对SIEC贴壁细胞进行无血清全悬浮驯化.驯化的过程:选取SIEC贴壁细胞依次进行降血清贴壁培养、悬浮培养基筛选、传代驯化.驯化后的SIEC-S细胞分散好,大小均一,在CD PK15 259无血清悬浮培养基(建顺生物)中稳定增殖,活细胞密度可达到1.12×107 cells/mL.SIEC-S对猪流行性腹泻病毒(PEDV)敏感性高,接种PEDV后,病毒效价可达到107.75 TCID50/mL,适合PEDV病毒进行大规模生产.

为比较常见消毒方法对塞内卡病毒的杀灭作用,开展了不同浓度苯酚溶液、复方甲酚皂消毒液、柠檬酸溶液、NaOH溶液、百毒杀消毒液、新洁尔灭消毒液、84消毒液以及75％酒精和紫外线,与SVA作用10 min、30 min和60 min杀灭效果的研究.结果显示,5.0％的苯酚溶液作用10 min,0.5％以上的NaOH作用10 min,低于1:200浓度的84消毒液作用30 min、75％酒精作用60 min以及紫外线照射30 min以上,均可将SVA完全杀灭,而复方甲酚皂消毒液、柠檬酸溶液、百毒杀消毒液、新洁尔灭消毒液不能有效杀灭SVA.5.0％苯酚溶液、0.5％以上的NaOH溶液、1:200以下稀释的84消毒液、75％酒精及紫外线对SVA杀灭作用较强.

为研究免疫塞内卡病毒(SVA)灭活疫苗后豚鼠、家兔与猪血清中和抗体的相关性,分别用0.25、0.5、1.0、2.0 mL的SVA灭活疫苗接种豚鼠和家兔,同时以2.0 mL的SVA灭活疫苗接种猪,分别于免疫前以及免疫后第7天、第14天、第21天、第28天采血液,测定各动物血清中SVA中和抗体,利用Microsoft Excel软件对所得结果进行整理并分析豚鼠与猪血清SVA中和抗体、家兔与猪血清SVA中和抗体之间的线性关系,进一步采用IBM SPSS Statistics 19软件对线性关系的显著性进行分析.结果显示,豚鼠和家兔均可产生SVA中和抗体,且免疫剂量越大,免疫动物产生的SVA中和抗体滴度越高.猪免疫后产生了SVA中和抗体,监测期内随着时间的延长,SVA中和抗体水平逐渐升高.当家兔和豚鼠免疫剂量为1.0 mL时,二者产生的SVA中和抗体与猪SVA中和抗体呈正相关,相关性分别为0.990和0.998,相关性极显著.研究表明,采用1.0 mL的剂量免疫豚鼠或家兔,能间接反应SVA灭活疫苗在猪体的SVA中和抗体水平.