Objective: To develop a method for the analysis of phenylglyoxylic acid (PGA) and mandelic acid (MA) in urine by ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry. Methods: The study was conducted in April 2022. Urine samples were directly diluted with the initial mobile phase, separated by Waters HSS T3 column after passing through the membrane, and analyzed under negative ionization mode (ESI(-)) and multiple reaction monitoring (MRM) conditions, the contents of PGA and MA in human urine were quantitatively determined by external standard method. Results: The determination of PGA and MA showed a good linear relationship within the range of 10-1000 ng/ml, with a correlation coefficient of 0.9999. The linear regression equation of PGA was y=1141.4x+2157.3, the detection limit and lower limit of quantification of the method were 0.081 ng/ml and 0.269 ng/ml, and the recovery rate was 90.47%-99.83%. The linear regression equation of MA was y=62.8x+140.3, the detection limit and lower limit of quantification of the method were 0.551 ng/ml and 1.836 ng/ml, and the recovery rate was 92.75%-101.09%. The intra and inter batch precision of PGA and MA were both<5%. Conclusion: An ultra-high performance liquid chromatography tandem mass spectrometry method for the analysis of PGA and MA in urine was established.The sample pretreatment operation is simple, and the accuracy and precision of the method meet the standard requirements. It can be used for monitoring and evaluating PGA and MA in urine of the general population and occupational contact population.
本研究构建了以城市污泥基氧化石墨烯(GO)为模拟酶的比色传感器用于定量检测H2O2.以城市污泥为基质利用改进Hummers法制备氧化石墨烯(GO),利用GO具有过氧化物模拟酶的特性,能够催化 H2O2与3,3',5,5'-四甲基联苯胺(TMB)的显色反应定量检测H2O2.结果显示,在最佳检测条件HAc-NaAc缓冲溶液pH 4.8、TMB溶液浓度30 mmol·L-1和城市污泥基GO浓度460 μg·mL-1时,H2O2浓度在0.1～2 μmol·L-1和10～150 μmol·L-1范围内,与体系吸光度呈良好的线性关系,最低检测限为0.01 μmol·L-1.此方法对实际水样中H2O2含量进行检测,回收率在99％～103.77％之间.研究表明,城市污泥基GO具有与传统GO一致的过氧化物酶催化特性,在传感检测领域具有一定的应用潜力,为比色传感检测H2O2提供了新的思路.
建立了以活性为导向的快速筛选分离及鉴定茯苓中活性成分的分析方法.以茯苓总三萜得率为评价指标,应用星点设计-效应面法选取茯苓石油醚提取的最佳条件为:1-丁基-3-甲基咪唑四氟硼酸盐([Bmim][BF4])浓度为0.4 mol/L,用量为10％,液料比为30:1,提取时间为35 min,提取次数为3次;利用超滤-质谱技术(UF-LC-MS)共筛选得到5个潜在的乙酰胆碱酯酶(AChE)抑制剂和3个潜在的5-脂氧合酶(5-LOX)抑制剂.以活性为导向,经高速逆流色谱(HSCCC)结合半制备高效液相色谱(Semi-preparative HPLC)技术联合分离,从200 mg茯苓提取物中,分离制备得到2.36 mg 3-表去氢土莫酸、3.54 mg去氢茯苓酸,8.57 mg茯苓酸、5.34 mg松苓新酸、4.32 mg 3-氢化松苓酸,经高效液相色谱(HPLC)分析其纯度均达到90.0％以上;并采用超高效液相色谱高分辨质谱仪及核磁共振波谱技术对单体活性成分进行鉴定.本研究所建立的方法简单、快速、高效,分离样品纯度高,适用于茯苓中三萜类活性化合物的分离纯化及鉴定研究,为天然药物的开发与应用提供了理论基础和技术支持.
上转换材料因其具有在不同光谱区域之间转换光的能力和特殊的光物理特性,克服了传统荧光材料的一些缺点,为高灵敏度的化学和生物传感器的构建提供了新思路,在分析检测领域引起了广泛关注.本文介绍了近年来利用上转换材料所构建的传感器,其中包含荧光共振能量转移型、辐射能量转移型和非能量转移型三类传感器及其应用于药物和生物活性分子分析测定的相关研究.同时,本文还对此类传感器的未来发展趋势进行了展望,其中上转换材料的制备尺寸以及传感器多功能设计的合理性及其生物稳定性是此类传感器未来发展的重要影响因素.
数字PCR作为一种新型核酸分析方法,能对样品中目标核酸分子进行绝对定量,具有极高的检测灵敏度和突出的抗背景序列对靶序列的竞争抑制能力.凭借这些优势,数字PCR在癌症标志物检测、无创产前检查等领域具有广阔的应用前景.液滴数字PCR技术将PCR反应体系稀释并分散至大量液滴中,使液滴成为最多只包含单核酸分子的独立反应单元后进行PCR扩增和检测.目前液滴数字PCR分析系统大多采用微流控芯片生成液滴,芯片结构复杂、加工困难、价格高昂,这些因素在一定程度上限制了其推广应用.探索能快速生成大规模液滴的方法对促进液滴数字PCR系统的发展具有重要意义.本文综述了微流控液滴生成技术和液滴数字PCR系统的研究进展,对膜乳化法、微流控芯片法和毛细管法进行了分类介绍并总结了它们的优缺点,介绍了微流控液滴数字PCR系统和商业化产品,并对液滴数字PCR技术的发展前景进行了展望.
以邻苯二甲酸二乙酯(DEP)为模板分子,以吡咯为功能单体,在阳极氧化制备的TiO2纳米管阵列(TiO2 NTs)中,通过电聚合法沉积分子印迹聚吡咯(MIP-PPy),构建MIP-PPy/TiO2 NTs传感器,用于光电化学检测DEP.采用恒电位i-t曲线和交流阻抗法研究了光电化学传感器的性能.结果表明:MIP传感器对DEP分子表现出优异的光电化学响应和识别能力,在含0.5 mg/L DEP的0.1 mol/L Na2SO4水溶液中,MIP-PPy/TiO2 NTs修饰 电极的 光电流 变化明 显大于非印迹PPy/TiO2 NTs(NIP-PPy/TiO2 NTs)修饰电极.MIP-PPy/TiO2 NTs传感器的光电流与DEP浓度在0.05～2.80 mg/L 范围内呈良好的线性关系,线性方程I(μA)=1.026+1.156c(mg/L),检出限为 0.02 mg/L(S/N=3).
本文采用连续离子层吸附法在镍基底上制备珊瑚状Ag/Ni(OH)2纳米复合电极,建立灵敏度优异的无酶葡萄糖传感器,采用循环伏安法(CV)和安培电流法(i～t)对该传感器的电化学特性进行了研究.结果表明,在0.5 V下,该传感器具有较好的电化学传感性能,其灵敏度为1 102μA·mmol·L-1·cm-2,线性范围为0.002 mmol/L～10.11 mmol/L,检出限为0.29 μmol/L(S/N=3),且重复性好,抗干扰性强,重现性和稳定性好,这主要是因为银、镍纳米复合材料间的相互协同效应,比表面积增大,使其具有更多的活性位点,提高了电极的电化学性能.该传感器可用于检测葡萄糖注射液中葡萄糖的浓度,表明制备的Ag/Ni(OH)2纳米复合电极具有检测葡萄糖的应用潜力.
荧光三元相关光谱是原位研究多组分分子相互作用的一种新方法.三元相关器是荧光三元相关光谱仪器的核心计算单元.目前,我们尚未发现商品化三元相关器.本论文基于单光子计数器采集的光子信号序列的稀疏特性,提出了一种时间-光子模式相关算法,将其与传统多采样间隔时间相关算法相结合开发了改进的多采样间隔时间三元相关算法;进一步结合GPU并行加速,构建了三元相关器,显著加快了荧光三元相关光谱的运算速度;并将三元相关器成功地用于四色荧光微球和多色标记DNA荧光三元相关光谱分析.
建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)测定植物源食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留量的分析方法.样品经乙腈+甲苯(体积比90∶10)提取,用改进的QuEChERS方法一步完成净化,富含色素样品经石墨化碳黑(GCB)和C18净化;糙米、小麦等样品经C18净化,提取液经离心过膜后上机检测.以0.1％甲酸含5 mmol/L乙酸铵水溶液-乙腈为流动相,在0.25 mL/min流速下梯度洗脱,采用C18色谱柱进行液相分离,电喷雾正离子电离(ESI+),多重反应监测模式(MRM)检测,外标法定量.在菠菜、芹菜、土豆、西红柿、苹果、桃子、葡萄、糙米、小麦、核桃、大米11种基质中,氟唑磺隆和氟吡磺隆在0.5～100 ng/mL范围内线性关系良好,相关系数均大于0.998;方法检出限为2.0 μg/kg,定量限为5.0 μg/kg;在5、10、20、100μg/kg 4个浓度添加水平下,氟唑磺隆的回收率在78.5％～114.2％之间,相对标准偏差(RSD,n=6)在2.2％～14.9％之间;氟吡磺隆的回收率在77.4％～114.9％之间,RSD(n=6)在2.5％～14.8％之间.该方法准确、灵敏、快捷,适用于植物源性食品中氟唑磺隆和氟吡磺隆残留的快速确证和定量分析.
人体呼出气体中的三甲胺(TMA)可作为慢性肾病的潜力标志物.针对慢性肾病早期筛查的需求,基于紫外光电离-离子迁移谱(UV-IMS)发展了分析呼出气体中三甲胺的新方法.以丙酮作为掺杂剂,提升了三甲胺的电离效率;优化了电离源参数和漂移管温度;并考察了样品湿度对三甲胺定性及定量检测的影响.所建立方法对三甲胺的理论检出限为1.13×10-3 mg/m3,线性工作范围为1.32×10-2～1.32×10-1 mg/m3(相关系数为0.9916),平均相对标准偏差为1.84％.最后,通过呼出气体加标测试,验证了该方法在复杂基质下对三甲胺的检测能力.
建立了高效液相色谱-串联质谱法(HPLC-MS/MS)同时测定调味品中7种对羟基苯甲酸酯类防腐剂(对羟基苯甲酸甲酯、对羟基苯甲酸乙酯、对羟基苯甲酸异丙酯、对羟基苯甲酸丙酯、对羟基苯甲酸异丁酯、对羟基苯甲酸丁酯、对羟基苯甲酸庚酯)的方法.目标物质经乙腈提取,C18色谱柱分离,电喷雾离子源(ESI)电离,采用外标法定量.结果表明,7种目标物质在2.0～200.0 ng/mL浓度范围线性关系良好,相关系数大于0.9990.方法定量限为0.005～0.05 mg/kg,检出限为0.002～0.02 mg/kg,回收率为70.2％～107.6％,相对标准偏差(RSD,n=6)为1.2％～10.6％.本方法采用质谱法负离子模式同时检测7种对羟基苯甲酸酯,满足一针进样同时测定,前处理方法简便,回收率高,可应用于调味品中7种对羟基苯甲酸酯的日常检测.
建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定霜膏类化妆品中的联苯胺和对氨基偶氮苯.样品经叔丁基甲醚提取后,氮气浓缩,正己烷复溶,硅胶和中性氧化铝固相萃取剂进行净化.使用乙腈和0.1％甲酸-水溶液(V/V)等度洗脱,Agilent poroshell EC C18色谱柱分离,最后电喷雾电离源正离子模式电离,多反应监测模式进行测定,确定一级母离子和二级子离子,建立质谱测定方法.采用三因素三水平响应曲面优化测定的最佳条件,并建立数学模型预测最佳测得值,预测值和实际值吻合.最佳的测定条件为:硅胶用量200 mg,中性氧化铝用量500 mg,叔丁基甲醚用量10 mL,在该条件组合下,测得联苯胺回收率为89.85％.基质曲线在2.0～200μg/L范围内线性关系良好,相关系数R2大于0.999,平均回收率范围在86.4％～92.7％,相对标准偏差在1.96％～7.05％之间,方法检出限为4.0～10.0 μg/kg,定量限为10.0～20.0 μg/kg.该方法操作简便、回收率好,具有较高的灵敏度和精密度,适用于测定霜膏类化妆品中的联苯胺和对氨基偶氮苯.
采用层状镍/铁双金属氢氧化物/碳纳米管复合材料(NiFe-LDH/CNT)构建了高灵敏度的双酚A(BPA)电化学传感器,探讨了 BPA在该传感器上的电化学行为和氧化反应动力学参数.实验结果表明,该传感器在磷酸盐缓冲溶液(PBS)中对BPA有较强的电催化作用,于0.505 V电位处出现灵敏的氧化峰.利用线性扫描伏安法检测BPA浓度线性范围为0.05～50.0 μmol/L,检出限为9.8 nmol/L.该方法用于塑料和纺织品实际样品中BPA的定量检测,回收率在96.0％～105％之间.该传感器成本低、灵敏度高、抗干扰能力强,为检测BPA提供了一种简便有效的方法.
建立了电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)同时测定尿液中Li、Al、Cr、Mn、Fe、Co、Ni、Cu、Zn、As、Se、Sr、Cd、Cs、Ba、Tl、Pb等17种微量元素含量的方法.采用直接稀释对样品进行前处理,通过在稀释剂中加入异丙醇作为增敏剂以提高分析灵敏度,同时使用多内标元素校正和集成式碰撞反应池(iCRC)技术来抑制基质效应和质谱干扰.实验结果表明,各元素的线性相关系数均大于0.999,检测限为0.001～0.442 μg/L,加标回收率为83.6％～110.5％,精密度均小于5％,尿液标准物质中各元素测定值均在参考值范围内.该方法前处理简单,灵敏度高,适用于临床批量尿样中多种微量元素的检测.
本文使用原位生长法制备了 一种平面凹槽微腔阵列表面增强拉曼散射(SERS)基底,以4-氨基苯硫酚为探针分子,通过席夫碱缩合反应实现对变压器油中糠醛分子的捕捉,根据反应生成的碳氮双键在1658 cm-1处的特征拉曼谱带与糠醛浓度的关系,实现了变压器油中微量糠醛的定量检测.研究结果表明,该方法测定变压器油中糠醛的检出限约为0.05 mg/L,在0.1～100 mg/L糠醛浓度范围内,1 658 cm-1和1 080 cm-1处的峰强比值与糠醛浓度的对数具有良好的线性关系,所得线性回归方程为y=4.4156x+10.2612,相关系数R2=0.9862.该方法采用商品化便携式拉曼光谱仪,为拉曼光谱应用于变压器油中微量糠醛的现场快速检测奠定了良好的基础.
建立了 一种基于超高效液相色谱单四极杆质谱检测器(UPLC-QDA)定量血浆游离氨基酸谱的方法.血浆样本经甲醇去除蛋白后,所得到的上清液挥干后用6-氨基喹啉-N-羟基琥珀酰亚胺基氨基甲酸酯(AQC)进行衍生.反应液在Cortecs C18色谱柱上进行6 min梯度洗脱达到色谱分离,采用正离子模式下的选择离子扫描模式测定.结果表明,34种氨基酸的检出限与定量限分别在0.1～5.0 μmol/L和0.2～10.0 μmol/L之间,并具有较好的线性关系(R2＞0.991)和良好的准确度(80.4％～121.8％),较高的精密度(相对标准偏差＜15％)以及较好的稳定性,低、中、高3个浓度加标回收率在78.1％～127.6％之间,基质效应在-21.9％～29.7％之间.本方法简单快速,稳定可靠,并成功地应用于正常人和小鼠血浆样本中氨基酸谱的定量.
采用阳离子交换固相萃取-高效液相色谱-串联质谱(CESPE-HPLC-MS/MS)技术,建立了测定消毒液中阳离子表面活性杀菌剂的方法.样品以甲醇/水为溶剂,超声辅助稀释溶解,阳离子交换固相萃取柱净化浓缩,采用ZORBAX Eclipse XDB C18色谱柱分离,以0.1％三氯乙酸水溶液和0.1％三氯乙酸的乙腈溶液为流动相,梯度洗脱,多反应监控(MRM)模式进行分析检测.在优化的实验条件下,目标物浓度在1～500 ng/mL范围内与峰面积线性关系良好(r2≥0.9963).方法定量下限为0.57～2.84 ng/mL,样品加标回收率为86.4％～115.7％,相对标准偏差(RSD,n=6)≤6.7％.结果表明,该方法快速可靠、准确简便,适用于消毒剂中阳离子表面活性杀菌剂的分析检测.
建立了 QuEChERS-气相色谱-串联质谱同时测定水产品中12种拟除虫菊酯类农药的检测方法.鱼、小龙虾样品经匀浆和QuEChERS前处理后即可进行气相色谱-串联质谱检测.12种拟除虫菊酯类农药在5～200 μg/L浓度范围内线性良好,相关系数r2≥0.9992,各组分的检出限(LOD)为3 μg/kg,定量限(LOQ)为10 μg/kg,满足国家标准(GB31650-2021)限量值的分析要求.各组分在1LOQ、3LOQ、10LOQ的添加水平下,在鲫鱼、鳊鱼、草鱼和小龙虾中的回收率在81.5％～115.3％,相对标准偏差(RSD,n=3)均小于15％.本方法前处理简单高效,可用于水产品中12种拟除虫菊酯类农药的快速筛查.
制备了磁性羟基磷灰石(HAP/Fe3O4)固相萃取吸附剂,结合高效液相色谱-紫外可见检测器,建立了用于湖水和河水中3种苯甲酰脲类农药(BUs)的分析方法.采用原位生长法合成HAP/Fe3O4,使用X射线衍射仪、扫描电子显微镜和振动样品磁强计对材料进行了表征;考察了吸附剂用量、吸附时间、溶液pH、离子强度、洗脱溶液种类和洗脱体积对BUs回收率的影响.在最优条件下,方法对湖水中氟铃脲和虱螨脲在0.80～800 ng/mL、氟啶脲在0.70～700 ng/mL线性关系良好(r=0.9996),检出限和定量限分别为0.20～0.25 ng/mL和0.70～0.80 ng/mL;回收率为81.7％～102％,日内和日间精密度(n=3)分别为1.1％～6.5％和1.2％～8.1％.当上样10 mL湖水样品时,HAP/Fe3O4对3种BUs的富集倍数为40.9～51.0;重复吸附-解吸10次,3种BUs回收率仍达76.7％～99.2％.本方法准确、简单且经济,可用于分析环境水样中BUs.
建立了阿司匹林双嘧达莫片溶出度和含量的测定方法.采用Amethyst C18-H色谱柱(4.6 mm×250 mm,5 μm),以磷酸盐缓冲液-甲醇-乙腈为流动相,梯度洗脱,流速1.0 mL/min,检测波长235 nm.溶出度实验采用篮法,以0.1 mol/L盐酸溶液和磷酸盐缓冲液(pH 6.8)为溶出介质.结果表明:溶出度实验中双嘧达莫、阿司匹林和水杨酸质量浓度分别在0.5508～49.57、1.668～150.1和0.2004～18.04 μg/mL范围内线性关系良好(r2≥0.9998),回收率在97.7％～102.0％之间(RSD≤1.0％,n=6).含量测定实验中阿司匹林和双嘧达莫质量浓度分别在29.71～267.4 μg/mL和10.42～93.78 μg/mL范围内线性关系良好(r2≥0.9999),回收率在98.1％～101.0％之间(RSD＜1.0％,n=9).本方法准确性好、精密度高、操作简单,适用于阿司匹林双嘧达莫片溶出度和含量测定.
