Из тропической актинии Heteractis crispa комбинацией методов жидкостной хроматографии выделено несколько новых изоформ актинопоринов с молекулярными массами от 18995.5 до 19398.7 Да, обладающих высокой гемолитической активностью. Показано, что в водных растворах актинопорины существуют в виде моно-, ди- и тримеров. Установлены нуклеотидные последовательности генов, кодирующих актинопорины, получены аминокислотные последовательности новых полипептидов, принадлежащих к семейству Hct-A актинопоринов. Новые актинопорины различаются величиной изоэлектрической точки, количеством и локализацией заряженных аминокислотных остатков в функционально значимом N-концевом фрагменте молекулы, а также зарядом тетрапептида (74-77 а.о.), который принимает участие в электростатическом взаимодействии с цитоплазматической мембраной. Получен рекомбинантный актинопорин rHct-A2 с молекулярной массой 19141 Да, pI 9.64 и величиной гемолитической активности 4.0 × 104 ГЕ/мг. Показано, что проводимость ионных каналов, формируемых rHct-A2 в БЛМ, аналогична проводимости нативного актинопорина из H. crispa. Полученные данные расширяют знания о структурно-функциональных взаимосвязях актинопоринов и вносят вклад в понимание механизма функционирования-этих молекул, что является основой для создания соединений с высоким биомедицинским потенциалом. В настоящее время их рассматривают как модели для получения противоопухолевых, антибактериальных и кардиостимулирующих агентов.

The interaction of inhibitor VJ (InhVJ), isolated from sea anemone R. macrodactylus, with different proteases was investigated. The following enzymes were tested: serine proteases (trypsin, alpha-chymotrypsin, plasmin, thrombin, kallikrein), cysteine protease (papain) and aspartic protease (pepsin). Inhibitor VJ interacted only with trypsin and 6-chymotrypsin. Kinetic and thermodynamics parameters of intermolecular complexes formation were determined: KD = 7,38 x 10(-8) M and 9,93 x 10(-7) M for pairs InhVJ/trypsin and InhVJ/alpha-chymotrypsin, respectively.

Two low-molecular cytolytic toxins (RmI and RmII) and four trypsin inhibitors were isolated from the aqueous extract of sea anemone Radianthus macrodactylus. The method of isolation involved precipitation with acetone, gel filtration on acrylex P-4, ion-exchange chromatography on CM-32 cellulose, affinity chromatography on trypsin-binding sepharose 4B, ion exchange chromatography on an Ultrapore TSK CM-3SW column, and reversed phase HPLC on a Silasorb C18 column. RmI, RmII, and JnI inhibitor displayed molecular masses 5100, 6100, and 7100 Da, respectively, when subjected to SDS-PAGE. The isoelectric points were 9.2 and 9.3 for RmI and RmII, respectively. The amino acid composition and N-terminal amino acid residue (glycine) were determined for RmI, RmII, and JnI. Both proteins were nontoxic to mice and crabs. Hemolytic activity was determined to be 25 and 20 HU/mg for RmI and RmII, respectively, and their action on erythrocyte membrane was not inhibited by exogenous sphingomyelin. RmI and RmII exhibited antihistamine activity.