The widespread misuse of doxycycline hydrochloride (Dox) in livestock farming has necessitated the development of rapid and reliable methods for monitoring its residues in food products. Herein, a water-stable europium coordination polymer-Eu(C2O4)1.5(H2O)ₙ (Eu-CP) with a layered structure was synthesized via a one-step hydrothermal approach. Leveraging its dual-emission properties (455 nm ligand-centered blue emission and 615 nm Eu(III)-based red emission), we engineered a ratiometric fluorescence sensor (I₆₁₅/I₄₅₅) for Dox detection. The sensing mechanism involves synergistic effects of the antenna effect and Dox@Eu-CP complexation, enabling selective Dox recognition with a wide linear range (10–100 μM) and a low detection limit (0.46 μM, S/N = 3). To facilitate onsite analysis, a smartphone-integrated platform was developed, translating the Dox concentration-dependent color transition (blue → red) into quantifiable R/G values via a custom Android application. Practical applicability was demonstrated in milk samples, achieving recoveries of 82.4–119.4

More and more attention has been paid to food safety. Due to the overuse and misuse of antibiotics, the problem of antibiotic residues in animal food is one of the important challenges to ensure food safety. The development of a feasible strategy to detect antibiotic residues in animal food has become desirable. In this paper, we creatively synthesize a water-stable fluorescence sensing material, namely, Co(II)-Coordination polymer [Co2(CA) (L)0.5 (H2O)3] n (L = 1,4-bis(imidazole-1-ylmethyl) benzene, CA= Citric acid). The single crystal X-ray diffraction shows that it crystallizes in tetragonal space group I-4. It is worth mentioning that there exists the rare Co4(mu 3-O)4 cubane cluster structure and Co8 cluster units. Those adjacent Co8 cluster units are connected into an infinite two-dimensional net structure by four flexible bridged L ligands. Finally, the Co(II)-Coordination polymer (CP) further develops into the three-dimensional supramolecular structure via the hydrogen bonds of O-H & ctdot;O and C-H & ctdot;O. It could selectively detect the antibiotic-nitrofurantoin (NFT) residue by way of fluorescence quenching, Co-CP for the detection of NFT shows broad linearity from 0 to 200 mu M, with a detection limit of 0.13 mu M and strong anti-interference ability. It is used to detect the NFT residual of tap water and milk with a spiked recovery of 86.35-112.47 %.

In this paper, we have successfully obtained two novel compounds, namely, the Cd-based compound [Cd0.5L0.5(BA)(H2O)] n 1 (L = 1,4-bis(imidazole-1-ylmethyl) benzene; BA = benzoic acid) and the Co -based compound [Co1.5L1.5(OX)1.5] n 2 (H2OX = Oxalic acid) by using the hydrothermal methods. The Cd ion in 1 and the Co ion in 2 have the same coordination number. However, due to the different second ligands, namely benzoic acid in 1 and oxalic acid in 2, 1 is the 1D chain structure and 2 is the 2D layer structure, thus the second ligand also plays an important role in the structure of compound. Two CPs can be used as multifunctional luminescent probes to detect the enrofloxacin and ciprofloxacin with high selectivity and sensitivity.

为探究不同剂型胸腺五肽(TP-5)制剂对奶牛隐性乳房炎的治疗效果,试验在杭州某牧场中选取患隐性乳房炎的奶牛30头,随机分为3组,每组10头,分别在乳房上淋巴结注射TP-5缓释剂(含4mg TP-5)、TP-5水针剂(含4mg TP-5)以及生理盐水各2mL;于治疗前1天和治疗后的第4、7、14和21天,无菌采集试验乳区奶样,利用体细胞计数仪测定奶样中体细胞的数量,利用实验室病原菌分离鉴定技术检测感染细菌种类、利用试剂盒检测NAGase活性、白细胞介素2(IL-2)和干扰素γ(IFN-γ)含量等奶样的主要指标来探究不同剂型胸腺五肽(TP-5)制剂对奶牛隐性乳房炎的治疗效果.结果显示,TP-5能够减少感染的乳腺数量,降低牛奶中体细胞数、NAGase活性,并提高IL-2和IFN-γ的表达水平.相比于水针剂,缓释剂的治疗效果更好.因此,TP-5缓释剂对于治疗奶牛隐性乳房炎具有较大的应用价值.

根据猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒保守基因序列设计引物和探针,通过优化反应体系,建立了猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒双重荧光定量PCR检测方法,评估了该方法的特异性、敏感性及重复性.结果显示,该方法能特异性扩增猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒核酸,与猪圆环病毒2型、猪瘟病毒、猪流行性腹泻病毒、日本脑炎病毒、猪圆环病毒1型、猪细小病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒及猪博卡病毒无交叉反应.猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒的最低检测限均为10copies/μL;批内和批间重复性试验的变异系数均小于3％.用建立的双重荧光定量PCR方法对87份猪组织样品进行检测,结果显示,猪伪狂犬病病毒和猪圆环病毒3型的阳性率分别为17.24％和24.14％.上述结果表明,本研究建立的双重荧光定量PCR方法具有特异、敏感、稳定和快速的优点,可用于猪圆环病毒3型和猪伪狂犬病病毒鉴别诊断和流行病学调查.

在"人病兽防、关口前移"的大背景下[1],动物疫病预防控制机构作用愈发凸显.兽医系统实验室作为动物疫病预防控制机构的重要组成部分,承担着重大动物疫病(包括人兽共患病)的监测、检测、诊断、流行病学调查、风险评估和疫情信息的收集、汇总、分析、上报等技术性工作[2],在动物疫病的预防和控制方面具有举足轻重的作用.兽医实验室的建立是有效维护动物健康、保持畜牧业经济收益的重要建设,同时对动物疫病进行实验室监测是遏制动物疫病传播的有效方式[3].

Two new coordination polymers, namely, [Zn(Bix)Cl2]n (1) and [Cu(Bix)0.5(o-phen)Cl2]n (2) (Bix = 1,4-bis (imidazole-1-methyl)-benzene and/; o-phen = o-phenanthroline), have been prepared by the hydrothermal method and characterized by the X-ray single crystal diffraction, element analysis, FTIR spectra and UV-vis spectra. Owing to the coordination of Cl ion in the mineralizer-NaCl, coordination polymer 1 only links into the 1D chain by the main ligand-Bix. However, coordination polymer 2 shows the binuclear oligomer not only the coordination of Cl ion but also the coordination of the auxiliary ligand-o-phen. UV-vis aborption spectra ex-periments of 1 and 2 demonstrate that 1 and 2 are the potential ultraviolet photo-catalytic materials. In order to research the photo-catalytic activities of 1 and 2, we choose the methylene blue(MB) as the object pollutants, 1 and 2 attained highly catalytic efficiency.

为了解浙江省猪圆环病毒2型(PCV2)基因型和遗传变异情况,本试验对2021年采自浙江省不同地区的27份PCV2阳性病料进行PCV2全基因组扩增、克隆和测序,并将其全基因组、ORF2基因核苷酸序列及其推导的Cap蛋白氨基酸序列与不同国家和地区的流行株进行遗传变异分析.结果显示,27株PCV2流行株之间全基因组和ORF2基因核苷酸序列同源性分别为91.0％～99.9％和81.7％～99.9％,与不同国家和地区的PCV2参考株之间全基因组和ORF2基因核苷酸序列同源性为90.7％～99.9％和81.8％～100％.遗传进化树分析显示,27株PCV2流行株分别处于4个分支,其中8株为PCV2a基因型,6株为PCV2b基因型,12株为PCV2d基因型,1株为PCV2e基因型.27株PCV2流行株Cap蛋白的糖基化位点和核定位信号区氨基酸序列呈高度保守,B细胞抗原表位和T细胞抗原表位存在多个氨基酸突变.结果表明,浙江省多种基因型PCV2共存,以PCV2d基因型流行为主.本试验结果对于了解浙江省PCV2流行毒株的基因型和变异状况具有重要的意义.

液体消毒剂消毒效果的生物学检测及评价通常需加入已知量的生物指示剂如细菌、真菌和病毒抗原等,并通过测定消毒剂在使用浓度下作用一定时间后的杀灭率来判定其消毒效果.这种方法须在严格的实验室环境控制条件下进行才能获得较理想的结果.而在屠宰场这种开放的环境下,对其进行现场消毒效果测定和评价方法尚未见报导.本文试图通过对屠宰场日常消毒工作中,对特定位点消毒前与消毒后细菌总数的测定,直观分析其消毒效果,在屠宰场消毒效果评价方法学上是一次新的尝试.

为了解 2022 年浙江省猪繁殖与呼吸综合征病毒(porcine reproductive and respiratory syndrome virus,PRRSV)流行毒株的基因型及变异情况,采用RT-PCR方法,对浙江省不同地区收集的 37 份PRRSV阳性病料组织进行ORF5 基因扩增,应用DNAstar和Mega 7 软件进行同源性和遗传变异分析.结果显示:37 份阳性样品的ORF5 基因核苷酸和编码氨基酸之间的同源性分别为 82.1%～100%和 81.1%～100%;阳性样品的ORF5基因与高致病性PRRSV毒株JXA1、经典PRRSV毒株VR2332、国内早期PRRSV毒株CH1-a、NADC30 类毒株、NADC34 类毒株和新型PRRSV毒株QYYZ的核苷酸同源性分别为 84.1%～98.7%、83.9%～99.7%、85.2%～95.0%、85.3%～94.0%、86.4%～96.2%和 82.8%～85.1%,编码氨基酸同源性分别为 83.6%～99.5%、82.6%～99.0%、84.1%～93.5%、83.1%～94.5%、85.6%～95.5%和 81.1%～86.6%.37 份阳性样品的感染毒株均为美洲型,分属于1、5、8 等 3 个谱系,其中谱系1(NADC30 类和NADC34 类)占比最高(23/37),有 6 份阳性样品的感染毒株具有强毒株特性.与参考毒株相比,37份阳性样品的GP5蛋白氨基酸变异主要集中于信号肽、2 个高变区、B细胞抗原位点和 2 个T细胞抗原位点附近;与疫苗株相比,中和抗原表位存在氨基酸突变.结果表明:浙江省存在多个谱系美洲型PRRSV毒株流行,其中谱系1为优势流行毒株,部分毒株具有高致病性;不同毒株间存在一定的基因变异,与疫苗株相比流行毒株也出现了变异.因此,需要继续加强PRRSV监测,及时掌握PRRSV流行毒株的遗传变异状况,以便为PRRS防控提供参考.

为评估高致病性禽流感(HPAI)疫病风险和免疫水平情况,2021年3-5月在浙江省11个地市采集血清、家禽拭子和环境样本4123份,采用血凝抑制试验和荧光RT-PCR方法,检测和分析家禽HPAI强制免疫抗体水平和感染情况.结果显示:H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为91.70％,场点合格率为90.00％;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为90.42％,场点合格率为92.50％;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为91.30％,场点合格率为90.00％;家禽总体免疫抗体合格率均在90％以上.不同地区H5亚型(Re11)AIV免疫抗体样本合格率为85.00％～99.17％;H5亚型(Re12)AIV免疫抗体样本合格率为82.71％～94.38％;H7N9亚型(Re3)AIV免疫抗体样本合格率为70.79％～99.17％.不同场点AIV免疫抗体样本合格率为84.49％～97.00％,屠宰场和散养户的AIV免疫抗体样本合格率低于种禽场和规模场.鸡和鸭AIV免疫抗体样本合格率分别在92％和86％以上,鸡的免疫效果要优于鸭.全省未检出H5亚型和H7亚型HPAIV核酸阳性,但监测到其他亚型的低致病性禽流感病毒(LPAIV)的存在.对监测到的AIV阳性样本采用荧光RT-PCR方法进一步分析,103份A型流感样品中发现存在H2(22.33％)、H9(17.48％)、H10(15.53％)、H3(5.83％)和H6(1.94％)5种HA亚型,N3(57.28％)、N8(42.72％)、N2(9.71％)、N6(7.77％)、N9(2.91％)和N1(1.94％)6种NA亚型.103份样品来自12个场点,分别有33.33％和58.33％的场点(屠宰场和市场)检出2种以上HA和NA亚型.家禽流通和屠宰环节中存在不同亚型LPAIV混合感染情况.监测结果表明,HPAI防控措施效果良好,浙江省部分地区免疫效果稍低,但家禽免疫抗体总体水平达到农业农村部要求(70％)以上;浙江省未发现有HPAIV核酸阳性,HPAI疫情发生风险较低,但家禽和环境中存在多亚型LPAIV感染的现象.

为了解浙江省H9N2亚型禽流感病毒(AIV)血凝素(HA)和神经氨酸酶(NA)基因的分子特征和遗传变异情况,本试验对2012-2021年分离到的14株H9N2亚型AIV分离株进行HA和NA基因序列测定和分析.结果显示:14株分离株的H4和NA基因均属于Y280分支,HA核苷酸同源性为91.5％～99.4％,NA核苷酸同源性为89.0％～98.7％,其与疫苗株CK/SS/94、CK/F/98、CK/6/96和CK/1/00的HA核苷酸同源性为86.0％～91.1％.14株分离株HA蛋白裂解位点氨基酸组成均为RSSR ↓ GLF;受体结合位点主要表现为K141N、A142T、T155N、H183N和V190T突变,其中第226位和第228位全部为L和G,可与α-2,6唾液酸受体结合,具有感染人的特性;蛋白潜在糖基化位点均为6个,主要变异表现在第200～202位1个位点缺失和第295～297位1个位点增加;抗原相关位点主要表现为G82E、S137D、D145G、N159G、A160D、T192R和N193D突变,此外,有5株出现D160N突变.14株分离株NA蛋白存在6个潜在糖基化位点,其中1株发生N86H突变,缺失1个潜在糖基化位点;均出现第61～63位颈部氨基酸缺失.结果表明,浙江省H9N2亚型AIV流行毒株不断变异,与疫苗株存在抗原性差异,需加强病毒变异监控和新疫苗研发.

为了解浙江省禽白血病病毒(ALV)流行情况,本研究对2018-2020年浙江省定点监测场点开展ALV J亚群和A/B亚群抗体检测,共检测来自9个地市518个场次的19224份次鸡血清样品,通过对时间、群间、空间等情况分析,掌握当前浙江省禽白血病感染及分布情况.结果显示:浙江省ALV-J平均个体阳性率为11.63％,平均场次阳性率为61.78％,ALV-A/B平均个体阳性率为3.52％,平均场次阳性率为39.77％;不同群体、地市均有感染分布.监测结果分析表明,浙江省禽白血病存在一定范围的感染,种鸡场内相对可控但感染有上升,研究结果可为浙江省禽白血病防控、净化提供依据.

动物源细菌耐药性已引起广泛关注,全国正在逐步推进兽用抗菌药使用减量化行动.为更好地推动减量化行动的实施,浙江省在耐药性的评估及应用方面进行探索.研究分析了耐药性评估在减量化行动中的作用,建立了耐药系数评估模型与应用方法,研判了目前耐药性监测可能存在的问题,以期更好地推进兽用抗菌药使用减量化行动.

为评价两种(A、B)H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能,对50份疑似感染H7N9流感病毒的禽拭子样品进行H7N9流感病毒核酸检测,使用TG-ROC分析方法筛选荧光RT-PCR最适Ct值(阈值),通过2×2列联表分析两种试剂盒的敏感性和特异性,并用Kappa检验评估其一致性.结果显示:以国家禽流感参考实验室的鸡胚病毒分离鉴定结果为"金标准",A和B两种试剂盒的敏感性、特异性分别为90.9％(10/11)、56.4％(22/39)和54.5％(6/11)、94.9％(37/39);两种试剂盒检测结果差异较大,Kappa值为0.28.TG-ROC分析得出:A试剂盒的检测阳性最适阈值为33,对应的敏感性和特异性为90.91％和92.31％;B试剂盒的检测阳性最佳阈值为37,对应的敏感性和特异性分别为81.82％和87.18％.通过调整阈值,A试剂盒的敏感性和特异性均达到90％以上,B试剂盒均达到81％以上,Kappa值为0.85,检测结果一致.结果表明,虽然不同H7N9流感病毒荧光RT-PCR试剂盒的检测性能有差别,但通过调整阈值,可以达到检测所需的最适敏感性和特异性,从而增加临床检测结果的可靠性.本研究为H7N9流感病毒检测试剂盒的应用提供了指导.

近年来,布鲁氏菌病(以下简称"布病")疫情有反弹迹象,据农业农村部监测数据分析,今年一类地区牛、羊布病群体阳性率超过20％,个体阳性率在5％左右.浙江省作为布病防控二类地区,感染布病人数已超去年同期数量,防控形势十分严峻.湖州市作为浙江省羊主养殖区,通过强化监测力度、推进净化场创建等防控手段,连续多年将羊布病控制在较低水平,但是由于本地羊肉消费量增加,需从外地调入大量活羊和羊肉产品.

为了解浙江省猪群塞内卡病毒(Senecavirus A,SVA)流行情况,2017—2020年开展了SVA血清学和病原学检测.结果显示:2018—2020年浙江省猪群SVA抗体个体阳性率分别为21.86％、9.83％、12.79％,群体阳性率分别为83.00％、56.06％、70.89％,整体呈波动状变化趋势;屠宰场平均个体阳性率为18.35％,高于养殖场(14.86％),差异明显(P<0.01);浙南(19.13％)、浙北(17.01％)的平均个体阳性率显著高于其他区域(10.09％～12.25％).2017—2020年SVA核酸个体阳性率、群体阳性率总体呈下降趋势,分别由2017年的18.08％、33.80％下降至2020年的1.66％、3.81％;屠宰场屠宰猪群的SVA核酸个体阳性率(8.72％)高于养殖场和无害化处理场病死猪群(3.97％),差异显著(P<0.01);2018—2020年仅在浙南、浙北区域检出SVA核酸阳性.结果表明:浙江省猪群SVA感染有所控制,但流行范围依然较广,部分区域猪群SVA隐性感染较严重,需重视并持续加强猪群SVA感染监测.

随机抽取浙江省2家洗消中心,每家洗消中心随机抽检5辆运猪车辆,每个车辆采集检测车轮、挡泥板、车厢内壁、车厢外壁、驾驶室等7个部位,车辆表面消毒前后,用拭子样本测定其细菌总数,测算细菌杀灭率和消毒有效率.结果表明:洗消中心A消毒有效率为23.08％,洗消中心B消毒有效率为65.38％.

为了解兽用消毒剂对DNA病毒的灭活效果,本研究选择了猪伪狂犬病病毒为模式病毒开展消毒效果评估,指导消毒灭源工作.经对三种兽用消毒剂在不同浓度、不同作用时间和不同温度下对伪狂犬病病毒的杀灭效果进行实验室评价,结果显示,在20℃和37℃条件下,0.2％戊二醛癸甲溴铵溶液作用5 min,0.05％的碘酸混合溶液作用10 min和有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用20 min,均可完全灭活伪狂犬病病毒;在4℃条件下,0.2％戊二醛癸甲溴铵溶液作用30 min,有效氯为300 mg/L的二氯异氰尿酸钠溶液作用40 min仍不能完全灭活伪狂犬病病毒.表明按生产厂家说明书推荐的病毒类和疫源地消毒浓度,在常温下和高温环境下,碘酸混合液、戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠均可有效地灭活伪狂犬病病毒,灭活率均在99.99％以上;而低温状态下,戊二醛癸甲溴铵溶液和二氯异氰尿酸钠溶液的灭活效果有所下降,应予以重视,必要时需提高作用浓度.

对2018-2019年采自浙江省部分地区的30份猪伪狂犬病病毒阳性病料开展病毒分离鉴定,并进行分离毒株gD和gE基因克隆、测序和变异分析.结果显示,从30份样品中分离到11株猪伪狂犬病病毒;11个分离株之间的gD基因核苷酸及其推导氨基酸的同源性分别为99.3％～99.9％和98.0％～100.0％,gE基因核苷酸及其推导氨基酸的同源性分别为99.5％～99.9％和99.0％～99.8％;遗传进化分析显示,11株猪伪狂犬病病毒与我国2011年以后流行的毒株亲缘关系较近,与2011年前分离的国内毒株亲缘关系较远,与欧美毒株的亲缘关系更远;与疫苗株Bar-tha相比,11个分离株的gD和gE基因均存在碱基插入和点突变现象;gE基因推导氨基酸序列第48位均存在天冬氨酸的插入.本试验结果对于了解浙江省猪伪狂犬病病毒流行毒株的分子生物学特征和变异状况具有重要的意义.