目的 利用慢病毒介导的CRISPR/Cas9基因编辑技术,敲除人T淋巴细胞中编码Munc134蛋白的UNC13D基因;并探讨突变型UNC13D基因(c.1232 G＞A,p.R411Q)对人T淋巴细胞Munc134蛋白和细胞毒性T淋巴细胞(CTL)脱颗粒功能的影响.方法 设计靶向敲除UNC13D基因的sgRNA序列,构建CRISPR/Cas9 UNC13D-sgRNA共表达质粒,筛选出切割效率较高的sgRNA通过第二代慢病毒包装系统包装慢病毒并感染人T淋巴细胞,再将已包装好的野生型以及突变型UNC13D慢病毒感染knockout-UNC13D基因的人T淋巴细胞,以此分为野生型与突变型两组,应用流式细胞术检测两组间的Munc13-4蛋白表达、CTL的脱颗粒功能.结果 成功构建出CRISPR/Cas9 UNC13D-sgRNA共表达质粒,CRISPR/Cas9系统成功下调人T淋巴细胞Munc13-4蛋白表达水平;突变型UNC13D基因(c.1232 G＞A,p.R411Q)编码的蛋白能够使人CTL脱颗粒功能下降.结论 CRISPR/Cas9基因编辑系统成功敲除人T淋巴细胞UNC13D基因,突变型UNC13D基因(c.1232 G＞A,p.R411Q)可能为家族性噬血细胞综合征(FHL)的致病性突变位点.
目的 分析胸腹腔镜联合食管癌根治术全身麻醉后患者发生苏醒延迟的影响因素.方法 选取行胸腹腔镜联合食管癌根治术患者作为研究对象,回顾性分析2019年7月至2021年7月四川大学华西医院收治的298例行胸腹腔镜联合食管癌根治术患者的临床资料,根据麻醉苏醒期是否发生苏醒延迟将患者分为苏醒延迟组(33例)和非苏醒延迟组(265例),比较两组患者一般资料和围术期资料的差异,采用多因素Logistic回归方程分析其发生苏醒延迟的影响因素.结果 食管癌根治术患者苏醒延迟发生率为12.5％,单因素分析结果显示:苏醒延迟组和非苏醒延迟组比较,两组患者年龄≥65岁、术前合并呼吸功能障碍、术中低体温(T＜36 ℃)、麻醉时长≥6 h、术中输液量≥2 000 mL、术中舒芬太尼≥50 μg差异有统计学意义(P＜0.05).苏醒延迟组和非苏醒延迟组比较,两组患者性别、ASA分级Ⅲ级、术前放化疗、合并高血压、合并糖尿病、术中丙泊酚用量、术后血液二氧化碳浓度、术中麻醉维持方式、术中尿量、术中出血量、术中瑞芬太尼用量差异无统计学意义(P＞0.05).多因素分析结果示:苏醒延迟的独立危险因素有年龄≥65岁、术前合并呼吸功能障碍、术中低体温(T＜36 ℃)、术中输液量≥2 000 mL及麻醉时长≥6 h(P＜0.05).结论 麻醉时长≥6 h、术中输液量≥2 000 mL、年龄≥65岁、术前合并呼吸功能障碍、术中低体温(T＜36℃)会增加全麻下胸腹腔镜联合食管癌根治术患者苏醒延迟发生的风险,医护人员应在围术期准确评估此类患者情况,及时针对性处理,减少或避免苏醒延迟的发生.
目的 以具有光热性质的金属纳米粒子为核,共价有机框架为壳,载入抗肿瘤药物盐酸阿霉素(DOX),构建具有复合结构的纳米载药平台,探究光热联合化学疗法抗肿瘤效果.方法 采用氧化还原法合成Pd-Cu纳米粒,一锅法合成Pd-Cu@COF-300@DOX@ZIF-8-FA复合物.对合成的纳米载药平台进行表征,确定其结构.选择一系列浓度梯度对所合成的纳米颗粒进行光热性能探究.进行模拟肿瘤微环境的药物释放实验.将其作用于肿瘤细胞,进行体外细胞活性评价.结果 在近红外光辐照且pH为5.0的条件下,纳米载药平台中DOX的释放量达到(92.94±2.14)％,明显高于无近红外光辐照且pH为7.4时的释放量(35.34±3.12)％;当作用于不同细胞时,对叶酸受体高表达的MCF-7的细胞毒性更高,当纳米颗粒的浓度达到125 μg/mL,且加入近红外光辐照后,其细胞存活率仅为(22.05±0.4)％.结论 成功构建纳米载药平台,通过光热实验与药物释放实验以及细胞实验结果发现该纳米载药平台具有良好的抗肿瘤性能,达到了对肿瘤细胞的化疗—光热联合治疗的目的.
目的 探讨五味子甲素(SchA)能否通过烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖的去乙酰化酶(SIRT1)调控NF-κB在脑出血(ICH)后减轻星形胶质细胞焦亡.方法 体内实验:通过胶原酶Ⅶ纹状体注射构建小鼠脑出血模型.将小鼠随机分为5组:① Sham+DMSO 组;②ICH+DMSO 组;③ICH+SchA(10 mg/kg)组;④ICH+SchA(20 mg/kg)组;⑤ICH+SchA(40 mg/kg)组.蛋白免疫印迹(WB)及免疫荧光染色验证脑出血后是否发生焦亡.利用小鼠转棒疲劳实验评估各组小鼠神经运动功能.SchA治疗脑出血后蛋白免疫印迹(WB)评估SIRT1、乙酰化NF-κB蛋白P65亚基(Ac P65)、NF-κB蛋白P65亚基(P65)、焦亡相关蛋白的表达情况.体外实验:提取小鼠原代的星形胶质细胞,采用OGD/H建立离体脑出血模型;将实验分为:①二甲基亚砜(DMSO)组;②糖氧剥脱/氯高铁血红素(OGD/H)+DMSO组;③OGD/H+SchA组;④OGD/H+SchA+塞利西斯塔特(EX527)组.SchA治疗及SIRT1特异性抑制剂EX527处理OGD/H模型评估SIRT1、切割GSDMD后的N残端(GSDMD-N)蛋白情况.结果 动物实验中证实ICH后星形胶质细胞发生焦亡.WB检测发现脑出血后1、3 d SIRT1明显减低(P＜0.05),Ac P65与P65相对表达量及比值增加(P＜0.05),焦亡蛋白相对表达量增加(P＜0.05).小鼠转棒疲劳实验表明五味子甲素明显改善ICH后小鼠神经运动功能(P＜0.05).五味子甲素治疗可增加SIRT1蛋白相对表达量,减少Ac P65、P65、GSDMD-N、C-Cas-1、GSDMD-C蛋白相对表达量(P＜0.05).离体实验中,免疫荧光及WB证实OGD/H中SIRT1蛋白表达水平降低,五味子甲素上调SIRT1蛋白相对表达量(P＜0.05),上调的SIRT1蛋白表达被EX527部分逆转(P＜0.05).WB证实OGD/H后GSDMD-N蛋白表达增加(P＜0.05),五味子甲素下调GSDMD-N蛋白相对表达量,EX527部分逆转GSDMD-N蛋白的表达水平P＜0.05).结论 脑出血后五味子甲素促进SIRT1表达进而抑制NF-κB表达从而抑制星形胶质细胞焦亡.
目的 探讨鹑鸡肠球菌化脓性脑膜炎的临床特点、治疗经验,以提高临床医生及药师对该病的治疗水平.方法 回顾性分析我院1例鹑鸡肠球菌化脓性脑膜炎患者的临床治疗资料,并通过"鹑鸡肠球菌化脓性脑膜炎"、"enterococcus galli-narum meningitis"关键词在中国知网数据库、PubMed数据库检索相关报道作文献复习.结果 共检索到8篇文献,鹑鸡肠球菌化脓性脑膜炎的易感人群主要是接受侵入性外科手术患者及免疫功能受损患者,抗感染治疗药物多选择利奈唑胺,使用疗程3周以上效果更佳.结论 鹑鸡肠球菌是机会致病菌,引起化脓性脑膜炎的报道很少见,抗菌药物首选利奈唑胺,必要时联合氨基青霉素(如氨苄西林或阿莫西林),疗程不宜过短,治疗期间避免留置脑脊液引流管.
目的 探讨甲状腺恶性肿瘤术后甲状旁腺功能减退症(HP)低钙血症尤其是难治性低钙血症的补钙方法.方法 对1例甲状腺恶性肿瘤术后HP难治性低钙血症患者的诊治经过进行回顾性分析并对相关文献进行复习.结果 经过补充钙、活性维生素D以及普通维生素D后,对患者的血钙、血磷进行动态监测,血钙及血磷逐渐趋于稳定并维持在目标值范围之内,口周、四肢麻木及肌肉抽搐症状缓解.结论 临床上对于术后HP引起的难治性低钙血症,在补充大剂量的钙剂以及活性维生素D后仍然不能纠正低血钙的患者,加用普通维生素D治疗可能会取得较为满意的疗效.
真核细胞和细菌使用相同的底物和酶,但通过不同的反转硫酰化和转硫酰化途径产生硫化氢(H2S).细菌产生的H2S不仅支持其自身存活,还向宿主传递微生物群稳态的信息.细菌性疾病对人类健康产生诸多负面影响,如加剧肥胖、糖尿病、炎症性肠病和哮喘等疾病的发展.这些病理变化与硫化氢的代谢和功能异常密切相关.宿主产生的H2S因具体情况的不同而发挥保护细菌或杀灭细菌的作用.宿主与细菌通过各自产生的H2S发挥着相互作用,这种相互作用对于与硫化氢相关的结核病病因学尤其具有启示意义.结核病由结核分枝杆菌(MTB)引起,H2S具有促进MTB存活和生长的作用.故而,通过抑制宿主和MTB产生H2S从而达到治疗结核病的目的,将是结核病防治研究的一种新策略.
Objective To detect serum microvesicles(MVs)concentrations and expression profiles of microvesi-cle microRNAs(miRNAs)in patients with polycystic ovary syndrome(PCOS)and control groups,and analyze their potential role in the pathogenesis of PCOS.Methods Fifty serum samples from PCOS patients and 50 age-matched serum samples from women seeking fertility treatment as controls were collected.MVs were isolated through differential centrifugation and characterized by transmission electron microscopy(TEM),Western blot,and nanoparticle tracking analysis(NTA).The differentially expressed miRNAs were screened by high-through-put sequencing methods,and the targets of these miRNAs were predicted.GO/KEGG pathway enrichment analysis were performed.Female ICR mice were injected with serum MVs suspension from PCOS patients to ob-serve the estrus cycle and ovarian structure.Immunohistochemical methods were used to detect the expression and localization of NF-κB and WNT5A proteins related to PCOS inflammation in the ovary.Results We found that serum MVs levels tended to be higher in the PCOS group and were dominated by small-diameter vesicles.High-throughput sequencing identified 19 differentially expressed miRNAs,of which 8 were up-regulated and 11 were down-regulated(P＜0.05).Five differentially expressed miRNAs were identified by qRT-PCR,mong which three miRNAs were identical with the sequencing results.Enrichment analysis revealed that possible path-ways associated with PCOS include AGE-RAGE signaling pathway,MAPK signaling pathway,and TGF-β signa-ling pathways.Injection of PCOS serum MVs caused estrous cycle disturbance in female ICR mice,and inflam-mation related protein NF-κB was positively expressed in the nucleus.Conclusion Small diameter MVs were more abundant in the serum of PCOS patients,and the differentially expressed miRNAs may be involved in multi-ple PCOS-related pathways.PCOS serum MVs can induce a mild PCOS-like phenotype in female mice.
目的 基于网络药理学和分子对接结合体内实验方法探究黄花白及抗胃溃疡的作用机制.方法 通过文献及TC-MSP、TCMIP数据库筛选出黄花白及的活性成分及靶点,在GeneCard数据库中获取GU靶点,取药物和疾病共同靶点构建蛋白互作网络(PPI),得到核心靶点后进行GO分析和KEGG富集分析,并采用分子对接对网络药理学预测结果进行验证.根据预测的结果采用苏木素-伊红(HE)染色法和酶联免疫吸附测定法(ELISA)验证黄花白及对乙酸诱导GU大鼠模型的影响.结果 从文献中筛选出8种黄花白及活性成分,删除重复靶点后得到129个潜在作用靶点.从GeneCard数据库中获取GU靶点,取药物靶点与GU靶点交集得到共同靶点70个,构建蛋白互作网络(PPI)得到黄花白及治疗GU核心靶点有34个,这些靶点通过作用于IL-17、NF-KB、TNF和MAPK等介导的信号通路和各种生物过程影响GU的发展.分子对接结果表明,黄花白及主要活性成分与核心靶点IL-6、TNF、1L-1β和NF-κB具有良好的对接活性.动物实验结果表明,黄花白及能改善GU大鼠胃黏膜损伤,并且显著降低胃溃疡大鼠胃组织中IL-6、IL-1β、TNF-α和MPO等炎性因子的水平,增加EGF的水平(P＜0.05).结论 黄花白及可以通过调节IL-17、NF-KB、TNF和MAPK等介导的信号通路抑制组织炎症,分子对接证实了以上网络药理学预测的可靠性,可能通过调控这些通路中的IL-6、TNF、IL-1β、EGF和MPO发挥治疗GU的作用.
目的 初步探讨Fractalkine/CX3CR1信号轴在MTB Hsp16.3重组蛋白诱导小鼠肺泡巨噬细胞向M2型极化中的作用及机制.方法 提取小鼠肺泡巨噬细胞,观察细胞形态后用其特异性标志CD68鉴定;MTB Hsp16.3(100 ng/mL)刺激肺泡巨噬细胞后,采用Real-time qPCR检测TNF-α、Arg-1等极化相关分子mRNA表达水平,Western blot检测Fractalkine、CX3CR1的表达情况.用慢病毒干扰肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达后,荧光显微镜观察病毒感染情况;流式细胞术检测感染效率;Real-time qPCR和Western blot检测感染前后肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达情况.采用MTB Hsp16.3刺激慢病毒感染过的肺泡巨噬细胞,Real-time qPCR检测各组极化相关分子mRNA表达水平;Western blot检测CD206、Arg-1的蛋白表达情况.利用Western blot检测各组中JNK、p38、ERK的磷酸化水平.结果 显微镜下观察发现新分离的肺泡巨噬细胞为圆形,大小不等,约2 h后贴壁较牢,24 h后,肺泡巨噬细胞呈圆形、梭形等多种形态,且胞体更大,通过CD68鉴定为肺泡巨噬细胞;经MTB Hsp16.3处理后巨噬细胞TGF-β、IL-10、Arg-1、Fizz1的mRNA水平明显增高(P＜0.05),巨噬细胞表面Fracta-lkine、CX3CR1 的表达增高(P＜0.05),与JNK、p38的磷酸化水平升高(P＜0.05)相关.干扰肺泡巨噬细胞CX3CR1的表达后,慢病毒感染效率在72 h达到最高峰,并且可降低巨噬细胞表面CX3CR1的表达.经MTB Hsp16.3刺激慢病毒感染过的肺泡巨噬细胞发现,TGF-β、IL-10、Arg-1、Fizz1 mRNA水平降低(P＜0.05),CD206、Arg-1的表达水平降低(P＜0.05),与JNK、p38磷酸化水平被抑制(P＜0.05)相关.结论 Fractalkine/CX3CR1信号轴可能参与调控MTB Hsp16.3重组蛋白诱导的肺泡巨噬细胞M2型极化,并且可能通过激活JNK、p38的磷酸化水平发挥作用.
目的 探讨常规超声和超声造影在伴声晕甲状腺结节鉴别诊断中的价值.方法 选择经手术病理证实的45例患者(男4例,女41例),52个结节,恶性结节30例(57.69％),其中甲状腺乳头状癌29例(结节性甲状腺肿局灶区域甲状腺乳头状癌变3例),滤泡性癌1例;良性结节22例(42.3％),其中结节性甲状腺肿9例,滤泡性腺瘤12例,桥本甲状腺炎伴纤维组织增生1例.所有病灶术前均行US及CEUS检查.观察甲状腺结节US内部结构、回声、纵横比、边缘、形态、与包膜关系、有无微钙化、有无声晕、血流及CEUS病灶边界、增强方向、增强水平、增强强度分布、时间-强度曲线、周边环状增强情况等.结果 US回声、回声水平、声晕对甲状腺结节良恶性诊断无显著性差异(P＞0.05).纵横比(A/T,x2=10.490,P＜0.05)、边缘及外侵犯(x2=3.989,P＜0.05)、微钙化(x2=9.167,P＜0.01)对甲状腺结节良恶性诊断有显著性差异(P＜0.05).且在两两比较中,恶性甲状腺结节中纵横比(A/T)≥1与良性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017),良性甲状腺结节中(A/T)＜1与恶性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017),边缘及外侵犯在良恶性甲状腺结节两两比较未构成明显统计学差异(P＞0.017),恶性甲状腺结节中微钙化(＜1mm)与良性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017),良性甲状腺结节中无钙化与恶性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017).CEUS病灶边界、病灶增强水平、病灶内增强强度分布、病灶增强时间、病灶消退时间对甲状腺结节的良恶性灌注诊断无显著性差异(P＞0.05).病灶内血流灌注增强方向(x2=6.653,P＜0.05)、病灶周边环状增强(x2=28.747,P＜0.01)对甲状腺结节良恶性灌注诊断有显著性差异.且在两两比较中,恶性甲状腺结节中向心性灌注增强方向和弥漫性灌注增强方向例数与良性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017),良性甲状腺结节中连续环状增强和不连续环状增强例数与恶性甲状腺结节例数构成统计学差异(P＜0.017).结论 US纵横比(A/T)、边缘及外侵犯、微钙化,CEUS病灶内血流灌注增强方向、病灶周边环状增强可能有助于伴声晕甲状腺结节的鉴别诊断.
目的 通过回顾1例IgG4相关性疾病同时累及下颌下腺及腹膜的临床特点及诊疗过程,就其临床表现及诊疗进行相关讨论,提高基层医师对IgG4-RD的认识及诊疗.方法 分析2019年6月28日遵义医科大学第三附属医院肾内科收治的1例IgG4-RD患者的临床表现、实验室检查、病理检查、诊断、治疗、预后及其文献复习.结果 62岁男性患者,因"右侧双J管置入术1月"入院.入院后查血清IgG4增高,腹部计算机断层扫描(CT)提示腹膜后纤维化,下颌下腺病理免疫组化:IgG散在阳性(10-20个/HPF),IgG4/IgG阳性细胞比值约为0.7.结合病例查阅相关文献,诊断IgG4-RD,给予甲强龙+环磷酰胺序贯治疗,第19天复查血清IgG4下降,第23个月复查腹部CT,腹膜后纤维化范围较入院时缩小.结论 IgG4-RD是一类与血清中IgG4增高相关的慢性、系统性罕见病,可累及全身多个器官,是进行性纤维炎性反应性疾病,不容易被及时发现及诊治,而且激素治疗存在停药容易复发,激素加免疫抑制剂联合方案能达到更好的治疗效果.
目的 利用胞内Ca2+螯合剂BAPTA-AM和CaM阻断剂TFP探讨Ca2+/CaM/CaMK Ⅱ信号通路在氰戊菊酯(Fen)诱发小鼠睾丸间质细胞(TM3细胞)线粒体损伤和睾酮合成障碍中的作用.方法 TM3细胞实验分为对照组、Fen暴露组(25 μmol/L Fen)、Fen+BAPTA-AM 组(25 μmol/L Fen+5 mmol/L BAPTA-AM)、Fen+TFP 组(25 μmol/L Fen+10μmol/LTFP),Fen暴露时长为24 h.采用ELISA法检测TM3细胞的睾酮和环磷酸腺苷(cAMP)水平,化学比色法检测TM3细胞的ATP水平,Flou-4/AM探针测定细胞内Ca2+水平,JC-1染色法测定TM3细胞的线粒体膜电位(MMP)改变,蛋白免疫印迹法检测CYP11A1、3β-HSD、StAR、CaM、p-CaMKⅡ、CaMKⅡ、Bax和Bcl-2的蛋白表达水平.结果 Fen暴露组TM3细胞的T、ATP和cAMP含量下降,MMP水平降低,睾酮合成的相关蛋白和酶CYP11A1、3β-HSD、StAR表达减少(P＜0.01);同时,TM3细胞胞内的Ca2+水平显著上升(P＜0.01),CaM、p-CaMK Ⅱ/CaMK Ⅱ、Bax蛋白表达升高(P＜0.01),Bcl-2蛋白表达下降(P＜0.01).Fen+BAPTA-AM组和Fen+TFP组TM3细胞的睾酮、ATP和cAMP含量上升,MMP水平升高(P＜0.01),睾酮合成相关的蛋白和酶CYP11A1、3β-HSD、StAR表达增加(P＜0.01),CaM、p-CaMK Ⅱ/CaMK Ⅱ及Bax蛋白表达下降,Bcl-2蛋白表达增加(P＜0.01).结论 Fen诱发的TM3细胞mPTP开放以及睾酮合成障碍可能与Fen暴露后TM3细胞胞内Ca2+超载、CaM和p-CaMK Ⅱ表达上调引起的Ca2+/CaM/CaMK Ⅱ信号通路过度激活有关.
目的 苯磺酸瑞马唑仑与丙泊酚用于内镜下逆行性胰胆管造影(ERCP)诊疗镇静的有效性和安全性的比较.方法 选择行无痛ERCP诊疗的患者116例,随机分为丙泊酚组和苯磺酸瑞马唑仑组(瑞马唑仑组),每组58例.所有患者给予舒芬太尼2 min后注射丙泊酚或苯磺酸瑞马唑仑,待患者MOAA/S评分≤2时行ERCP诊疗,结束后Aldrete评分≥9分返回病房.比较两组患者镇静成功的比例,记录麻醉手术情况、各时间点生命体征变化及不良反应发生情况.结果 两组镇静成功的比例无差异.MOAA/S评分≤2分的时间、麻醉时间、ERCP诊疗时间无差异(P＞0.05),丙泊酚组苏醒时间短于瑞马唑仑组(P＜0.05).苏醒时丙泊酚组MAP高于瑞马唑仑组(P＜0.05),丙泊酚组在给药后2 min、入镜10 min时RR较瑞马唑仑组明显降低(P＜0.05),给药后2 min、十二指肠镜置入时SpO2较瑞马唑仑组明显降低(P＜0.05).丙泊酚组注射痛、SpO2下降、呼吸暂停、低血压发生率高于瑞马唑仑组(P＜0.05).结论 苯磺酸瑞马唑仑和丙泊酚均可为ERCP诊疗提供良好的镇静效果,但苯磺酸瑞马唑仑相对于丙泊酚对呼吸循环的影响更小,不良反应发生率更低,更适用于ERCP诊疗的临床镇静.
目的 探讨盐酸达克罗宁胶浆对经鼻插管全麻拔牙患者围术期血流动力学、术后疼痛及麻醉复苏的影响.方法 选取本院2022年6月至2022年12月择期全麻拔牙术患者60例作为研究对象,ASA Ⅰ或Ⅱ级,双盲随机分为含漱5 mL达克罗宁胶浆5 min并涂抹气管导管前端20 cm(实验组)和含漱5 mL生理盐水5 min并石蜡油涂抹气管导管前端20 cm(对照组),每组30例.两组予相同方式诱导经鼻插管,全麻维持及复苏,同一组医师完成手术.观察两组不同时段血流动力学及苏醒质量,术后VAS评分,舒适度评价.结果 实验组在插管后1 min(T1)、拔管后1 min(T3)及拔管后30 min(T4)时SBP、MAP显著低于对照组(P＜0.05);实验组在术后1 h的VAS评分,术毕放气囊时呛咳及躁动程度显著低于对照组(P＜0.05);实验组舒适度高于对照组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论 经鼻插管全麻拔牙术运用达克罗宁胶浆效果显著,有利于改善血流动力学,缓解术后短期疼痛,提高麻醉复苏质量.
目的 观察芪参还五胶囊配合"皮层-面部-四肢"序贯针刺法对脑出血术后康复期患者意识恢复和肢体功能的影响.方法 选择符合纳入标准的脑出血术后康复期患者126例,按照随机数字表法分为对照组和观察组.对照组给予相应的基础治疗,加用甘露醇注射液和依达拉奉注射液;观察组在对照组的基础上给予芪参还五胶囊配合"皮层-面部-四肢"序贯针刺法(皮层针刺点、舌咽部针刺法和体表针刺法).两组均治疗2周,观察治疗前后两组患者简式Fugl-Meyer运动功能评分(FMA)、美国国立卫生院神经功能缺损评分(NIHSS)和格拉斯哥预后评分(GOS)的变化情况.结果 治疗过程中,观察组因不耐受针灸治疗退出2例,对照组病情加重1例,最终对照组纳入观察病例62例,观察组纳入观察病例61例.两组治疗前FMA、NIHSS和GOS评分无差异(P＞0.05).治疗后两组上肢FMA、下肢FMA和NIHSS评分均升高,GOS评分降低(P＜0.01).治疗后观察组FMA、NIHSS和GOS评分的改善情况优于对照组(P＜0.01).结论 芪参还五胶囊配合"皮层-面部-四肢"序贯针刺法可以明显促进脑出血术后康复期患者意识恢复,并改善肢体功能,值得临床推广.
目的 探讨新型冠状病毒肺炎(COVID-19)大流行期,世界卫生组织(WHO)国际临床试验注册平台注册的COV-ID-19临床研究的整体趋势、主要模式.方法 全面检索2019年12月31日至2021年12月31日,世界卫生组织(WHO)国际临床试验注册平台注册的COVID-19临床研究,以6个月为时间间隔,分为4个时间周期,采用描述性分析比较4个时间周期临床研究的整体发展趋势、主要模式.结果 研究纳入12 396项试验,涉及128个国家,计划招募337 813 461名受试者.23.7％(2 934项)的临床研究已完成.69.2％(8 575项)的临床研究在单一中心实施.在4个周期中,临床研究的数量整体呈下降趋势(从4 965项减少至1 670项).临床研究获商业资助整体呈上升趋势,由13.3％增加至26.1％.计划开展研究的时间整体呈逐渐缩短的趋势,研究时间中位数为6.2个月(IQR:2.8,12.0个月).干预性研究的比例从52.3％增加至65.0％.在6 969项干预研究中,治疗型研究的数量逐渐减少(从69.6％减少至44.0％),而预防型研究的数量逐渐增加(从13.0％增加至34.4％).仅有2.9％(202项)的研究关注COVID-19患者预后.60.0％(4 178项)的干预研究符合国际医学期刊编辑委员会(ICMJE)的注册要求.结论 COVID-19注册研究具有单中心和多样性的特点,研究目的逐渐从治疗转向预防,长期COVID的危害尚未得到足够关注,遵守注册的合规性相对较低,公共卫生部门、研究机构和资助方需要共同采取一系列措施来解决这些问题.
目的 探讨间断禁食对慢性脑低灌注(CCH)大鼠海马星形胶质细胞极化的影响以及S1P1在其中的作用.方法 将30只雄性SD大鼠随机分为3组:对照组、CCH组和CCH+间断禁食组.对照组给予假手术,CCH组大鼠给予双侧颈总动脉结扎手术处理,CCH+间断禁食组大鼠在手术后1周开始给予隔日间断禁食处理.术后8周取脑切片,进行C3d/GFAP双重荧光染色,并取新鲜海马组织进行WB检测S1P1、NeuN、PSD95蛋白水平.体外对小胶质细胞系BV2细胞给予慢性浓度梯度氯化钴(48 h)诱导处理,取其条件培养基(MCM)加入原代星形胶质细胞中,qPCR检测各组星形胶质细胞极化标志物表达.将星形胶质细胞条件培养基(ACM)加入神经元细胞系HT22中,CCK8及LDH活性测试检测其毒性,摸索体外慢性缺氧最佳药物浓度.对慢性缺氧诱导的星形胶质细胞给予S1P1抑制剂Ponesimod浓度梯度预处理,观察其是否能抑制星形胶质细胞极化及神经毒性.结果 间断禁食可降低慢性脑低灌注大鼠海马C3d/GFAP双重标记细胞数量和S1P1蛋白表达,并恢复慢性脑低灌注引起的NeuN和PSD95蛋白下调(P＜0.05).慢性氯化钴刺激BV2细胞最佳浓度为100μmol/L,刺激后其MCM诱导星形胶质细胞毒性极化标志物C3、Serping1、H2D1转录水平明显增加(P＜0.05),且刺激后星形胶质细胞ACM能降低神经元细胞系HT22细胞活性,增加LDH释放(P＜0.05).体外实验发现,10 μmol/L浓度Ponesimod能够模拟间断禁食,下调慢性缺氧诱导的星形胶质细胞C3和Serping1转录,并改善慢性缺氧诱导的星形胶质细胞ACM对HT22细胞活性的抑制作用(P＜0.05).结论 S1P1可能介导间断禁食对慢性脑低灌注大鼠海马星形胶质细胞毒性极化的抑制作用.
目的 探讨汉黄芩素(Wog)对子宫内膜异位症(EM)大鼠铁死亡的影响及其作用机制.方法 构建EM大鼠模型,将SD大鼠分为空白组(CT组)、EM模型组(EM组)、Wog低剂量组(Wog L组)、Wog高剂量组(Wog H组)、Wog+沉默调节蛋白1(SIRT1)抑制剂(EX527)组.给药4周后,检测异位病灶体积,ELISA测定血清雌二醇(E2)、孕激素(P)、白介素-1β(IL-1β)、IL-6的含量,HE染色观察异位内膜组织病理损伤,普鲁士蓝染色检测铁离子聚集情况,铁离子比色法检测Fe2+浓度,Western blot检测SIRT1、核因子E2相关因子2(Nrf2)、谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)、溶质载体家族7成员11(SLC7A1 1)和铁蛋白轻链(FTL)蛋白表达水平.结果 与CT组相比,EM组大鼠异位内膜组织腺体较少,大量炎性细胞浸润和铁离子沉积,异位病灶体积、E2、P、IL-1β、IL-6、Fe2+水平升高,SIRT1、Nrf2、GPX4、FTL和SLC7A11蛋白表达水平下降(P＜0.05);与EM组相比,Wog L、Wog H组异位内膜组织腺体增加,离子沉积少见,异位病灶体积、E2、P、IL-1β、IL-6、Fe2+水平降低,SIRT1、Nrf2、GPX4、FTL和SLC7A11蛋白表达水平升高(P＜0.05);与Wog H组相比,Wog+EX527组大鼠异位内膜组织炎性细胞浸润和铁离子沉积增加,异位病灶体积、E2、P、IL-1β、IL-6、Fe2+水平升高,SIRT1、Nrf2、GPX4、FTL和SLC7A11蛋白表达水平下降(P＜0.05).结论 Wog可能通过激活SIRT1/Nrf2信号通路抑制EM大鼠铁死亡.
目的 探讨ICU获得性衰弱(ICU-AW)模型大鼠细胞因子白细胞介素1β(IL-1β)、白细胞介素6(IL-6)、白细胞介素22(IL-22)及膈肌、腓肠肌病理结构的动态变化情况及意义.方法 将SPF级SD雄性大鼠随机分为对照组、假手术组和模型组,模型组采用盲肠穿刺结扎法(CLP)造模,假手术组仅开腹盲肠探查,对照组正常饲养.定期观察并记录各组大鼠的外观表征及体重.分别于造模后第1、3、6天,留取血清、膈肌及腓肠肌标本,测算膈肌湿重、膈肌湿重/体重、腓肠肌湿重及腓肠肌湿重/体重,HE染色测算肌纤维横截面积(CSA),Masson染色测算胶原容积分数(CVF),酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清、膈肌及腓肠肌组织中IL-1β、IL-6及IL-22的水平.结果 与假手术组比较,模型组大鼠在造模后第1、3、6天体重、膈肌湿重、膈肌湿重/体重、腓肠肌湿重、腓肠肌湿重/体重及肌纤维CSA均显著减低(P＜0.01),CVF显著增加(P＜0.01),血清、膈肌及腓肠肌组织中IL-1β、IL-6及IL-22的水平均显著增加(P＜0.01).结论 ICU-AW模型大鼠膈肌和腓肠肌出现肌萎缩,并随造模时间延长而加重,伴有血清、膈肌及腓肠肌组织中炎性细胞因子水平增加,提示ICU-AW的骨骼肌受损可能与炎性机制有关.
