为建立猪流行性腹泻病毒(PEDV)可视化反转录-环介导等温扩增(RT-LAMP)检测方法,本研究根据PEDV ORF1a/b基因的保守序列,设计了8组特异性引物,以PEDC cDNA为模板,采用试剂盒推荐的各反应条件经LAMP扩增,根据LAMP反应产物琼脂糖凝胶电泳结果筛选最佳引物组.以筛选的外引物PE2 F3/B3经PCR从PEDV cDNA中扩增ORF1a/b基因,构建重组质粒pPE-ORF1-2并分别经PCR和测序鉴定.结果显示,2号引物组(内引物PE2 FIP/PE2 BIP,外引物PE2 F3/PE2 B3)为最佳引物.PCR和测序鉴定结果表明重组质粒正确构建,经计算其浓度为1.56×1011拷贝/μL,将其稀释1 000倍后作为质粒标准品.为建立检测PEDV的RT-LAMP方法,本研究对该方法的反应时间、反应温度、Mg2+浓度、内、外引物及dNTP浓度进行了优化,结果显示,RT-LAMP反应体系为:60℃反应50 min,Mg2+浓度80 mmol/L,内外引物终浓度分别为32 μmol/L和5 μmol/L,dNTP浓度10 mmol/L;通过在上述体系中加入甲酚红指示剂,初步建立了可视化RT-LAMP检测方法.特异性试验结果显示,该方法仅能检出PEDV,与猪德尔塔冠状病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒和猪传染性胃肠炎病毒均无交叉反应,且阳性管体系颜色由紫红色变为黄色,阴性反应管体系颜色保持紫红色,特异性较强;将重组质粒标准品pPE-ORF1-2 10倍倍比稀释(1.65×100 拷贝/μL～1.65×108拷贝/μL)后作为模板,采用本研究建立的可视化RT-LAMP方法进行敏感性试验,结果显示,该方法对pPE-ORF1-2检测限为10拷贝/μL,比以重组质粒pPE-M-GB为模板,以引物PEGBF/PEGBR的PEDV国标RT-PCR方法的敏感性高1个数量级,敏感性较高;重复性试验结果显示,该方法对不同浓度质粒标准品的批内和批间重复性试验的变异系数均小于5%,重复性较好.对53份临床样品检测结果显示,RT-LAMP和RT-PCR对PEDV的检出率分别为32.1%(17/53)和28.3%(15/53).二者的总符合率为96.2%(51/53).本研究建立的PEDV RT-LAMP检测方法具有特异性强、敏感性高、重复性好、操作简便、结果可视化等优点,为PEDV的现场快速检测提供了新的技术支持.

基于环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)的微流控芯片是一种新型核酸检测方法.该方法能够将核酸提取、等温扩增和反应结果集成在厘米级的芯片上,具有灵敏度高、特异性强、不易污染等特点,并且可以实现"样品-答案"的快速检测,已成为当前检测领域的研究热点.综述LAMP的反应原理、微流控芯片的种类、LAMP微流控芯片在病原微生物和肿瘤检测中的应用,并分析LAMP微流控芯片目前存在的问题及未来发展前景,以进一步拓展对新型检测技术的认识,加快其在现场快速检测中的推广和应用.

为明确新乡市某猪场仔猪腹泻的病原菌及其耐药情况,本试验通过细菌鉴别培养基分离培养、革兰染色镜检、生化鉴定和16S rRNA测序,对采集的腹泻死亡仔猪肠道组织进行病原菌的分离、鉴定,并通过小鼠易感性试验对细菌致病性进行分析.同时,对致病菌进行药敏试验分析.结果显示,该分离菌在麦康凯培养基中菌落呈现粉红色,生化鉴定为大肠杆菌,并且对小鼠具有较强的致病能力;药物敏感性试验结果显示,该致病菌对氨曲南、阿米卡星、头孢吡肟、头孢噻肟、头孢西叮、头孢曲松和多黏菌素B敏感,对米诺环素、妥布霉素和头孢呋辛中度敏感,对其余24种药物(除头孢唑林为未确定外)均呈现不同程度的耐药性.结果表明,本试验所分离的病原菌为多重耐药大肠杆菌,具有较强的致病性和耐药性,对猪场存在较大威胁.本试验结果可为畜牧业生产临床用药以及大肠杆菌病的防控提供数据支持.

量子点具有独特的光学性质,近年已在材料科学、分析化学、生命科学、医学检验等学科领域得到广泛研究和应用.作为一种新型的荧光标记材料,量子点在兽医领域越来越受到重视.作者就量子点的特性、种类及其在兽医领域的研究做一综述,并提出了未来研究方向,为拓展量子点在动物疫病诊断、兽药研发、致病机制等方面的研究提供参考.

畜牧业作为农业和农村经济发展的支柱产业之一,不仅为百姓肉蛋奶"菜篮子"提供了重要品种,而且为推进乡村振兴农民增收致富贡献了重要力量.近年来,各级党委政府高度重视畜牧业发展工作,先后谋划并制定出台一系列促进畜牧业高质量发展意见,编制总体和专项规划,为畜牧业高质量发展提出了总纲领,指明了方向.

抗菌肽是体内器官被多种病原体感染后率先发挥作用的免疫途径之一.大多数抗菌肽表现出广谱的抗菌活性,最近的一些研究已经开始阐明抗菌肽的抗病毒特性、以及在抗菌肽在炎性反应中的调节作用和趋化作用,如抗菌肽LL-37、防御素、乳铁蛋白等.论文基于近年来有关抗菌肽抗病毒病原体的研究资料,重点阐述了不同类别的抗菌肽的功效和作用机制,提供了抗菌肽成为新型抗病毒药物的潜在应用和治疗策略,为抗菌肽成为对抗新出现的传染性病毒的潜在药物提供理论依据.

鹅星状病毒(goose astrovirus,GAstV)是引起当前雏鹅痛风疾病的主要病原体,其流行严重影响养鹅产业的健康发展.为研究鹅星状病毒在河南地区的流行情况,本研究于2018年从河南12个地市的养鹅场采集了36份雏鹅痛风样品,采用RT-PCR方法进行检测,并对12个地市代表毒株的ORF1b基因进行了序列测定、同源性分析和系统进化分析.研究结果表明,36份样品均为阳性,阳性率为100％;12个地市代表毒株的ORF1b序列长度均为1 551 bp,各自间的核苷酸同源性为98.7％～99.9％,与河南地区的XX、AstV/HN01/Goose/0103/18、AstV/HB01/Goose/0123/19、AstV/AH01/Goose/0512/18等代表毒株核苷酸同源性为97.9％～99.5％,与国内其他地区的GD、AstV/SDPY/Goose/1116/17、AAstV/Goose/CHN/2017/SD01等代表毒株核苷酸同源性为98.4％～99.7％;系统进化分析显示,12个地市代表毒株与河南及国内其他地区代表毒株,在进化关系上处于同一分支,属于禽星状病毒1群.本研究明确了河南地区鹅星状病毒的分子流行情况,并为鹅痛风病的防治提供了线索和思路.

为研究引起雏鹅痛风疫情的鹅星状病毒(Goose astrovirus,GAstV)河南流行株的基因组特征,从患有痛风的雏鹅样品中分离了1株GAstV,命名为XX株,并对分离毒株进行了全基因组测序和遗传特征分析.结果显示,GAstV XX株可在LMH细胞上稳定传代,但无明显的细胞病变;该毒株基因组全长7252 bp,与代表性毒株GD、AstV/SDPY/Goose/1116/17、AAstV/Goose/CHN/2017/SD01的基因组核苷酸序列同源性分别为98.1％、98.7％、98.7％.系统进化分析结果显示,GAstV XX株与GD、AstV/SDPY/Goose/1116/17、AAstV/Goose/CHN/2017/SD01等毒株处于同一进化分支,属于禽星状病毒1群.ORF2编码蛋白氨基酸序列分析结果显示,与已报道的GAstV流行毒株相比,GAstV XX株存在多个氨基酸位点的突变.

猪流行性腹泻病毒(porcine epidemic diarrhea virus,PEDV)对我国养猪业造成了持续性影响.为了弄清河南省新乡地区猪流行性腹泻的发病规律,对2018年1—12月期间采自新乡地区延津县、封丘县、原阳县、获嘉县、长垣县5个县55个猪场的351份病料进行了RT-PCR检测.结果表明:PEDV的猪场阳性率和样品阳性率分别为41.3％(19/55)和35.2％(125/351);其中以延津县的样品阳性率最高,为58.33％,封丘县最低,为23.6％;不同季节均有PED发病,冬季较高,阳性率为55.2％,春、秋季较低,阳性率分别为15.0％和32.9％;PEDV与传染性胃肠炎病毒(TGEV)、轮状病毒(RV)和圆环病毒2型(PCV2)存在不同程度的混合感染.研究结果为新乡地区PEDV的防控提供了参考.

为探讨奶牛隐性乳房炎对牛奶品质的影响,在一大型奶牛场中对其中40只奶牛在6个月所采集的220个样本按照乳汁体细胞分成4组,分别检测各组间乳成分的品质,获得各组乳成分的变化趋势.该试验是以乳汁中体细胞数多于每毫升500 000为标准,作为判定隐形乳房炎的依据.具体结果表明,在乳汁体细胞数不断增多的情况下,尤其是乳汁中体细胞数多于每毫升500 000时,乳蛋白比率、钠离子以及氯离子含量等都随体细胞的增多而不断的增加,乳汁、乳糖、镁离子以及钙离子含量却明显降低.

2018年我国首发非洲猪瘟,给生猪产业稳定发展造成的极大威胁,应对非洲猪瘟疫病防控工作,农业农村部再次修订印发 《生猪屠宰检疫规程》.本文通过对近3次规程修订变化内容进行梳理比较分析,以期对基层动物卫生监督人员和驻场官方兽医提供技术参考,更快更好助力非洲猪瘟综合防控工作.

狂犬病是由狂犬病病毒引起的一种急性致死性人畜共患病,在世界范围内流行,病死率高达100％.2016年全国报告人间狂犬病死亡人数连续多年位居法定传染病前三位,严重危害人民身体健康和公共卫生安全[1].狂犬病病毒对所有温血动物均易感,野生动物是主要传染来源[2],伴侣动物——家犬在人畜狂犬病传播中起重要的桥梁作用[3].因此,评估了解家犬狂犬病免疫抗体水平,对于防控狂犬病具有重要意义[4].但因狂犬病不属于重大动物疫病强制免疫范畴,养犬者免疫意识参差不齐,关于畜间狂犬病免疫抗体内容的报道也较少.为此,研究以辖区内经陆路外出调运的家犬为调查对象,对2014-2016年间调运犬只的狂犬病抗体水平进行测定分析,旨在为狂犬病免疫和防控工作提供建议.

非洲猪瘟主要通过感染非洲猪瘟病毒的家猪、野猪和软蜱直接传播,或通过感染动物污染物进行间接传播.由于国内生鲜食品消费观念,家猪长期在国内频繁调运,疫病的传播扩散风险极大.作为调运交易的重要环节——屠宰场,对上它不是发病源头,对下它一旦流入市场,扩散范围和风险很大,因此屠宰环节如何监测防控非洲猪瘟具有重要意义.该文侧重对屠宰环节非洲猪瘟防控风险进行探析,以期促进非洲猪瘟防控工作.

为了建立重金属汞离子(Hg2+)免疫学检测方法,试验采用异硫氰酯法将双功能螯合剂ITCBE与Hg2+螯合形成半抗原,然后将其与牛血清白蛋白(BSA)和卵清蛋白(0VA)耦联合成人工免疫原Hg2+-ITCBE-BSA和包被原Hg2+-ITCBE-OVA,用紫外扫描分析(UV)、电感耦合等离子体质谱法(ICP-MS)和凝胶电泳(SDS-PAGE)进行鉴定;用Hg2+-ITCBE-BSA免疫Balb/c小鼠,间接ELISA法测定多克隆抗体(pAb)效价,阻断ELISA法鉴定其敏感性,交叉反应试验鉴定其特异性.结果表明:免疫原Hg2+-ITCBE-BSA和包被原Hg2+-ITCBE-OVA制备成功,Hg2+-ITCBE-BSA中BSA和Hg2+的含量分别为9.09 g/L和45.88 mg/L;间接ELISA法检测效价达到1∶1.024×105,阻断ELISA法检测Hg-EDTA的IC50为45.49 g/L.说明Hg2人工免疫原制备成功.

随着汞的广泛使用,其对环境的污染越来越严重,通过食物链进行循环富集作用,对人类健康构成威胁.文章简述汞在不同形态下对动物和人的危害机理,分析重金属汞的污染来源和残留情况,分析目前国内外对动物性食品的重金属汞限量标准,并对汞的检测现状和发展趋势进行展望分析.

畜牧业在我国国民经济中占有极其重要的地位,每年为人民生活提供了肉、蛋、禽、奶等必需消费品.然而,近年来畜牧业的发展并非一帆风顺,"高投入、高成本、高风险"三高的畜牧业特点淋漓尽现.基于此,探究当前畜牧业的发展现状及今后的发展对策.

今年入夏以来，我国多地发生洪涝灾害，洪水将土壤中各类病毒、细菌、寄生虫、真菌等病原体冲刷出来，极易发生自然疫源性疫病。同时，为避开洪水养殖场户对动物进行驱赶动物转移，或者因无法转移而将动物滞留在洪水中导致死亡。这不仅给人们造成严重的经济损失和公共卫生安全，而且极易造成动物疫病流行，当前气温较高，细菌繁殖加快，苍蝇、蚊子滋生，地表粪污、病死动物等污染严重，畜禽间容易发生多种动物传染病和寄生虫病。特别是大量动物因灾死亡，动物尸体腐烂，容易造成多种动物疫病的发生和流行。为保证灾情之后无大疫，消灭环境中病原体，切断传播途径，预防和控制传染病流行，保障人畜健康，必须进行兽医卫生大消毒。

今年入夏以来,新乡地区发生特大暴雨,雨量突破历史极值,部分县区遭受洪水袭击,发生严重内涝.洪涝灾害不仅给人们造成严重的经济损失和公共卫生安全,而且极易造成动物疫病流行,由于洪水的缘故,一些多年不发生或很少发生的疫病,一些在正常年份不会发生的疫病,将有可能发生.水灾过后,受灾地区养殖场户要特别注意自身场户的动物疫病预防工作,强化消毒措施,减少动物疫病发生风险,降低水灾造成的经济损失,共同维护公共卫生安全.

霉菌毒素广泛存在于饲料中,每年全球大约会有25%的谷物不同程度受到霉菌毒素污染,本文主要对饲料霉菌毒素来源、污染现状和综合预防措施等方面进行介绍,提出有效预防饲料霉菌毒素的综合防制措施,以期减少或降低霉菌毒素对养殖业的危害.

寄生虫病是奶牛常见病之一,它不仅降低养牛的经济效益,而且可能降低牛奶的品质,由于奶牛寄生虫病的病程慢,症状不明显,往往不能引起畜场主的足够重视.寄生虫病的传播性广,传播途径多,奶牛寄生虫病的潜在危害严重,目前,我国大多数奶牛场的寄生虫病防治工作,由于诊断监测技术等原因,仍然是采用传统的"定期驱虫",这种方法不是根据奶牛体内的寄生虫情况来进行的,因而带有很大的盲目性.据统计仅寄生于牛、马、羊、猪、犬、鸡、鸭、鹅等畜禽的常规寄生虫种类达2169种,有些寄生虫病在我国流行还相当严重,其中不少为人畜共患病.这些寄生虫病不仅严重影响动物正常生长,造成我国畜牧业经济损失,而且严重威胁和危害人类生命与健康.