为研究比较5种塞内卡病毒疫苗佐剂,分别用4种自主研发佐剂和进口ISA206佐剂配制塞内卡病毒灭活疫苗,检测疫苗的理化性质、安全性及免疫效力,并对检测结果进行对比分析.结果显示,进口ISA206佐剂疫苗黏度为43.02 cP,自主研发佐剂疫苗黏度均在27.88 cP以下,其他理化性质无差异;5批疫苗安全性试验均未见明显异常;5批疫苗免疫动物后均可诱导机体产生中和抗体,二免后14 d抗体滴度在211以上,4批自主研发佐剂疫苗免疫组抗体滴度水平高于进口ISA206佐剂疫苗约1个滴度,攻毒保护结果均在4/5以上,2批自主研发佐剂疫苗免疫组保护率可达5/5.结果表明,用4种自主研发佐剂制备的塞内卡病毒灭活疫苗质量不低于用进口ISA206佐剂制备的塞内卡病毒灭活疫苗.

为比较常见消毒方法对塞内卡病毒的杀灭作用,开展了不同浓度苯酚溶液、复方甲酚皂消毒液、柠檬酸溶液、NaOH溶液、百毒杀消毒液、新洁尔灭消毒液、84消毒液以及75％酒精和紫外线,与SVA作用10 min、30 min和60 min杀灭效果的研究.结果显示,5.0％的苯酚溶液作用10 min,0.5％以上的NaOH作用10 min,低于1:200浓度的84消毒液作用30 min、75％酒精作用60 min以及紫外线照射30 min以上,均可将SVA完全杀灭,而复方甲酚皂消毒液、柠檬酸溶液、百毒杀消毒液、新洁尔灭消毒液不能有效杀灭SVA.5.0％苯酚溶液、0.5％以上的NaOH溶液、1:200以下稀释的84消毒液、75％酒精及紫外线对SVA杀灭作用较强.

为研究免疫塞内卡病毒(SVA)灭活疫苗后豚鼠、家兔与猪血清中和抗体的相关性,分别用0.25、0.5、1.0、2.0 mL的SVA灭活疫苗接种豚鼠和家兔,同时以2.0 mL的SVA灭活疫苗接种猪,分别于免疫前以及免疫后第7天、第14天、第21天、第28天采血液,测定各动物血清中SVA中和抗体,利用Microsoft Excel软件对所得结果进行整理并分析豚鼠与猪血清SVA中和抗体、家兔与猪血清SVA中和抗体之间的线性关系,进一步采用IBM SPSS Statistics 19软件对线性关系的显著性进行分析.结果显示,豚鼠和家兔均可产生SVA中和抗体,且免疫剂量越大,免疫动物产生的SVA中和抗体滴度越高.猪免疫后产生了SVA中和抗体,监测期内随着时间的延长,SVA中和抗体水平逐渐升高.当家兔和豚鼠免疫剂量为1.0 mL时,二者产生的SVA中和抗体与猪SVA中和抗体呈正相关,相关性分别为0.990和0.998,相关性极显著.研究表明,采用1.0 mL的剂量免疫豚鼠或家兔,能间接反应SVA灭活疫苗在猪体的SVA中和抗体水平.

为了提高BPIV-3灭活疫苗产能及稳定性,初步探究了在MDBK悬浮细胞中的培养条件.将种毒按不同接种比例在MDBK-S悬浮细胞中,72h后收获病毒液,测定TCID50,探究最佳的病毒接种量;按2％的种毒接种在不同密度的悬浮细胞中,72h收获病毒液,通过测定TCID50,探究最佳的细胞密度;将2％的种毒接种在2.0×106cells/ml的悬浮细胞中,于接毒后不同时间收获病毒液,测定TCID50,探究最佳的收毒时间;在最佳培养条件的基础上,与贴壁毒TCID50做对比.结果表明,病毒接种比例为2％,MDBK悬浮细胞密度为2.0×106cells/ml,接毒后72h收获,病毒TCID50最高;悬浮细胞产毒能力比贴壁细胞高.