarrollandolas como productos locales. Se considera necesario mejorar la semilla en cuanto a su sanidad y saber con certeza que micobiota esta presente en la misma, ya que una gran cantidad de microorganismos pueden ser transportados por ellas, permitiendo que los mismos ingresen en nuevas areas del cultivo y se distribuyan como foco de infeccion primaria. Con el fin de contrarrestar los efectos perjudiciales, las semillas reciben distintos tratamientos (fisicos, biologicos y quimicos), siendo el mas difundido el control quimico. Sin embargo, el uso inadecuado de estos productos puede generar impactos negativos en el ambiente y en la salud. La concientizacion ecologica globalizada exige productos mas naturales, lo que ha llevado a implementar el manejo integrado para una produccion de semillas libres de residuos toxicos [1] incorporando los biopreparados, que son sustancias y mezclas de origen vegetal, animal o mineral presentes en la naturaleza que tienen propiedades nutritivas para las plantas o repelentes y atrayentes de insectos para la prevencion y control de plagas y/o enfermedades [2]. El objetivo del presente trabajo fue la evaluacion del efecto fungistatico de un extracto acuoso de ajo (Allium sativum) al 80 %, en semillas de acelga y zanahoria provenientes del CHP. El ajo pertenece a la familia de las Liliaceas, posee efectos como antioxidante, antibacteriano, antifungico, hipocolesterolemico, antivirico y antiparasitario. Se ha comprobado su accion sobre siete especies de hongos: Penicillium sp.; Aspergillus sp.; Fusarium sp.; Alternaria sp.; Colletotrichum sp.; Pythium sp. y Rhizoctonia sp. Estas cualidades son atribuidas a que el ajo y la cebolla (Allium cepa L.) contienen compuestos azufrados como principios activos y son las especies que se destacan con un mayor espectro de accion inhibitoria en hongos patogenos [3]. En primera instancia, se realizo un relevamiento de enfermedades que afectaban a las semillas horticolas (acelga y zanahoria), incubadas en camara de cria climatizada (21°C; 75 % HR; 12 h luz/12 h de oscuridad) durante 4 /5 dias. Se aislaron los hongos comunes a ambas especies, para luego proceder a la evaluacion in vitro del efecto fungistatico del extracto casero de Allium sativum al 80%. Se realizo el tratamiento con 5 repeticiones y testigos respectivamente, midiendose el diametro de crecimiento del patogeno en cajas de Petri con APG (agar papa glucosado). Por ultimo se realizaron ensayos in vitro con semillas sumergidas en el extracto. Las semillas de zanahoria fueron sumergidas por 15 minutos, mientras que las de acelga - al comprobarse que en ese tiempo no hubo control y presumiendo que por ser un poliaquenio el tiempo de contacto con el extracto podria no ser suficiente -, se dejaron por 24 y 48 horas. Los testigos fueron sumergidos el mismo tiempo en agua destilada esteril. Se colocaron 5 semillas por caja de Petri con APG 2% y se realizaron 5 repeticiones por tratamiento. Se llevaron a estufa con temperatura controlada de 24°C durante 7 dias y se evaluo la presencia de patogenos y el poder germinativo. RESULTADOS Y DISCUSION 27 El hongo predominante relevado para ambas especies de semillas fue Alternaria sp. Tanto en acelga como en zanahoria, el extracto de ajo produjo una reduccion mayor al 50 % del diametro de la colonia con respecto al testigo. Se observo que sumergiendo las semillas de acelga por 24 hs hubo control del patogeno sin afectar la germinacion, mientras que con 48 hs de inmersion hubo inhibicion. En las semillas de zanahoria se verifico el control de patogenos con 15 minutos, sin afectar la germinacion. En la figura 1 se observa que hubo un 100 % de control de patogenos con respecto a los testigos, no afectando la germinacion e inclusive aumentando en un 20%. CONCLUSIONES Podemos decir que el extracto de ajo casero al 80 % controla a Alternaria sp, patogeno de semillas, en acelga y zanahoria. Para el caso de semillas del tipo poliaquenio como la acelga, se sugiere sumergirlas en el extracto por 24 horas para lograr el control del patogeno. Estos resultados son promisorios y se deberia seguir probando con otros extractos, teniendo en cuenta que puede ser una alternativa de control amigable con el agroecosistema para tratamientos de semillas horticolas.

Fil: Stocco, Marina Celeste. Universidad Nacional de La Plata. Facultad de Ciencias Agrarias y Forestales. Departamento de Ciencias Biologicas. Centro de Investigaciones de Fitopatologia. Provincia de Buenos Aires. Gobernacion. Comision de Investigaciones Cientificas. Centro de Investigaciones de Fitopatologia; Argentina. Consejo Nacional de Investigaciones Cientificas y Tecnicas. Centro Cientifico Tecnologico Conicet - La Plata; Argentina

Alternaria spp. are among the major fungal contaminants of wheat grain under postharvest and storage conditions, where A. arborescens was recently detected as a new member of this complex in Argentina causing black point. The aim of this study was to assess the potential of some biorational agents to control A. arborescens and their plant growth promoting of wheat. Seed treatments with spore suspensions of Trichoderma harzianum and Eppicoccum nigrum, extracts from Lippia alba and garlic, sodium bicarbonate, salicylic acid (SA), potassium chloride and dibasic sodium phosphate (SP) were applied to grains of wheat cultivar BIOINTA 1004 before their inoculation with the pathogen. After 7 days, seed germination and infection, necrotic symptoms on emerged seedlings and fresh weight were evaluated. Remarkable results were obtained with L. alba, SA and SP treatments that reduced symptoms markedly compared with the control. Interestingly, necrosis of radicles was significantly reduced by the application of all treatments tested. Moreover, fresh weight of seedlings was significantly increased with the application of the two antagonists, diluted garlic juice and the three tested salts in comparison with controls. Therefore, a positive role as growth promoters can be elucidated. It is concluded that compounds here tested have potential as ecofriendly alternatives to control seed-borne Alternaria fungi of wheat.

Species of the genus Trichoderma are economically important as biocontrol agents, serving as a potential alternative to chemical control. The applicability of Trichoderma isolates to different ecozones will depend on the behavior of the strains selected from each zone. The present study was undertaken to isolate biocontrol populations of Trichoderma spp. from the Argentine wheat regions and to select and characterize the best strains of Trichoderma harzianum by means of molecular techniques. A total of 84 out of the 240 strains of Trichoderma were able to reduce the disease severity of the leaf blotch of wheat. Thirty-seven strains were selected for the reduction equal to or greater than 50% of the severity, compared with the control. The percentage values of reduction of the pycnidial coverage ranged between 45 and 80%. The same last strains were confirmed as T. harzianum by polymerase chain reaction amplification of internal transcribed spacers, followed by sequencing. Inter-simple sequence repeat was used to examine the genetic variability among isolates. This resulted in a total of 132 bands. Further numerical analysis revealed 19 haplotypes, grouped in three clusters (I, II, III). Shared strains, with different geographical origins and isolated in different years, were observed within each cluster. The origin of the isolates and the genetic group were partially related. All isolates from Paraná were in cluster I, all isolates from Lobería were in cluster II, and all isolates from Pergamino and Santa Fe were in cluster III. Our results suggest that the 37 native strains of T. harzianum are important in biocontrol programs and could be advantageous for the preparation of biopesticides adapted to the agroecological conditions of wheat culture.

El Partido de La Plata (Buenos Aires, Argentina), presenta un cinturon verde horticola que rodea a la capital de la Provincia de Buenos Aires, para proveerla de frutas y hortalizas frescas, siendo el tomate platense (Solanum lycopersicum L.) un producto tipico de nuestra region. Las semillas deben ser de alta calidad y sanidad. El uso de productos quimicos sinteticos puede producir, como efecto secundario, problemas de desequilibrio ambiental, de salud humana y el surgimiento de poblaciones de plagas mas agresivas y resistentes. Por ello, toma gran importancia la incorporacion de nuevas alternativas de control con productos sin consecuencias nocivas para el hombre y el ambiente. El objetivo de este trabajo fue evaluar el efecto de derivados botanicos a lo largo del tiempo sobre la germinacion en semillas de tomate platense. De ensayos previos, se seleccionaron extractos acuosos y alcoholicos de ajo y oregano, con buen comportamiento frente a patogenos. Las semillas (proveniente de productores de la zona) fueron sumergidas durante 30 min en los extractos elegidos y luego oreadas, realizandose: a) ensayo de poder germinativo (%) en papel de filtro cada dos meses, con diez semillas por caja de Petri, cinco repeticiones por cada tratamiento y sus respectivos testigos; b) emergencia (%) de plantulas en bandejas con tierra, a los ocho meses de realizado el tratamiento inicial. La evaluacion en a) fue a los diez dias y en b) a los 21 dias. Se realizo un analisis estadistico mediante ANOVA. En los ensayos de poder germinativo el promedio general (%) fue: testigo 82,5, ajo acuoso 81,75, ajo alcoholico 85,75, oregano acuoso 80,5 y oregano alcoholico 80,0. En bandejas, el promedio de emergencia (%) fue: testigo 75, ajo acuoso 70,8, ajo alcoholico 91,6, oregano acuoso 75 y oregano alcoholico 75,0. Los resultados no mostraron diferencias significativas para ninguno de los tratamientos, por lo que se infiere que las semillas tratadas con ambas preparaciones de los derivados botanicos, no pierden viabilidad en el tiempo.

Aislamientos nativos de Trichoderma harzianum inducen resistencia a Zymoseptoria tritici en plantas de trigo. La Septoriosis del trigo es endémica en las regiones productoras de Argentina, impactando en su rendimiento. Una alternativa de manejo, es el uso de agentes de biocontrol. Se propuso: determinar la efectividad de los aislamientos de Trichoderma obtenidos a partir de suelos de diferentes localidades de la región triguera argentina, sobre el control de la enfermedad y caracterizar la actividad de la serín proteasa (con capacidad antifúngica) del fluido intercelular de trigo generada por los mejores aislamientos. Para determinar la capacidad biocontroladora de los 90 aislamientos de Trichoderma, se sembraron semillas recubiertas con cada uno de los antagonistas y posteriormente las plántulas se inocularon con Zymoseptoria tritici. Se evaluó la capacidad de cada aislamiento del biocontrolador para restringir el progreso de la septoriosis 21 días después de la inoculación. A las plantas tratadas con las 10 mejores cepas de T. harzianum, se les midió el incremento de la actividad proteolítica. Cuatro de los aislamientos (2 y 8, de Los Hornos y 129 y 141 de Manfredi) disminuyeron el porcentaje de cobertura picnidial y se destacaron por el aumento de la actividad proteolítica en un cultivar susceptible. Éste comportamiento se asocia a un mecanismo bioquímico de defensa con un efecto sistémico temprano.

Septoria tritici blotch is endemic in the wheat growing cultivated areas of Argentina, which impacts in the crop yield. One management strategy is to use biocontrol agents. The objective of this work was to determine the effectiveness of Trichoderma spp. isolated from soils of different growing regions, as antagonist and characterize the T. harzianum effect throughout the proteolytic activity of the serine protease in the wheat plant. To determine the antagonistic capacities of Trichoderma spp. against Zimoseptoria tritici, wheat plants were grown from seeds coated with each of the ninety isolated Trichoderma. Antagonism was assessed 21 days after inoculation by the capacity of each Trichoderma spp. isolate to restrict the progress of the disease. To measure the increasing proteolytic activity, ten isolated T. harzianum characterized by their inhibitory effect over the pathogen, were chosen. Four isolates of the antagonist (strain 2 and 8, from Los Hornos and 129 and 141 from Manfredi localities) simultaneously decreased the pycnidial coverage percentage with a noted increasing of the serine-protease activity in the susceptible wheat cultivar. This behavior is associated to a biochemical mechanism of defense with an early systemic effect.

En los ultimos anos, el uso de antagonistas llego a ser una de las tecnicas mas promisorias para manejar la septoriosis del trigo. El objetivo del trabajo fue evaluar el poder biocontrolador de dos cepas de Trichoderma sp (Th5cc y Th118) , sobre la expresion de la mancha de la hoja del trigo inducido con el recubrimiento de las semillas y una aplicacion aerea en macollaje. El ensayo se realizo en la Estacion Experimental J. Hirschhorn durante julio-diciembre de dos anos. La disposicion experimental fue en bloques al azar con seis tratamientos y cuatro repeticiones. Se evaluo el efecto de dos cepas de Trichoderma sp , cada una aplicada con la tecnica de semillas recubiertas y como un rocio de suspension de esporas en macollaje. Uno de los tratamientos consistio en la aplicacion de Azoxystrobina-Ciproconazole (en plantula y en macollaje) como testigo positivo y un testigo negativo, inoculado con Septoria tritici . A los 21 dias de la inoculacion con el patogeno para cada estadio fenologico, se evaluaron parametros de severidad de la enfermedad (porcentaje de necrosis en hoja) y de cobertura picnidial) y se evaluo el rendimiento del cultivo. Los resultados demostraron que en estado de plantula, tanto el porcentaje de necrosis como el de cobertura picnidial, se redujeron significativamente en las plantas provenientes de semillas recubiertas por ambas cepas, siendo la cepa Th118 la de mejor comportamiento. La proteccion se mantuvo hasta el estado de macollaje. En cuanto al rendimiento, si bien no hubo diferencias significativas entre tratamientos, las plantas provenientes de semillas recubiertas con las cepas Th5cc y Th118, mostraron un incremento en el rendimiento de 432,28 Kg/m 2 y 221,80 Kg/m 2 respectivamente. Estos resultados resultan promisorios para considerar a Trichoderma sp. como un agente biologico para controlar la septoriosis del trigo y, de esta forma, ser introducida como una tecnica dentro de un manejo integrado de la enfermedad. Palabras claves: biocontrol, antagonistas, manejo de enfermedades

Eje tematico 1: Problematicas y alternativas de mejora de la ensenanza a - La articulacion entre la escuela secundaria y la universidad

Botrytis cinerea (grey mould) is one of the most common diseases of glasshouse crops and is a major cause of plant death in long-season tomato production. A disease management field trial was conducted in a commercial tomato production greenhouse for comparison of seven fungal antagonists which had previously exhibited potential as biological control agents with respect to Botrytis cinerea incidence and severity. Isolates of Trichoderma harzianum, Candida pelliculosa, Rhodotorula rubra, and Fusarium semitectum were recovered from leaves, fruits and flowers of different solanaceous plants. The fungal antagonists were tested for their control of leaf grey mould on tomato under greenhouse conditions during 2008 and 2009. In both years, foliar spray with strains of Trichoderma harzianum and Fusarium semitectum suppressed the foliar infection of B. cinerea. The suspensions of T. harzianum 118 and 252 and F. semitectum 25 significantly reduced disease incidence (65-95%) and severity (50-77%) in inoculated plants compared to untreated controls (P <= 0.05). Our results suggest that formulations of saprophytic fungi selected from the naturally occurring mycoflora could be an effective tool in the biological control of tomato grey mould.