目的:通过生物信息学方法分析子宫内膜癌(UCEC)中与肿瘤微环境(TME)相关的核心基因.方法:从UCSC Xena数据库下载TCGA 数据库中的UCEC 基因表达和临床数据.通过R 软件中的ESTI-MATE包计算样本的免疫细胞与基质细胞综合评分(ESTIMATE Score),将样本分为ESTIMATE Score高、低两组,分析组间差异基因(DEGs),对DEGs进行富集分析.再对DEGs进行加权基因共表达网络分析(WGC-NA),得到核心基因模块.分析核心模块基因在肿瘤和正常组织中的表达情况,结合DEGs在UCEC及子宫内膜组织中的表达水平及差异程度选取研究的目的基因.通过String数据库构建目的基因的蛋白互作网络,分析目的基因的表达与UCEC的病理特征、生存预后、TME之间的相关性.对目的基因进行GSEA富集分析,分析与目的基因表达相关的生物学通路.结果:ESTIMATE Score高、低组间共有 1068 个DEGs,GO/KEGG富集分析结果显示DEGs主要富集在细胞免疫反应、细胞因子及受体结合等相关生物学通路上.对DEGs进行WGCNA聚类分析得到与UCEC的病理特征、生存预后显著相关的由 77 个DEGs组成的基因模块.模块基因中的CLDN9 在UCEC与正常内膜组织中存在显著表达差异,且随着UCEC的病理特征的恶化,CLDN9 的表达呈上升趋势,同时CLDN9 的表达与患者的生存呈负相关.String数据库预测了10 个可能与CLDN9 存在交互作用的蛋白分子.GSEA富集分析结果显示,CLDN9 的表达与CD8+T细胞免疫、KRAS基因调节的信号通路、异生代谢、脂肪酸代谢等通路密切相关.在UCEC的TME中,CLDN9 的表达与CD8+T细胞等免疫细胞的浸润水平存在着负相关.结论:本研究分析鉴定了与UCEC病理特征、生存预后、TME相关的DEGs,并从中进一步分析鉴定出了与UCEC的病理分期、免疫浸润、患者生存率密切相关的CLDN9,为UCEC的诊断治疗提供了新思路.

目的 观察子宫腺肌症患者血清中沉默调节蛋白6(Sirt6)、氧化应激指标(丙二醛、超氧化物歧化酶)的水平,并分析其相关性.方法 收集2021年4—10月同济大学附属杨浦医院收治的子宫腺肌症患者20例作为腺肌症组,另选择同期体检健康妇女20名作为正常组.酶联免疫吸附法检测血清Sirt6水平;试剂盒检测丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性.采用Pearson相关分析法评估子宫腺肌症患者血清中Sirt6水平与丙二醛含量和超氧化物歧化酶活性之间的关系.结果 正常组血清中Sirt6水平明显高于腺肌症组[(7.03±4.59)ng·mL-1比(2.65±1.52)ng·mL-1,P<0.001],丙二醛含量明显低于腺肌症组[(2.75±2.11)μmol·L-1比(5.45±2.48)μmol·L-1,P<0.001],而超氧化物歧化酶活性高于腺肌症组[(0.75±0.20)U比(0.52±0.24)U,P<0.01];子宫腺肌症患者血清中Sirt6水平与超氧化物歧化酶活性呈正相关(r=0.33,P<0.05),而与丙二醛含量呈负相关(r=-0.56,P<0.05).结论 子宫腺肌症患者血清中Sirt6和氧化应激水平均升高,且Sirt6水平与氧化应激水平相关,提示Sirt6可能参与子宫腺肌症氧化损伤的调控机制.

目的·探讨沉默信息调节因子1(silent information regulator 1,SIRT1)在H2O2诱导的人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤中的作用及可能机制.方法·分别用0、100、250、500、1000μmol/L H2O2处理人卵巢颗粒细胞SVOG 4、8、12、24 h,CCK-8法检测细胞活力,选择合适的H2O2浓度和处理时间用于建立颗粒细胞体外氧化应激损伤模型.荧光显微镜观察H2O2处理后细胞核形态变化,试剂盒检测细胞丙二醛(malondialdehyde,MDA)含量和超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)活性;实时定量PCR、Western blotting分析分别检测SIRT1、衔接蛋白P66SHC(the 66 kDa Src homology 2 domain containing isoform)及B淋巴细胞瘤-2因子(B-cell lymphoma-2,BCL-2)mRNA和蛋白的表达水平;脂质体转染SIRT1过表达质粒后,SVOG细胞再经H2O2处理,同样观察上述指标的变化.结果 ·250μmol/L H2O2处理SVOG细胞12 h,可诱发细胞活力明显下降(P=0.017),细胞核固缩,MDA含量增加(P=0.001),SOD活性下降(P=0.006);伴随SIRT1、BCL-2 mRNA和蛋白表达降低,P66SHC表达升高.SIRT1过表达后再经H2O2处理,与H2O2处理组相比,SVOG细胞核恢复正常形态,MDA含量下调(P=0.038),SOD活性回升(P=0.021),P66SHC表达降低(P=0.002),BCL-2表达升高(P=0.013).结论·SIRT1可能通过下调P66SHC和上调BCL-2的表达发挥对抗人卵巢颗粒细胞氧化应激损伤的作用.