为研究血根碱对中华鳖(Trionyx sinensis)肠道菌群多样性及丰度的影响,选取480只初始体重为(31.75±7.20)g的中华鳖,设置添加0的对照组(RS1)和添加50 (RS2)、100 (RS3)和150 mg/kg(RS4)的3个实验组.实验结束后,提取中华鳖中肠组织的总DNA,进行16S rRNA V3-4区基因组测序.结果 显示,实验组的总操作分类单元(Operational taxonomic units,OTUs)数量显著高于对照组,肠道菌群复杂度及丰富度较对照组有明显增加.肠道菌群结构组成分析发现,RS1与RS2结构较为接近,而RS1与RS3、RS4较远.在门分类水平上,变形菌门(Proteobacteria)和衣原体门(Chlamydiae)是优势菌群;在属分类水平上,螺杆菌属(Helicobacter)占绝对优势.通过比较发现,实验组中螺杆菌属丰度较对照组显著下降,而不动杆菌属(Acinetobacter)、乳杆菌属(Lactobacillus)和双歧杆菌属(Bifidobacterium)丰度均有明显上升.研究表明,在饲料中添加适量的血根碱(100~150 mg/kg)能有效提高中华鳖肠道菌群多样性及丰富度,并能改善肠道菌群结构.
为了探究中华鳖(Pelodiscus sinensis)的主要组织相容性复合体(major histocompatibilitycomplex,MHC)的结构和功能,本研究利用RACE技术成功克隆获得中华鳖MHCⅡα基因的cDNA全长序列,其长度为1296 bp,开放阅读框(ORF)为807 bp,共编码268个氨基酸,分为信号肽序列、Ⅱ类组织相容性抗原α结构域、IGc1结构域及跨膜结构域4个功能结构域.通过NJ法构建的系统进化树分析显示,中华鳖与西部锦龟(Chrysemys picta bellii)亲缘较近,而与哺乳类、鸟类及鱼类亲缘关系较远.荧光定量PCR结果显示,MHCⅡαmRNA在中华鳖8个组织中均有表达,在脾、心、肝及肠组织中表达水平较高,在肌肉组织中表达量最低.感染嗜水气单胞菌(Aeromonas hydrophila)12 h后,中华鳖MHCⅡαmRNA在肝和肠组织中的表达显著上调;感染1 d时,在脾组织中的表达显著上调;感染1 d及5 d时,在肾组织中的表达显著上调.研究表明,中华鳖MHCⅡα基因参与了中华鳖免疫反应.