目的 探讨α-亚麻酸植物甾醇酯(PS-ALA)对油酸和胆固醇(OA/Cho)联合诱导的肝细胞焦亡的改善作用,并基于SIRT1 信号分子进一步探索潜在的分子机制.方法 采用OA/Cho联合诱导HepG2 细胞焦亡,同时给予PS-ALA、PS、ALA干预.油红O染色观察细胞脂质沉积;Hoechst33342/PI双染评价焦亡发生情况;蛋白免疫印迹检测细胞焦亡信号通路关键蛋白NLRP3、Caspase-1 p20、GSDMD-N的表达水平;免疫荧光染色检测NLRP3 的表达水平;免疫荧光双标记进行SIRT1 和NLRP3 以及SIRT1 和GSDMD-N共定位.结果 与正常对照组相比,OA/Cho组细胞内有大量脂滴沉积,并且发生明显的细胞焦亡,细胞焦亡信号通路关键蛋白NLRP3、Caspase-1 p20 和GSDMD-N的表达水平显著增加,PS-ALA 干预后显著改善 OA/Cho 诱导的细胞内脂质沉积,并有效抑制细胞焦亡.进一步的分子机制研究发现PS-ALA显著上调SIRT1 的表达水平并同时降低NLRP3 和GSDMD-N的表达水平.结论 PS-ALA能有效抑制OA/Cho诱导的HepG2 细胞焦亡,其分子机制可能与激活SIRT1 信号分子有关.
目的 探讨瓜氨酸(L-citrulline,L-Cit)改善糖尿病肾病小鼠肾损伤和骨骼肌萎缩的作用以及分子机制.方法 雄性C57BL/6J小鼠采用高脂饲料喂养+腹腔注射STZ法构建糖尿病肾病模型,小鼠随机分为 3组:对照组(NC),模型组(DN)和瓜氨酸补充组(DN+L-Cit),每组 10 只,瓜氨酸补充组每天给予瓜氨酸灌胃 50 mg/(kg·d),持续4 w.14 w后进行网格实验和疲劳转棒实验测定小鼠握力和体能;取血浆测定氨基酸谱;取血清和肾脏组织测定小鼠血肌酐、尿素氮、尿微量白蛋白肌酐比(urinary microalbumin to creatinine ratio,ACR)、肾脏指数等肾功能指标;取腓肠肌组织测定腓肠肌湿重、腓肠肌结构等肌肉功能相关指标,qPCR 检测肌肉萎缩相关基因 MYOG、MURF-1 和 BAX等的表达.结果 与NC组相比,DN组氨基酸谱发生显著改变,血浆、肾脏和腓肠肌中精氨酸含量显著降低(P＜0.05),肾脏发生纤维化病变,血肌酐、ACR显著增高(P＜0.05),肾脏促纤维化因子TGFβ1、肾脏精氨酸酶 2 表达显著升高(P＜0.05),握力和体能显著降低(P＜0.05),腓肠肌湿重降低(P＜0.05),腓肠肌肌肉萎缩相关基因MYOG、MURF-1和BAX的表达显著改变(P＜0.05),腓肠肌nNOS表达、NO含量、PGC-1α表达显著改变(P＜0.05),肾脏和腓肠肌TNFα和IL-1β表达显著升高(P＜0.05);与DN相比,DN+L-Cit组血浆、肾脏和腓肠肌精氨酸含量显著升高(P＜0.05),肾功能显著恢复,握力和体能显著升高(P＜0.05),肌萎缩得到了改善,肌肉功能显著增强,血浆、肾脏和腓肠肌TNFα和IL-1β的表达显著降低(P＜0.05).结论 瓜氨酸可能通过调节机体精氨酸含量,改善糖尿病肾病小鼠肾损伤和骨骼肌萎缩病变.[营养学报,2023,45(5):441-447]
目的 探讨姜黄素(curcumin)对递增负荷大强度运动大鼠肾脏的作用.方法 44 只 7w龄雄性 SD大鼠随机分为安静对照(C,n=12)、递增负荷大强度运动致肾脏损伤模型(M,n=16)和姜黄素干预(CM,n=16)3 组.C组不进行运动干预,其他组进行 6 w递增负荷跑台训练(起始:速度 10 m/min,时间 10 min,坡度 10°;终止:速度 40 m/min,时间 180 min,坡度 10°).每次训练前 1 h,CM组灌胃姜黄素溶液[200 mg/(kg·bw),5 ml/(kg·bw)],其他组灌胃等体积 0.5%羧甲基纤维素钠溶液.末次训练结束 24 h后处死大鼠,取血及肾脏.肾脏HE染色后观察组织形态,采用原位末端凋亡法检测肾脏细胞凋亡水平,酶联免疫吸附法、免疫组织化学法等方法检测相关生化指标,包括:血清肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氮(blood urea nitrogen,BUN),肾脏肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)、白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、白细胞介素-18(interleukin-18,IL-18)及沉默信息调节因子 1(sirtuin 1,SIRT1)、核因子-κB p65(nuclear factor-kappa B p65,NF-κB p65)、乙酰化核因子-κB p65(acetylated nuclear factor-kappa B p65,Ac-NF-κB p65)、B细胞淋巴瘤-2(B-cell lymphoma-2,Bcl-2)、Bcl-2 相关X蛋白(Bcl-2 associated X protein,Bax).结果 与C组相比,M组肾脏组织形态发生病理性改变,Scr、BUN水平极显著升高(P<0.01),肾脏SIRT1、Bcl-2 蛋白质表达水平及Bcl-2/Bax极显著降低(P<0.01),肾脏细胞凋亡、Bax、NF-κB p65、Ac-NF-κB p65蛋白质表达及炎症因子 TNF-α、IL-1β、IL-18 水平极显著升高(P<0.01);与 M 组相比,CM 组肾脏组织形态病理性改变明显改善,Scr、BUN水平极显著降低(P<0.01),肾脏SIRT1、Bcl-2 蛋白质表达水平及Bcl-2/Bax显著升高(P<0.05或P<0.01),肾脏细胞凋亡、Bax、NF-κB p65、Ac-NF-κB p65 蛋白质表达及炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18 水平显著降低(P<0.05 或P<0.01).结论 姜黄素能够调控SIRT1/NF-κB信号通路相关蛋白质表达,缓解炎症反应和细胞凋亡,保护大鼠肾脏结构和功能.[营养学报,2023,45(5):474-479]
2023年9月17日,为期3天的第十四届亚洲营养大会暨第十六届全国营养科学大会圆满落幕.会议围绕"可持续营养助力未来"的主题,深入交流学科前沿、探讨热点、凝聚共识、汇聚力量、助力营养未来可持续发展.
目的 探究鼠李糖乳杆菌(LGG)对小鼠酒精性肝损伤的保护作用及其对肠道菌群的影响.方法 6w 龄雄性 C57BL/6J 小鼠随机分为对照组(control),鼠李糖乳杆菌组(LGG)、酒精组(EOH)和酒精加鼠李糖乳杆菌补充组(EOH+LGG).对照组和LGG组喂养Lieber-DeCarli对照液体饲料,EOH组和EOH+LGG组喂养Lieber-DeCarli酒精液体饲料,同时予以鼠李糖乳杆菌灌胃,持续 16d.造模结束时,收集小鼠粪便.末次灌胃 9h后,取血清和肝脏组织.检测血清丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)活性;肝脏分别HE染色和油红O染色,观察组织病理学变化;采用实时荧光定量PCR实验(qRT-PCR)检测肝脏肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor α,TNF-α)、白细胞介素 6(interleukin 6,IL-6)和白细胞介素-1β(interleukin 1β,IL-1β)mRNA相对表达水平;采用 16S rDNA测序分析肠道菌群变化.结果 相对于EOH组,EOH+LGG组小鼠血清ALT、AST活性、TNF-α、IL-6 和 IL-1β mRNA表达水平显著下降,且炎性细胞和脂肪空泡明显减少.LGG在门水平上降低厚壁菌门(Firmicutes)和放线菌门(Actinobacteria)数量;在属水平上升高阿克曼菌属(Akkermansia)数量,降低欧鲁森氏菌属(Olsenella)数量,且梭菌科(Clostridiaceae)、Clostridium_sensu_stricto、消化链球菌科(Peptostreptococcaceae)和罗姆布茨菌(Romboutsia)相对丰度较高.结论 LGG可以改善小鼠酒精性肝损伤,该作用可能与调节肠道菌群,降低炎症反应有关.[营养学报,2023,45(5):487-495]
