功能微生物菌剂又称微生态制剂，最早是由美国的R.BPakrer于1974年提出来的，它是一种新型活菌制剂，是相伴抗生素的种种弊病而生的。无可置疑，抗生素的使用在畜禽防病、治病、改善生产性能方面发挥了巨大作用，给全球畜牧业带来了一定的经济效益。然而，抗生素长达40多年在畜禽饲养业上的大量连续使用，给畜牧业和人类带来了难以克服的弊端。首先，抗生素在消灭致病性菌的同时，也杀死了对动物机体有益的生理性细菌，破坏了肠道菌群平衡，造成原籍菌和过路菌（主要指条件性致病菌）过度繁殖，从而引起二重感染或内源性感染。更重要的是，抗生素在动物产品中的残留性和耐药性已危及人类健康。抗生素的残留可通过食品转移到人体，从而引起人类过敏、致畸、致癌。抗药性细菌会引起人的严重疾病。20世纪末，美国及西欧一些国家相继禁用或限用抗生素作为饲料添加剂，在这种情况下寻求一种无毒、无残留、无抗药性的饲料添加剂显得尤为必要，功能微生物菌剂的问世使实现这一要求成为可能。目前，欧美和东南亚的许多国家对微生物菌剂的应用日趋普及。我国对微生态制剂的研究始于20世纪70年代，但其真正临床应用相对还不够普遍。本文针对临床应用实际，对微生物菌剂运用于产蛋鸡的生产性能进行研究，从而探讨不同应用剂量的效果影响，以期为临床实践提供依据。

采集姜曲海猪精液，对其进行超低温冷冻保存，解冻后分别通过显微镜、扫描电镜和吖啶橙染色观察其形态、超微结构和DNA完整性，探讨冷冻保存对猪精子DNA完整性及形态结构的影响，同时探讨海藻糖和乳糖对冷冻精子的保护作用。结果表明，冷冻后精子形态正常率（海藻糖组和乳糖组分别为74．7％、67．6％）及DNA完整率（海藻糖组和乳糖组分别为66．4％和63．2％）均显著低于新鲜精子（95．5％和94．7％），且冷冻组间也存在显著差异（P＜0．05）；冷冻造成精子结构不同程度的损伤，主要表现为精子头颈部发生部分或全部断裂，颈部肿胀，顶体结构损伤。

为研究猪精子超低温保存前后差异酶蛋白表达,以期在蛋白质水平探索猪精子冷冻损伤机制,本研究采用双向电泳分离精子蛋白,硝酸银染色凝胶,ImageMaster 2D platinum 5.0软件分析差异蛋白质斑点并经MALDI Tof/Tof质谱鉴定.结果表明:冷冻前后精子存在53个差异蛋白点,在NCBInr蛋白数据库中搜索到有意义的差异酶蛋白6种:类组氨酸磷酸酶14(like-PHP14)、烯醇酶(ENO)、二氢硫辛酸脱氢酶(PDC3)、谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、鸟苷酸环化酶受体和RNA聚合酶Ⅱ相关蛋白1,前4种冷冻-解冻后下调,后2种在冷冻-解冻精子中未检测到.说明冷冻前后猪精子存在差异酶蛋白质,为进一步研究猪精子蛋白质组学及揭示精子冷冻损伤机制提供了依据.

为了探索猪精液质量评价方法的相关性,对猪精子分别进行活力、PI染色、低渗肿胀试验、Rh123染色、FITC-PNA染色检查,统计其与体外受精的相关性.结果显示,各指标间存在较强的线性相关性,以顶体完整率与体外受精率的相关程度最高.说明顶体完整率在预测体外受精率方面更优于其他指标.

以姜曲海猪精液为研究对象，分析冷冻-解冻后猪精子膜完整性及氧化应激水平，结果表明，新鲜精子经冷冻-解冻后，形态正常率、头部质膜完整率、尾部质膜完整率及SOD活性均显著降低，MDA含量显著升高。冷冻1组（未添加维生素C）与冷冻2组（添加维生素C）相比，前者精子形态正常率、头部质膜完整率、尾部质膜完整率及SOD活性分别为71．2％、57．2％、49．2％和85．3 IU/10-8，均显著低于后者，MDA含量则显著高于后者。冷冻-解冻造成了精子膜损伤，维生素C在一定程度上可有效提高精子的抗氧化能力，抵抗膜损伤。

To investigate the ultrastructural change of cryopreserved Tibetan mastiff sperm,the random samples of both fresh and freeze-thaw sperms were examined by scanning electron microscope (SEM) and transmission electron microscope(TEM).The results showed that freeze preservation caused damage of the sperm structure to some extent,mainly resulting in the sperm being partly or totally fractured between head and neck,disappearance of the plasma membrane,vesiculation of the outer acrosomal membrane,indistinct or disappearing or zigzag annular ditch,swelled neck,and fuzzy mitochondrial structure.

以姜曲海种公猪冷冻精液为研究对象,观察了使用2种不同解冻方法对精液品质及体外受精胚胎发育的影响.试验结果表明,冷冻精液从液氮取出后,使用37℃水浴30s解冻在精子运动度、质膜完整率、顶体完整率和体外受精胚胎发育率方面均显著优于在室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻(P＜0.05).而与新鲜精液体外受精卵裂率和4细胞胚胎发育率相比,37℃水浴30s解冻方法与对照组无显著差异(P＞0.05).表明37.C水浴30s解冻方法优于室温放置20s后迅速投入37℃水浴10s解冻方法.