目的 建立以特征离子为目标的鉴别蛇胆汁的方法,并用于检查蛇胆川贝液.方法采用超高效液相色谱-四极杆-飞行时间质谱(UPLC-Q-TOF-MS)测定蛇胆汁和其他动物胆汁的质谱数据,并进行主成分分析(PCA),找出蛇胆汁的特征成分.再用高效液相色谱-串联质谱(HPLC-MS-MS)的多反应检测(MRM)定性和验证特征成分.针对蛇胆川贝液处方中的药材,制订供试品制备方法,并将蛇胆汁的MRM条件应用于蛇胆川贝液的检测中.结果 UPLC-Q-TOF-MS的液相方法条件为:甲醇(A)-10 mmol·L-1乙酸铵溶液(B),梯度洗脱(0～5 min,30％→50％A;5～20 min,50％→ 90％A;20～25 min,90％A;25～26 min,90％→30％A;26～30 min,30％A);质谱条件为:电喷雾电离源(ESI-),干燥气温度:220℃,干燥气流速8L·min-1,雾化气压力2bar,毛细管电压3500 V,喷嘴电压500 V,扫描范围50～1000,扫描频率1Hz.共找出两个蛇胆汁的专属性成分,分别为牛磺胆酸硫酸酯(SOTC)和牛磺去氧胆酸硫酸酯(SOTDC).建立了 SOTC和SOTDC的HPLC-MS-MSMRM方法,条件为:甲醇(A)-10mmol·L-1乙酸铵溶液(B),梯度洗脱(0～10 min,40％→50％A;10～25 min,50％→80％A;25～25.5 min,80％→40％A;25.5～30 min,40％A),质谱条件为:电喷雾电离源(ESI-),SOTC的离子对为594.2 → 514.3,594.2→ 124.0;SOTDC 为 578.2 → 498.3,578.2→124.0.将建立的方法应用于 41 批蛇胆川贝液制剂中,发现40批样品均含有蛇胆汁.结论 该方法可有效鉴别蛇胆汁和检查蛇胆川贝液中是否含蛇胆汁.

目的:建立消渴灵片中山麦冬的专属性检测方法.方法:样品经甲醇-氨水超声提取,利用高分离度快速液相色谱-三重串联四极杆质谱(RRLC-QQQ/MS)检测山麦冬.采用Thermo Accla imTM RSLC 120 C18色谱柱(2.1 mm × 100 mm,1.8μm),以乙腈(A)-20 mmol·L-1乙酸铵溶液(B)为流动相,梯度洗脱(0～20 min,5％A→90％A),流速0.2 mL·min-1,柱温30 ℃,进样量2μL.离子化模式为ESI+,选择m/z 723.4→251.2和m/z723.4 → 269.2作为山麦冬皂苷B 检测离子对,m/z 893.5→463.1 和m/z 893.5→481.2作为短葶山麦冬皂苷C检测离子对,进行多反应监测.结果:山麦冬皂苷B和短葶山麦冬皂苷C的检测下限分别为0.28μg·片-1和0.20μg·片-1.111批次消渴灵片中有8家企业的25批样品掺伪,其中6批次样品同时掺入湖北麦冬和短葶山麦冬,4批次样品为湖北麦冬掺伪,15批次样品为短葶山麦冬掺伪.结论:所建方法专属、准确、快速、简便,可为消渴灵片的专项治理提供有力的技术支持.

目的:建立13个厂家111批消渴灵片中黄连的6个生物碱、丹皮酚等多指标性成分含量测定方法,并结合主成分分析及聚类分析等化学计量学方法对其进行质量评价研究.方法:采用HPLC-UV法建立6个黄连生物碱类成分(非洲防己碱、表小檗碱、盐酸药根碱、盐酸黄连碱、盐酸巴马汀、盐酸小檗碱)、丹皮酚的含量测定方法及通过Chempatten化学计量学软件对不同生产企业的消渴灵片进行系统比较和评价.结果:建立消渴灵片的含量测定方法,测定了其中7个成分的含量,各个成分均能达到基线分离,进样量分别在6.05～249、9.29～226、5.94～195、11.0～283 ng、9.94～267、55.4～1 847、23.576～589.410 ng范围内与峰面积呈良好的线性关系,平均回收率分别为90.0％、84.8％、91.9％、90.3％、93.1％、93.0％、92.3％,符合方法验证要求.同时,化学计量统计体现了所建立的含量测定方法可以对不同生产企业生产的样品进行区分.结论:本实验所建立的多指标含量测定方法简单易行,准确性、稳定性和重复性良好,综合主成分分析和聚类分析,可为消渴灵片质量标准提供参考.

目的 建立肿节风配方颗粒(SHDG) HPLC指纹图谱及多指标成分定量分析方法,比较不同厂家及批次SHDG的质量差异,为SHDG的质量控制提供依据.方法 采用HPLC-UV法,以乙腈-0.2％甲酸水溶液为流动相,梯度洗脱,建立SHDG指纹图谱,并利用对照品和HPLC-Q/TOF法对其特征峰进行指认;同时建立绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸的含量测定方法.采用Chempattern化学计量学软件对结果进行处理分析.通过聚类分析和主成分分析,将不同厂家及相同厂家不同批次的制剂进行分类,并阐明造成差异的主要成分.结果 建立SHDG指纹图谱,确证了7个特征峰并进行了指认,分别是新绿原酸、绿原酸、隐绿原酸、咖啡酸、异嗪皮啶、迷迭香酸-4-O-β-D-葡萄糖苷、迷迭香酸.55 min内SHDG的主要色谱峰能够达到完全分离;绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸分别在各自范围内峰面积与质量浓度呈良好的线性关系;平均回收率分别为98.92％ (RSD 1.54％)、98.20％ (RSD 1.12％)、99.58％ (RSD 1.12％);18批样品绿原酸质量分数为0.33～1.39 mg/g,异嗪皮啶质量分数为1.31～2.74 mg/g,迷迭香酸质量分数为1.11～4.54 mg/g;18批样品与共有模式的相似度为0.688～0.992;不同厂家及批次的SHDG中绿原酸、异嗪皮啶、迷迭香酸含量存在较大的差异.结论 根据所建立的指纹图谱,结合3个主要成分含量测定能够为SHDG的质量控制提供更全面的参考.

Objective To establish a method for the content determination of liquiritin in Xiao'erjingfeng Powder,so as to control the quality of this product.Methods The content of liquiritin was detected by HPLC.The separation was carried out on a SSWAKOSIL C18 AR column(5 μm,4.6 mm×250 mm).The mobile phase was acetonitrile-methanol-0.1% phosphoric acid solution(20:5:75).The flow rate was 1.0 ml/min.The detection wavelength was set at 276 nm.The column temperature was 35℃ and the injection volume was 10 μl.Results The calibration curve showed good linearity in the range of 0.101 7～1.017 0 μg(r=0.999 95).The average recovery was 99.30%,with RSD 2.7%(n=6).Conclusion This method is simple,rapid,and accurate.It can be used as a quantitative analysis method for this preparation.