The genus Laccaria (Hydnangiaceae, Agaricales) is an important ectomycorrhizal symbiont of a broad range of host plants. Laccaria guizhouensis was collected from a subtropical mixed forest dominated by Fagaceae in Southwest China and described based on morphological characteristics and molecular data. Laccaria guizhouensis is characterised by its medium-sized basidiocarps and strong striate or sulcatus, flesh-coloured to brown pileus, flesh-coloured to brown lamellae, 2- to 4-spored basidia, globose to obellipsoid, hyaline, moderately echinulate basidiospores, and 1-1.5 mu m-long echinulate. Phylogenetic analyses based on ITS sequences (HMAS352265 and HMAS352266) indicated that L. guizhouensis represented a new species separated from all other Laccaria species.

The 18 agronomic traits of 638 Gastrodia elata BI.f.elata were studied,and the coefficient of variation,correlation,factor and path analysis were carried out.The results showed that among the aboveground agronomic traits of Gastrodia elata BI.f.elata,there were high consistency and specificity in stem diameter,perianth tube length,perianth tube width,ovary length,fruit length and fruit width,and the direct positive effects of factor contribution rate and path analysis were also large;among the main agronomic traits in the underground part,the variation coefficient of longitudinal length,transverse length and ring number was small,and had a signif-icant correlation with the fresh weight of the single tuber,and the direct positive effect of factor contribution rate and path analysis was also large.The main agronomic traits mentioned above could be used as the key traits for quality control and variety breeding of Gastro-dia elata BI.f.elata from Dejiang.

利用ISSR分子标记对29个红托竹荪菌株进行遗传多样性分析.结果表明,利用TM值(溶解温度)差异对78条ISSR引物进行筛选,获得34条多态性丰富的引物,其片段大小为100～2000 bp;各种质间Nei's遗传距离(GD)值0.1312～0.9974之间,遗传相似性系数(GS)在0.4016～0.8770之间变化,聚类分析将29个红托竹荪菌株分为三类,Z 8(重庆市石柱县)与Z 10(四川省青川县)菌株间亲缘关系最近,Z 5(兴义市)和Z 2(织金县)菌株间亲缘关系最远,29个红托竹荪菌株具有较大的遗传差异性,遗传信息丰富.

以冬荪菌株"PD1710141"为试材,采用Plackett-Burman设计、最陡爬坡试验、Box-Benhnken设计响应面法研究了冬荪液体菌种培养基的优化,得到成本低、菌丝生物量高的冬荪液体菌种培养基配方,以期为工厂化大规模生产冬荪栽培种提供参考依据.结果表明:当摇瓶转速150 r·min-1、装液量150 mL时,冬荪液体菌种最佳配方为葡萄糖10 g·L-1、磷酸二氢钾1 g·L-1、蛋白胨2.5 g·L-1、硫酸镁0.8 g·L-1、马铃薯380 g·L-1、酵母粉1.5 g·L-1、维生素B1 0.03 mg·L-1,其冬荪菌丝鲜质量可达(4.300±0.038)g、为模型预测值的97％.综上可知,响应面法可应用于冬荪液体培养基配方及条件优化.

本研究以原生境中红托竹荪主要伴生植物竹子的根茎叶蔸作为培养基质,结合根、茎、叶、蔸中矿质元素和氨基酸含量分析,通过菌丝宏观形态评价,得到与红托竹荪菌丝生长相关的物质,并进一步采用单因素实验分别验证.结果表明,4种矿质元素(Ca、Mn、Zn和Fe)及6种氨基酸(天冬酰胺、天门冬氨酸、谷氨酸、丙氨酸、苏氨酸和丝氨酸)与红托竹荪菌丝生长速度和长势呈正相关;在基础培养基中四种矿质元素最适添加浓度分别为:Zn2+、20μmol/L,Fe3+、100μmol/L,Mn2+、100μmol/L,Ca2+、10 mmol/L;6种氨基酸的最适添加浓度分别为:D-丙氨酸为10 mg/L、DL-丝氨酸为10 m g/L、L-苏氨酸为100 m g/L、L-谷氨酸为100 m g/L、L-天门冬氨酸为1 m g/L和L-天冬酰胺为100 m g/L.

通过样线法普查毕节市威宁县观风海镇大型菌物资源,对大型真菌的种类进行评价,采用分子生物学和形态学鉴定采集到的大型真菌.结果表明,隶属于2门,3纲,9目,18科,35属,60种,优势属为红菇菌属、乳菇属、牛肝菌属、鹅膏属和蜡蘑属.从经济价值来看,当地大型真菌的开发有待于进一步发掘.

红托竹荪在栽培过程中会出现菌种退化问题,严重影响产量和质量.为避免红托竹荪优良性状的退化,以保存1年的红托竹荪菌株为材料,通过菌丝尖端分离复壮和利用竹蛋组织分离、子实体组织分离进行复壮.结果表明:尖端分离的菌丝体复壮效果最好,3株复壮菌株长势为生长浓密;生长速度为1.09～1.15 mm/d,复壮菌株生长速度明显高于保存1年的对照菌株(0.96 mm/d);萌发率、萌发时间、污染率分别为100％、24 h、0％,该方法可用于短期内的菌株复壮.红托竹荪竹蛋组织分离复壮时,菌托膜部位复壮效果较好,3个菌株全萌发;萌发时间均为24 h;菌丝生长速率较快(0.23～0.35 mm/d),且没有污染.红托竹荪子实体进行组织分离复壮时,也为菌托膜部位复壮效果较好,萌发率为80％～100％;污染率也较低,仅20％;萌发时间24 h;菌丝生长速度较快,为0.34～0.35 mm/d.

为雷山天麻品质控制和品种选育提供参考,对种植的132株雷山天麻箭麻花茎高度、花茎粗度、花被筒长度等11个地上部分农艺性状和天麻鲜重、纵长、横长等8个块茎部分农艺性状进行观察与测量,并进行变异系数、相关性、多元回归和因子分析.结果表明:雷山天麻地上部分花茎粗度(平均8.74 mm)、花被筒长度(平均10.77 mm)、花被筒宽度(平均7.34 mm)、子房长度(平均10.71 mm)、果实宽度(平均8.31 mm)、果实长宽比(平均3.01)的变异系数为4.36％～12.47％,变异较小,属于较为稳定的性状.块茎部分纵长(平均85.39 mm)、横长(平均62.31 mm)、环纹数(平均10.33个)和鹦哥嘴直径(平均14.32 mm)的变异系数为9.12％～12.31％,变异较小,是相对较为稳定的性状.雷山天麻单个块茎鲜重与块茎纵长(X1)、鹦哥嘴长度(X7)等7个农艺性状间的最优回归方程为Y=4.428X1-1.253X7(n=132,F=198.565);单个块茎鲜重与纵长、横长、环纹数、中间环纹间距、鹦哥嘴直径存在极显著正相关性;前3个因子特征值的累计贡献率达81.057％,因子1包括单个块茎鲜重、纵长、横长、中间环纹间距;因子2包括纵长、纵横比、环纹数;因子3包括鹰勾嘴直径、鹰勾嘴长度.雷山天麻可将块茎纵长作为高产品种选育的性状指标,可将环纹数作为品质控制的性状指标.

为保护、开发和利用贵州省大型真菌资源，采用踏查和走访调查法对贵州省册亨县和望谟县大型真菌资源进行调查，通过形态学和分子生物学方法对收集的大型真菌资源进行鉴定。研究结果显示，共采集353个样品，成功鉴定出134个种，隶属于2门13纲23目48科74属，其中子囊菌门有8纲12目12科13属15种，占总数的11.19%；担子菌门有5纲11目36科61属119种，占总数的88.81%；主要生长在针阔混交林中，占比44.19%；竹林中较少，占比0.57%。优势科有多孔菌科（Polyporaceae）、红菇科（Russulaceae）、牛肝菌科（Boletaceae）等9科，占总数的69.46%；优势属有乳菇属（Lactarius）、粉孢牛肝菌属（Tylopilus）、红菇属（Russula）等18属，占总数的66.88%；食药用菌占5.38%，食用菌占15.01%，毒菌占7.08%。研究结果为册亨县和望谟县食用菌产业品种选择和野生菌保护抚育奠定了基础。

贵州省黔东南州采用"室内发菌,林下出耳"的分段式模式林下栽培黑木耳,主要技术为室内控温控湿发菌,林下出耳包括林地选择及整理、菌棒制备与菌丝培养、菌棒排放、加湿增光催耳及杂菌和害虫的防治.

本研究将野外获得的一株炭角菌进行分离纯化和鉴定,并对其进行不同碳氮源条件下培养,探究该炭角菌在不同碳氮源条件下的生长情况.通过传统形态学和生物信息学鉴定得出该菌株为蕉孢炭角菌(Xylaria allantoidea).蕉孢炭角菌菌丝的最适碳源为果糖和麦芽糖,最适氮源为酵母粉.

为黄裙竹荪营养生理学特性研究和菌种选育提供理论依据,采用平板培养方法,以黄裙竹荪Dm-L1为供试菌株,比较果糖、甘露糖、乳糖、蔗糖、麦芽糖、可溶性淀粉、红糖、葡萄糖共8种碳源和草酸铵、尿素、硫酸铵、酵母浸粉、蛋白胨共5种氮源培养基上黄裙竹荪的菌丝生长速度和生长势表现,筛选出黄裙竹荪母种生长最适宜的碳源和氮源.结果表明:8种碳源中,可溶性淀粉培养基的黄裙竹荪菌丝生长速度最快,为0.898 mm/d,果糖和葡萄糖次之,分别为0.828 mm/d和0.802 mm/d;三者间在菌丝生长势上无明显差异,均表现为气生菌丝较为丰富、健壮、洁白、菌落完整且边缘整齐.5种氮源中,尿素培养基的黄裙竹荪菌丝生长速度最快,为2.540 mm/d,且生长势表现健壮、浓密;硫酸铵次之,菌丝生长速度为1.598 mm/d,生长势表现与尿素培养基相同.结合菌丝生长速度和生长势表明,可溶性淀粉和尿素分别是最适宜黄裙竹荪菌丝生长的碳源和氮源.

为探究冬荪液体深层培养不同时期代谢物动态变化及其关系,基于液体深层培养技术,超高效液相色谱-串联飞行时间质谱联用技术研究了不同发酵时间菌丝体分泌物差异情况.结果表明,534种差异代谢物隶属于有机酸及衍生物、有机氧化合物、苯丙素和聚酮类化合物等13个不同化学类别,有机酸类化合物占比为17.978％是发酵环境成酸性的主要原因.通过主成分分析和正交偏最小二乘判别分析,以FC＞1.5或FC＜0.67,P value＜0.05为条件筛选鉴定到大豆苷,大豆苷元,水苏糖,反式-4-羟基-L-脯氨酸,L-二氢月桂酸盐,UDP-GlcNAc等37种特征代谢物.KEGG通路分析表明,差异代谢物显著富集在ABC转运蛋白、cAMP信号通路、半乳糖代谢等86条代谢途径,推测了冬荪水苏糖等胞外多糖的合成路径,对鬼笔属真菌胞外多糖研究具有指导意义.不同发酵时间代谢物种类和数量远高于已研究报道的子实体和菌丝体化学成分,为今后深层研究冬荪活性成分提供理论参考.

基于贵州黔东南气候特征和羊肚菌生长所需要的光、温、水等环境条件,摸索总结出林下栽培羊肚菌技术.其技术要点包括:栽培品种、栽培季节和林型的选择,菌种和外源营养袋制备,林地整理,播种、养菌、出菇、转潮的管理,害虫和杂菌的防治等.

贵州省明确将食用菌、蔬菜、茶叶、生态家禽、中药材作为脱贫攻坚重点发展的5大产业.贵州省黔东南州又将食用菌、蔬菜、茶叶、花卉、三穗鸭、香猪、稻渔综合种养、蓝莓、中药材、油茶、烤烟和林下经济等作为脱贫攻坚的重点发展产业.大球盖菇作为一种草腐型食用菌,可利用农林废弃物,栽培技术要求不高,但产量高,同时是国际菇类交易市场主产品,也是国际粮农组织向发展中国家推荐栽培的特色品种[1-2].截至2019年10月,贵州省黔东南州栽培香菇(567.93 hm2)、大球盖菇(169.81 hm2)、平菇(142.53 hm2),位居前三,且大球盖菇大多数为冬闲田露地栽培.黔东南州冬闲田栽培的大球盖菇,其产量、品相和经济效益远远不及大棚栽培大球盖菇.笔者从2017—2019年,连续3年利用闲置大棚、蔬菜换茬大棚简易栽培大球盖菇,取得较高的产量和收益.

红托竹荪是贵州特色珍稀食用菌,本研究收集贵州省内主产区的野生和栽培资源,分离纯化获得了37个野生菌株和3个栽培菌株.在室内初筛、复筛的基础上,选出5个野生菌株和1个栽培菌株进行了栽培比较试验.通过菌丝长速、长势、拮抗以及农艺性状综合评价,最终筛选贵州适栽菌株2个,编号为YZS 020和YZS 048.

茶树菇(Agrocybe cylindracea)隶属于真菌门,担子菌亚门,伞菌目,粪锈伞科,田头菇属,主要分布于亚热带和温带地区,原产于我国福建省和江西省,是一种珍稀食(药)用菌[1-2].茶树菇富含多糖、蛋白质、维生素和多种矿质元素,是一种高蛋白、低脂肪、低盐、低热量的保健食品,具有抗癌、美容、止泻、健脾、利尿的功效,因而又有"中华神菇"之称[3-5].贵州省黔东南州是贵州省内的林业大州,具备发展林下食用菌自然优势.林下矮堆墙栽培茶树菇即菌袋叠放高度不超过30 cm,这样既能保证菌墙上端湿度,又可有效地利用林地.

为了调查红托竹荪资源分布特征,以织金县为调查对象,共设计了6条调查路线,对红托竹荪资源进行系统调研;并进行林分因子、土壤因子以及水平、垂直分布特征分析.结果表明,红托竹荪的寄主主要为多年生苦竹、金竹等竹林腐根;在营养丰富、土质疏松、保湿效果好的黑棕色沙土中分布较多;主要生长于海拔1 000 m～1 500 m,水平分布主要集中在织金的北部以及中南部,东南方向和西面分布较少.此次调查探明了红托竹荪生态习性与分布特征,为贵州红托竹荪这一特色优势资源的保护提供参考,为红托竹优良菌株的选育奠定基础.

通过对天麻染色体标本制备中染色体阻断剂、细胞壁解离剂、染色剂的筛选,以天麻柱头为材料,结合低渗法制备的染色体有丝分裂标本,可以制备出较好的有丝分裂期标本,观察到天麻染色体有丝分裂不同时期染色体结构变化,较好的呈现出天麻染色体及结构特征变化.

目的:探索天麻与蜜环菌共生时的分子调控机制.方法:以红天麻与蜜环菌共培养时不同形态的白麻作为研究材料,利用cDNA-SRAP技术分析红天麻在与蜜环菌共生前后的差异表达基因.结果:被侵染的白麻在转录水平获得53条特异的差异条带,未被侵染白麻为64条.从被侵染白麻的差异表达基因片段S-TDFs中选取稳定的31个片段进行TA克隆和序列比对分析,按照功能预测可分为7类,即能量与代谢、转录调控、细胞膜通透性、自交不亲和性、染色质重塑、抗性相关及未知功能基因.部分S-TDFs荧光定量(qPCR)结果也与cDNA-SRAP表达谱结果一致.结论:cDNA-SRAP技术适宜分析天麻与蜜环菌共培养时差异表达基因,可作为研究二者共生分子调控机制的前期有效手段;能量和代谢方面的S-TDFs在分子水平上验证了天麻的生活史离不开蜜环菌.