Glucansucrase(EC.2.4.5.1)is a class of α-glucosyltransferases,mainly produced by lactic acid bacteria such as Leuconostoc,Streptococcus and Lactobacillus.The structure and catalytic mechanism of glucansucrase are diverse,and it is an important tool enzyme for the biosynthesis of exopolysaccharide.This article mainly reviews the source,classification,structure and reaction mechanism of glucansucrase and the effects of medium composition,culture conditions on the production of glucansucrase,with a focus on the optimization methods,separation and purification processes,and enzym-atic properties of glucansucrase,and prospects for its development trend.This article aims to provide reference for the research of glucansucrase in related fields.
癌症作为当今世界一个主要的公共卫生问题,其难以被治愈的情况一直未得到有效的解决.粗糠柴毒素(Rottlerin)是一种从大戟科植物中提取出来的天然化合产物,具有多种抗癌生物活性.近些年来的研究已充分证明Rottlerin作为多种激酶、转录因子和信号分子的抑制剂,可控制癌症细胞的存活或死亡.虽然Rottlerin的抗癌活性一直被认为是调控细胞凋亡或自噬,然而最近的研究揭示了其毒性机制的存在.本综述主要介绍Rottlerin能够直接结合和抑制某些关键分子,例如细胞外调节蛋白激酶(ERK)和哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR),从而独立于上游信号,并通过mTORC1(哺乳动物雷帕霉素靶蛋白复合体1)/4EBP-1(真核翻译起始因子4E结合蛋白1)/eIF4E(真核翻译起始因子4E)轴负调控蛋白质的翻译起始阶段,并抑制内质网应激负调控的真核翻译起始因子 2(eIF2)的表达.这些全新的机制,已被证实可诱导乳腺癌和皮肤癌细胞系的死亡,极大增加Rottlerin作为开发新型治疗药物的天然先导化合物的潜力.
乙酰胆碱酯酶在生命活动中具有重要的作用,其检测方法一直为研究者所关注,其中比色法和荧光检测法是目前发展较快的检测方法.如何发展出高效率低成本的快速检测方法,仍然是乙酰胆碱酯酶测定方法优化的主要方向.本文简要综述了近年来比色法与荧光分析法在乙酰胆碱酯酶检测中的应用.
目的:建立测定德谷胰岛素含量的超高效液相色谱法.方法:色谱柱为Waters C18(2.1 mm×100 mm,1.7 μm),流动相A为 0.1 mol/L硫酸钠溶液(pH值 5.7)-乙腈(体积比 90∶10),流动相B为 50%乙腈,梯度洗脱;流速为0.25 mL/min,检测波长为 214 nm,柱温为40℃,进样量为 2 μL.结果:德谷胰岛素浓度在 0.1～1.2 mg/mL时与峰面积线性关系良好,精密度、稳定性、重复性、耐用性试验的RSD均小于1%,平均回收率为100.10%,回收率RSD为0.63%(n=9).结论:该方法专属性强,精密度、稳定性、重复性、耐用性好,可用于德谷胰岛素的含量测定.
"化工单元操作技术"课程是职业院校化工类专业的核心基础课.通过本课程学习,有利于学生在工程实践中分析并解决实际化工工艺及设备的问题.本文以江西省化学工业学校为例,对职业教育"化工单元操作技术"课程思政教学实践中存在的问题进行分析.通过强化教师思政教学能力、挖掘思政元素整合课程资源、创新教学方式完善课程设计、完善教师评价激励机制、建立考核评价体系等方面进行探索和实践,"化工单元操作技术"课程思政建设将得到全面加强和完善,为培养德才兼备的大国工匠奠定坚实基础.
目的:建立阿苯达唑中苯残留的顶空气相色谱法(HS-GC)测定方法.方法:外标法;采用DB-624毛细管柱;氢火焰离子检测器(FID);程序升温.结果:检测限为 0.05 μg/mL,定量限为 0.10 μg/mL;在 0.10～2.02 μg/mL范围内线性关系良好(r=0.999 9);精密度实验中RSD为1.2%、1.1%(n=6)和2.3%(n=12);加标回收率为102.5%～110.2%,RSD为2.5%(n=9);测试条件(流速、柱温起始温度)微小的变动对测定结果影响较小.结论:本方法操作简便,灵敏度、精密度、准确度均能满足残留分析的要求,方法专属性和耐用性良好,可对阿苯达唑苯残留进行定量控制.
目的:绿色合成四氢喹啉骨架.方法:以 3-甲基吲哚作为起始原料,乙腈作为溶剂,四丁基高氯酸铵作为电解质,乙酸为添加剂,在不加氧化剂和金属催化剂下,在未分离电解槽中室温下3 mA恒定电流电催化4 h.结果:实现了3-甲基吲哚的自身偶联反应,以43%的产率绿色合成环氧二苯并萘啶化合物,通过氢谱、碳谱和单晶数据确定了其绝对构型.结论:该反应避免了化学计量的氧化剂和过渡金属催化剂的使用,廉价易得的反应原料使得该反应可以在更温和的条件下进行,为四氢喹啉骨架的构建提供了一种绿色可靠的方法.
近年来,随着生物技术药物的快速发展,其质量控制日益引起人们的重视.氧化可能会影响生物技术药物的有效性和安全性,因此在生物技术药物的研发、生产、使用过程中应监测和表征氧化,而检测方法在监测和表征氧化过程中起着重要作用.在药物研发的早期阶段中,采用计算机模拟技术进行氧化预测有助于筛选和设计稳定的药物,从而提高新药的研发效率.本文以单克隆抗体为例介绍了生物技术药物中常见的两种氨基酸氧化现象、氧化对生物技术药物的影响,并对氧化的检测方法、计算机模拟预测氧化进行了综述,旨在为药物的研发、优化和贮存条件的研究提供参考.
目的:探讨7-脱氢胆固醇还原酶(DHCR7)在肝细胞癌(HCC)组织中的表达水平及临床意义.方法:采用多中心样本(n=41)分析HCC与正常肝组织中DHCR7的差异性表达.通过Wilcoxon秩和检验和标准化平均差(SMD)评估肿瘤组和对照组之间DHCR7表达水平的差异.使用总体受试者工作特征曲线(sROC)评估DHCR7在癌症中的临床价值.结果:相较于正常肝细胞,在HCC组织中观察到DHCR7 mRNA表达升高(P＜0.05).DHCR7 mRNA在HCC组织中的过表达有潜力作为鉴别肿瘤与正常组织的指标[总敏感性(Se)=0.60,总特异性(Sp)=0.81,曲线下总面积(AUC)=0.77],表明DHCR7具有用于辅助诊断HCC的潜力.结论:对比健康肝脏,HCC中的DHCR7 mRNA体现较高表达,而DHCR7蛋白也具有高表达的趋势,DHCR7可能成为HCC的潜在标志物.
氨基葡萄糖盐酸盐(GAH)为甲壳素的下游产物之一.随着研究的深入,其主要活性成分葡萄糖胺(GlcN)从单一的通过虾蟹壳的化学水解获得逐渐发展到可从真菌、细菌等多种原料获得.GlcN具有治疗骨骼疾病、舒缓炎症、抗肿瘤等功效,可通过盐酸水解、酶解、发酵等方式制取.基于此,本文对现有国内外关于GlcN的生物活性及相关研究进行综述,以期对未来GlcN和GAH的进一步开发提供参考.
自由基氰甲基化反应是一种直接高效的将腈基引入目标有机分子的方法.本综述根据烷基腈α位的不同活化方式,对近年来国内外研究人员所开展的研究和探索工作进行了初步的总结和评述.并结合该领域的研究动态及发展现状,提出了自由基氰甲基化反应的发展趋势.
通过网络药理学和分子对接对益气复脉粉针剂预防心肌缺血再灌注损伤的作用机制进行预测.利用TCMSP、TCMIP与SwissTargetPrediction数据库收集益气复脉粉针剂中的主要活性成分并预测其作用靶点,通过GeneCards、TTD、OMIM数据库获取心肌缺血再灌注损伤相关靶点,通过STRING数据库与Cytoscape软件构建PPI蛋白互作网络,对计算所得的核心靶点进行GO功能富集分析与KEGG通路富集分析,以揭示其关键生物过程.采用AutoDock Vina软件进行分子对接验证,通过ProteinPlus展示其相互作用效果.经过筛选得到益气复脉粉针剂相关作用靶点189个,心肌缺血再灌注损伤相关靶点1 215个,其中有 33 个药物-疾病共同作用靶点,其生物过程作用机制与系统过程调节与激素调节有相关性.分子对接结果显示7个药物同10 个靶点对接良好.益气复脉粉针剂中的活性成分通过多条信号通路,多方面改善心肌细胞状态,起到抗炎、节律调节、血压调节等作用,从而实现预防心肌缺血再灌注损伤.
目的:建立同时测定心脉通胶囊中5种皂苷含量的LC-MS/MS方法.方法:选用Waters Acquity BEH C18(100 mm×2.1 mm,1.7 μm)色谱柱,柱温 25℃,以甲醇-0.1%甲酸水梯度洗脱,流速为 0.3 mL/min,ESI离子源,采用正离子多反应监测(MRM)监测模式.结果:三七皂苷R1、人参皂苷Re、Rg1、Rb1 及Rd在检测浓度范围内线性良好(R2＞0.999 1),加标回收率为 95.94%～98.05%,精密度、稳定性及准确度RSD＜3.0%.结论:该方法简单、准确、重复性好,可用于心脉通胶囊的质量控制和评价.
随着我国锑相关产业的大规模发展,大量含锑化合物被排入到环境中,对生态环境造成了严重的威胁,如何处理锑污染也成为当今环境科学的研究热点.本研究从几种白腐真菌中筛选出较为耐锑的菌种作为吸附材料,并研究初始浓度、吸附时间及pH条件的改变对锑吸附性能的影响.实验结果表明,最耐锑的白腐真菌是黄孢原毛平革菌(Phanerochaete chrysosporium),在锑初始浓度为 50 mg/L、pH=3条件下吸附12 h,对锑的吸附效果最好,吸附量最高达 291.76 mg/g.
肝细胞癌(HCC)属于全球范围内较为常见的恶性肿瘤.受到丙型肝炎病毒(HCV)感染,会促使机体肝细胞的生理状态发生改变,增大肝细胞癌的患病风险.在此基础上,通过明确HCV感染后的表观遗传特征,分析其对肝细胞癌产生的影响,有助于在病症早期实现提前预防.本文结合近年来的相关研究成果,对丙型肝炎病毒感染后的表观遗传和对肝细胞癌发生的影响予以综述.
目的:建立重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦ)中国仓鼠卵巢(CHO)细胞表达系统,并从生物化学与凝血活性等方面对活化的重组人凝血因子Ⅶ(rhFⅦa)进行分析.方法:利用公司专有的CHO细胞表达系统构建rhFⅦ表达载体并筛选稳定高产细胞株.通过经典的离子交换技术纯化并活化rhFⅦ.通过SDS-PAGE、Western Blot对rhFⅦa进行生物化学分析,用生物膜干涉技术(BLI)验证其与组织因子(TF)的结合,利用对发色底物酶切、活化部分凝血活酶时间(APTT)/凝血酶原时间(PT)、血栓弹力仪(TEG)对其凝血活性进行了深入的分析并与成熟产品NovoSeven进行了比较.结果:rhFⅦ在CHO细胞流加培养中得到了成功表达,其表达量可达 50 mg/L.成功激活的rhFⅦa显示出与NovoSeven高度相似的生物化学与凝血活性.结论:利用CHO系统成功表达并纯化获得活化的rhFⅦ,其在生化与凝血活性等方面与市售产品一致,为实现rhFⅦa国产化奠定了坚实的基础.
目的:判断珍珠岩细菌内毒素检查溶液的获取方式对使用鲎试剂(凝胶法)检测细菌内毒素有无干扰作用.方法:采用细菌内毒素凝胶法检测助滤剂珍珠岩的细菌内毒素,确认珍珠岩被高温干烤和未经高温干烤所得到的细菌内毒素检查溶液对内毒素检测的干扰.结果:样品前处理采用180℃干烤3 h与未干烤相比较均对检测方法无干扰,检测珍珠岩细菌内毒素的鲎试剂选择标示灵敏度为 0.06 EU/mL.珍珠岩细菌内毒素检查溶液的获取方式:将供试品加细菌内毒素检查用水将供试品稀释8倍混匀4 000 r/min离心10 min提取后,选择经过验证不含内毒素和干扰因子的稀释剂Ⅱ与供试品按照1∶1的比例进行稀释,能有效避免珍珠岩对细菌内毒素检查的干扰.结论:通过采用稀释剂Ⅱ对样品进行稀释及中和,珍珠岩能够采用鲎试剂检测细菌内毒素.
目的:构筑NH2-MIL88B(Fe)/核黄素(NM88B/Rf)作为级联纳米酶用于超灵敏的电化学方法检测肌氨酸(Sar).方法:选择具有类过氧化物酶活性的NM88B作为载体,通过电沉积与Rf建立完整的双纳米酶体系,Rf可将Sar催化为H2O2,NM88B进一步将生成的H2O2 转化为·OH.该体系通过缩短双酶间催化间距,提升Rf的催化Sar能力,同时利用酶级联策略实现信号放大,甲基蓝(MB)捕获·OH出现明显电信号变化,显著提高Sar检测灵敏度.结果:该电化学传感器可在1 nmol/L～10 mmol/L范围内实现Sar的高灵敏度定量检测,检出限为 0.43 nmol/L,比其他生物传感器低3个数量级.
本文讨论了婴幼儿皮肤生理及行为特点与防晒产品开发的相关性以及婴幼儿防晒产品的注意要点.婴幼儿的皮肤特点包括薄弱的皮肤屏障、易受紫外线伤害和更高的过敏风险、皮肤表面积/体重比值大使单位面积皮肤吸收率高等,行为特点包括喜欢吸吮手部、揉搓眼部等,这要求婴幼儿防晒产品具备兼顾防护UVA、UVB的有效性,并确保产品安全性,因此全面考虑婴幼儿皮肤生理及行为特点,开展对原料配方的毒理学研究非常重要,综合国内外的法规和权威机构意见,同样提示了上述结论.因此,在开发防晒产品时,需要考虑这些特点以提供适合婴幼儿使用的防晒产品.建议未来可以进一步对婴幼儿皮肤生理及行为特点开展研究,为制定合理的幼儿使用防晒护肤品指南以及产品开发提供科学依据和指导.
伴随着国家对污泥处置及资源化管理要求提高,如何降低污泥含水率、减少污泥体积成为重点问题,实现污泥深度脱水是有效解决此问题的途径之一.传统的污泥处理技术存在脱水极限,对干燥设备的性能要求也随着含水率降低而提高,找到一种低能耗、高效率的深度脱水方法成为当下急需解决的问题.借鉴国外在物料深度脱水的理论与应用,在我国现阶段高压板框深度脱水技术与热压干化技术的基础上,提出污泥真空压滤联合过热蒸汽高效脱水技术.该技术能在同一设备上完成机械压力过滤与热力干燥脱水,更加节能、高效、环保.
