随着控制性超促排卵的应用,卵巢过度刺激综合征(ovarian hyperstimulation syndrome, OHSS)也逐渐成为广受辅助生殖领域重视的医源性并发症。Golan 等[1]根据临床症状和实验室指标将OHSS 分为三度五级。最新的 OHSS 分类方取消了轻度 OHSS,并将重度过激 OHSS 根据临床症状和实验室指标进一步细分为了 A、B、C 三级[2]。重度 OHSS 的发病率在人群中可达到0.5%~5%不等[2]。据世界卫生组织统计,OHSS 的死亡率在1/45000~1/50000。OHSS 特别是重度 OHSS会对接受辅助生殖技术(assisted reproductive technology,ART)治疗的患者产生严重的生命威胁,并造成重大的经济及精神负担。
目的 探讨转录因子C/EBP-β调节人子宫内膜基质细胞蜕膜化的作用机制.方法 采用8-Br-cAMP和MPA方法对人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化实施处理分析,并通过瞬时转染方法调节转录因子C/EBP-β表达,然后分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞,利用流式细胞仪检测细胞蜕膜化不同时间细胞分期的改变情况以及干扰前后细胞周期的变化,并采用Western blot和荧光定量实时PCR法(RT-PCR)分别在mRNA水平和蛋白质水平下检测细胞周期蛋白p57在转染siRNA组和对照组中的表达情况.结果 子宫内膜基质细胞在体外蜕膜化中S期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长而减少,而G0/G1期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长呈现明显的上升趋势,G2/M期细胞的比例随着细胞蜕膜化时间的增长而显著下降,差异均有统计学意义(P<0.05);而转染C/EBP-β siRNA后再蜕膜化48 h后的S期细胞比例变化范围为4.28% ~6.88%,差异有统计学意义(P<0.05);G0/G1期细胞比例范围为86.07% ~ 87.34%,G2/M期细胞比例范围为7.04%~ 8.38%,均呈逐渐下降趋势,但差异无统计学意义(P>0.05);且转染C/EBP-β siRNA以后,对人子宫内膜基质细胞中细胞周期蛋白p57的表达进行检测分析,发现p57的表达有明显的下降趋势,差异有统计学意义(P<0.05).结论 转录因子C/EBP-β在人子宫内膜基质细胞蜕膜化过程中通过调节细胞周期蛋白p57使细胞脱离其周期而分化为一种新的蜕膜细胞,在蜕膜化过程中发挥重要作用.
目的:探讨转录因子C/EBP-β在人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化过程中的表达变化及其作用.方法:采用8-Br-cAMP和MPA对人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化处理,并通过瞬时转染的方法下调C/EBP-β的表达,分别收集蜕膜化处理不同时间及干扰前后的细胞及其培养上清液,采用Western blot和荧光适时定量RT-PCR分别在蛋白质水平和mRNA水平检测转录因子C/EBP-β在蜕膜化过程中的表达变化,采用化学发光法检测蜕膜化不同时间点培养液中泌乳素(PRL)的浓度及干扰前后PRL表达水平的变化.结果:免疫印迹结果显示人子宫内膜基质细胞在体外蜕膜化过程中C/EBP-β蛋白的表达随蜕膜化时间的延长逐渐升高(0.068、0.140、0.316、0.595),与对照组相比,差异有统计学意义(P<0.05):荧光适时定量RT-PCR也证实C/EBP-β mRNA的表达随蜕膜化时间的延长明显增加(0.020、0.054、0.094、0.486),与对照组相比差异有统计学意义(P<0.05).化学发光法检测到在蜕膜化过程中细胞分泌的PRL水平随蜕膜化时间延长逐渐升高,差异有统计学意义(P<0.05),而转染C/EBP-β siRNA后细胞分泌的PRL浓度则明显降低,差异有统计学意义(P<0.05).结论:转录因子C/EBP-β在人子宫内膜基质细胞体外蜕膜化进程中上升性表达,在蜕膜化过程中可能发挥着重要的促进作用.