目的 探讨邻苯二甲酸单(2-乙基已基)酯(MEHP)对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)DNA甲基化水平和周期进程的影响.方法 体外培养TM-3 细胞,MEHP按照 0、200、400、800 μmol·L-1 共 4 个梯度进行分组,待其长到对数生长期,染毒 24h后处理细胞;采用Western blot 检测DNMT1、DNMT3B 两种甲基化转移酶(DN-MTs)和转录因子FOXO1 蛋白表达水平,流式细胞术检测细胞周期进程,RT-qPCR技术检测细胞周期蛋白依赖性激酶CDK2、细胞周期抑制因子P27 mRNA表达水平;给予TM-3 细胞不同浓度的甲基化抑制剂 5-氮杂脱氧胞苷(5-Aza-Cdr)溶液(0、10-4、10-3、10-2、10-1、10 μmol·L-1)处理,采用CCK-8 法检测细胞存活率,确定干预组染毒剂量;设置对照组(0 μmol·L-1)、400 μmol·L-1 MEHP染毒组、MEHP(400 μmol·L-1)+5-Aza-Cdr(10-4 μmol·L-1)干预组,采用CCK-8 法、Western blot、流式细胞术、RT-qPCR法检测各项实验指标.结果 Western blot结果显示,与 0 μmol·L-1 组相比,400、800 μmol·L-1 MEHP染毒组DNMT1 蛋白表达水平降低,DNMT3B蛋白表达水平升高(P均＜0.01);200、400、800 μmol·L-1 组FOXO1 蛋白表达水平均升高(P均＜0.01).流式细胞术结果显示,MEHP染毒导致细胞增殖受阻.RT-qPCR结果显示,与对照组相比,随着染毒剂量的增加,P27 mRNA表达水平升高,CDK2 mRNA表达水平降低(P均＜0.05);抑制剂干预后Western blot结果显示,与 400 μmol·L-1 MEHP染毒组相比,MEHP+5-Aza-Cdr干预组DNMT1、DNMT3B蛋白表达水平降低,FOXO1蛋白表达水平升高(P均＜0.05);RT-qPCR结果显示,与 400 μmol·L-1 MEHP染毒组相比,MEHP+5-Aza-Cdr干预组P27 mRNA表达水平上升(P＜0.05);流式细胞术结果显示,与对照组相比,400 μmol·L-1 MEHP染毒组、MEHP+5-Aza-Cdr干预组细胞均阻滞在G1 期(P均＜0.01).结论 MEHP影响TM-3细胞正常分裂与增殖,与DNMTs 相关蛋白表达水平改变、甲基化水平的异常修饰有关.

Abstract Background Diet is a modifiable risk factor for cardiovascular diseases (CVD), but there is still a lack of tools to assess dietary intakes of this high-risk population in Ningxia, China. Objective We aim to evaluate the validity and reliability of the semi-quantitative food frequency questionnaire (SFFQ) in the groups in Ningxia using a 24-hour dietary recall method. Method Two hundred five participants were included in the analysis. The two FFQs were 6 months apart, and during this time two 24-hour dietary recalls (24HDRs) were completed. Statistical methods were compared using inter-class correlation coefficient, unadjusted, energy-adjusted, de-attenuated correlation coefficient, quartile classification, weighted K values, and 95% limits of agreement (LOA). Results The inter-class correlation coefficients between FFQ1 and FFQ2 ranged from 0.25 to 0.73. The number of subjects classified as identical or adjacent was 72.2 to 85.9%. The crude correlation coefficient between FFQs and 24HDRs was 0.30 ~ 0.81, the energy-adjusted correlation coefficient was 0.16 ~ 0.83, and the de-attenuated correlation coefficient was 0.19 ~ 0.98. Weighted k statistics and Bland-Altman plots showed acceptable agreement between FFQs and 24HDRs. Conclusion The FFQ developed for the population at high risk of cardiovascular and cerebrovascular diseases in areas of Ningxia can be used to measure the dietary intake of nutrients and food groups reliably and validly.

目的 以体外培养的人肺腺癌A549细胞为靶细胞,探讨煤炭标准物质GBW11104对氧化应激指标、炎性细胞因子及非神经元型胆碱能系统关键分子乙酰胆碱酯酶(AChE)和乙酰胆碱受体的影响.方法 将A549细胞暴露于不同浓度的GBW11104,染毒时长为24 h,通过CCK-8实验测定细胞存活率.随后选择对细胞活力无影响的剂量进行暴露实验,暴露结束后(24 h)通过比色法测定超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)和丙二醛(malondialdehyde,MDA)的表达水平,通过酶联免疫吸附实验(ELISA)方法测定白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)的含量,使用改良Ellman方法测定细胞中的AChE活性,通过Real-time PCR法测定乙酰胆碱受体CHRNA9 mRNA的表达水平.结果 50、100、200μg·mL-1 GBW11104刺激细胞24 h后,对细胞存活率无影响(P均>0.05).与对照组相比,100μg·mL-1暴露组SOD活性降低了15.4％(P<0.05).暴露后各剂量组MDA水平差异均无统计学意义(P均>0.05).与对照组相比,100、200μg·mL-1暴露剂量下IL-6水平分别升高了74.5％和77.9％(P均<0.05).与对照组相比,100μg·mL-1暴露组AChE活性降低了12.2％(P<0.05).50、100、200μg·mL-1暴露剂量下细胞内CHRNA9 mRNA表达水平分别相当于对照组的231％、167％和71％(P均<0.05).结论 煤炭标准物质GBW11104暴露对人肺腺癌A549细胞有一定的毒性作用,具体表现为导致氧化应激及炎性反应,同时影响非神经元型胆碱能系统关键分子AChE及乙酰胆碱受体的水平.

随着经济发展与人口增长,水资源短缺及饮用水安全问题日渐凸显.生物慢滤技术是一种绿色水处理技术,具有高效、低耗、易于操作等特点.本文综述了生物慢滤的概念和原理,简要介绍了该技术在国内外的应用现状,梳理了当前生物慢滤研究中存在的一些难点问题,最后提出了今后研究的主要方向.

虚拟仿真实验教学是教育信息化背景下应运而生的一种新兴教学模式,对推动教学改革和提升教育质量具有积极意义.本文聚焦公共卫生与预防医学专业虚拟仿真实验教学项目建设这一问题,首先对建设现状做了描述性分析,进而对项目建设过程中存在的问题进行了梳理.基于问题,提出了有针对性的建议,以期为今后虚拟仿真实验教学项目的开发建设提供科学参考.

"金课"的提出给高等医学教育的发展带来了新的契机.预防医学作为高等医学教育的一个重要组成部分,其地位及重要性不断突显.《"健康中国2030"规划纲要》为公共卫生赋予了新的内涵,同时也为公共卫生事业的发展提供了新的机遇.虚拟仿真"金课"是五大"金课"中的"一份子",通过深度融合信息技术、智能技术与实验教学,可以有效破解高校实验、实习和实训中的难题.将虚拟仿真实验技术引入实践性较强的预防医学实验教学,对于创新实验教学模式和提高公共卫生与预防医学人才培养质量至关重要.

目的 通过3-甲基腺嘌呤(3-MA)干预,探讨邻苯二甲酸单丁酯(mono-butyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(mono-ethylhexyl phthalate,MEHP)联合染毒诱导小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)自噬与凋亡之间的关系.方法 取处于对数生长期TM-3细胞,设置MBP+MEHP(终浓度均分别为0、50、100、200、400、800 μmol/L)染毒组或者3-MA染毒组(终浓度分别为0、0.25、0.5、1、1.25、2.5、5 mmol/L);以及MBP+MEHP染毒组(终浓度均为400 μmol/L)、3-MA干预组[1 mmol/L 3-MA干预1h后,再加入MBP+MEHP(终浓度均为400 μmol/L)联合染毒液],培养24h,采用CCK-8法检测细胞存活率.采用MDC免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的诱导情况;采用Annexin V-FITC/PI法检测细胞早期凋亡率;采用Western blot法检测细胞自噬相关蛋白LC3、p62表达水平和凋亡相关蛋白Bax、Bcl-2的表达水平.结果 与对照组相比,50 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率升高,而100、200、400、800 μmol/L的MBP+MEHP染毒组TM-3细胞的存活率均下降,差异均有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP+MEHP染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,0.25、0.5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较高,而1.25、2.5、5 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率均较低,差异均有统计学意义(P＜0.05);;仅1 mmol/L 3-MA染毒组TM-3细胞的存活率.且随着3-MA染毒剂量的增高,TM-3细胞的存活率呈先上升后下降的趋势.TM-3细胞的存活率依次为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).免疫荧光结果显示,荧光信号强度依次为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组.TM-3细胞的早期凋亡率依次为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).自噬相关蛋白LC3Ⅱ/LC3Ⅰ表达水平为对照组＜3-MA干预组＜MBP+MEHP染毒组,p62蛋白表达水平为对照组＞3-MA干预组＞MBP+MEHP染毒组;凋亡相关蛋白Bax表达水平为对照组＜MBP+MEHP染毒组＜3-MA干预组,Bcl-2表达情况为对照组＞MBP+MEHP染毒组＞3-MA干预组,差异均有统计学意义(P＜0.05).结论 在本实验浓度下,MBP+MEHP染毒可提高TM-3细胞自噬和凋亡水平;3-MA抑制TM-3细胞自噬水平后,MBP+MEHP染毒提高细胞凋亡水平,说明自噬作为一种保护因素可抑制细胞凋亡.

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒对小鼠睾丸间质细胞的自噬的影响以及MBP+MEHP联合染毒的交互作用分析.方法 将处于对数生长期的TM-3细胞分别暴露于0(对照)和400 μmol/L的MBP、MEHP及400 μmol/L MBP+400 μmol/L MEHP溶液中;染毒24、36、48 h后,采取CCK-8法检测细胞的存活率;染毒24 h后,采用单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;染毒24 h后,采用Western blot法检测自噬标志蛋白LC3和p62的表达水平.结果 与对照组相比,MBP和(或)MEHP染毒TM-3细胞的存活率均下降,自噬囊泡的荧光信号强度均增高,LC3Ⅱ /LC3 Ⅰ蛋白表达水平升高,p62蛋白表达水平均降低,差异均有统计学意义(P＜0.01).MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞的存活率、自噬囊泡的荧光信号强度、LC3Ⅱ /LC3 Ⅰ和p62蛋白表达水平具有交互作用,具体均表现为拮抗作用(P＜0.01).结论 MBP和(或)MEHP体外染毒均可诱导TM-3细胞自噬水平升高,MBP和MEHP联合染毒交互作用表现为拮抗作用.

目的 以宁夏2所高校在校大学生为例,了解宁夏在校大学生对城市生活垃圾分类知晓和处理行为.方法 采用分层随机整群抽样方法,于2017年3-6月对宁夏2所高校707名在校大学生进行问卷调查.结果 有594名学生(84.0％)关注过垃圾分类,578名学生(81.8％)对垃圾分类方式都有了解,了解垃圾分类回收的益处与作用的学生共441名(62.4％);对自己学校垃圾处理方式了解的学生共441名(62.4％).不同年级在校大学生垃圾处理行为比较,差异有统计学意义(P＜0.05).不同专业在校大学生垃圾分类知晓、垃圾处理行为比较,医学专业的大学生优于非医学专业,差异均有统计学意义(均P＜0.05).结论 宁夏2所高校在校大学生对城市生活垃圾分类知晓和处理行为整体较好,应进一步提高在校大学生节约资源、充分利用可再生资源和保护环境的意识.

In order to explore the composition, sources and ecological risks of polycyclic aromatic hydrocarbons (PAHs) in water from Yinchuan wetlands, water samples were collected in the dry season and plentiful season from 15 wetlands. Sixteen species of PAHs were analyzed by gas-mass spectrometry, and source identification of PAHs was investigated by PCA and EPA positive matrix factorization 5.0. Ecological risk was assessed using the risk entropy method based on the neglected concentrations (NCs) and the maximum permissible concentrations (MPCs). The results showed that:① in the dry season, eight kinds of PAHs were detected, the concentrations of which ranged from 1455.38 ng·L-1to 2538.84 ng·L-1. In the plentiful season, 12 kinds of PAHs were detected, the concentrations of which ranged from 818.69 ng·L-1 to 1582.14 ng·L-1. The concentrations of PAHs in the dry season in Yinchuan were higher than that during the plentiful season. Compared with other domestic and overseas surface waters, PAH pollution was high; ② in the dry season, PAHs were mainly composed of 3-5 rings, and 2-3 and 4-6rings accounted for 35.6%-59.2% and 40.8%-59.7%, respectively. In the plentiful season, PAHs were mainly composed of 4-5 rings, and 2-3 and 4-6rings accounted for 10.2%-45.07% and 54.92%-89.76%, respectively; ③ the source analysis showed that in both the dry season and in the plentiful season, the main source were combustion and automobile emissions; ④ the ecological risk assessment indicated that the RQMPCs of BaA, BbF, InP, DBA, and BghiP during both the dry and plentiful seasons, and RQMPCs of Phe during the dry season, were higher than 1.0, indicating that attention needs to be paid to pollution levels. The RQNCs of Nap, Ace, Fla, Pyr, and BaP during the plentiful season and the RQNCs of Nap during the dry season were higher than 1.0, indicating the pollution risk was moderate and control and prevision of pollution from PAHs are required in the region.

目的 鉴定全氟辛烷磺酸钾(PFOS-K)诱导大鼠脑组织毒性响应蛋白的表达并分析其生物学功能.方法 将16只健康SPF级初断乳雄性SD大鼠随机分为为阴性对照(生理盐水)组和PFOS-K(10 mg/kg)染毒组,每组8只.采用经口灌胃方式进行染毒,染毒容量为10 ml/kg,每天1次,连续染毒30 d.低温提取脑组织全蛋白,利用双向电泳-质谱比较蛋白质组学技术进行分离和鉴定,然后对差异蛋白进行功能分析.结果 共鉴定到53个差异表达的蛋白,显著差异表达蛋白分子19个;经GO和Pathway分析,其主要功能是参与线粒体氧化呼吸电子传递链,参与的主要信号通路有阿尔兹海默疾病、亨廷顿舞蹈病、糖酵解、谷氨酰胺转换、Wnt信号通路、能量代谢、氧化应激及炎性介导的细胞因子信号转导等;PFOS-K促进胞质Glu升高,导致Ca2+稳态紊乱,下调神经营养和保护因子Eno-2表达.结论 PFOS-K可引起脑组织蛋白表达谱改变,可能通过抑制线粒体氧化呼吸电子传递链和Eno-2表达而产生脑组织毒性.

为了解银川市湖泊及城市河流沉积物中多环芳烃(PAHs)污染状况及生态风险,于2018年4～5月在银川市各湖泊及城市河流采集17个表层沉积物样品,采用气相色谱质谱(GC-MS)检测样品中PAHs含量.结果表明,银川市湖泊及城市河流表层沉积物中16种PAHs总含量范围为767.35～3961.53ng/g,平均值为2129.86ng/g,与国内外沉积物中PAHs污染状况相比,银川市湖泊及城市河流沉积物中PAHs污染处于较高水平.来源解析表明,银川市湖泊及城市河流沉积物中主要的污染来源为石油及煤炭等生物质的不完全燃烧.通过效应区间低中值法分析沉积物中PAHs的生态风险评价结果显示,部分采样点表层沉积物中菲的含量超过效应区间中值(ERM);沉积物质量标准法(SQSs)分析沉积物中PAHs生态风险结果表明,萘、苊检测含量在可能效应浓度值(PEL)与频繁效应浓度值(FEL)之间,菲的检测含量高于FEL;风险商值法分析显示苊烯、苊、菲、荧蒽风险熵值RQ>1.综合分析认为沉积物中多环芳烃的污染可能会造成一定程度的生态风险.

[目的]目前对于邻苯二甲酸酯的研究多集中于其原型,但有学者认为,邻苯二甲酸二丁酯和邻苯二甲酸二乙基己基酯的毒性作用可能是其在体内的代谢产物邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)所致.本研究拟探讨MBP和MEHP对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)自噬的影响以及与第10号染色体缺失的同源性磷酸酶-张力蛋白(PTEN)的相关研究.[方法]体外培养TM-3并取其对数生长期,预实验设置毒物浓度梯度为0(对照组)、50、100、200、400、800 μmol/L,染毒24h后,利用改良寇氏法计算MBP、MEHP的半数致死浓度(IC50)后,确定实验染毒浓度为0(对照组)、200、400、800 μmol/L.分别采取CCK-8法检测不同毒物剂量和不同染毒时间对细胞存活率的影响;透射电镜观察400 μmol/L的MBP、MEHP诱导24h后具有双层膜状结构的自噬小体;单丹黄酰尸胺(MDC)免疫荧光法检测细胞自噬囊泡的荧光信号强度;采用Western blot技术检测自噬标志蛋白LC3、p62和自噬调节相关蛋白PTEN的表达水平.[结果] CCK-8结果显示:与对照组相比,随着MBP、MEHP染毒剂量增高,细胞存活率降低(P＜0.05).透射电镜结果显示:400 μmol/L MBP、MEHP染毒24h后细胞内可见具有双层膜状结构的自噬小体.MDC法检测结果显示:与对照组相比,200 μmol/L MBP、MEHP染毒组荧光信号强度差异无统计学意义(P＞0.05);400、800 μmol/L MBP染毒组荧光信号强度分别增加了9.0、16.8倍;400、800 μLmol/L MEHP染毒组荧光信号强度增加了16.3、26.4倍,差异均有统计学意义(P＜0.01).Western blot结果显示:200 μmol MBP、MEHP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ、PTEN表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05);400、800 μmol/L MBP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平分别增加了7.5、13.6倍,PTEN表达水平增加了4.8、15.4倍;400、800 μmol/L MEHP染毒组LC3Ⅱ/LC3Ⅰ蛋白表达水平增加了4.5、9.8倍,PTEN表达水平增加了5.7、14.4倍(P＜0.05);200 μmol/L MBP染毒组p62表达水平与对照组相比差异无统计学意义(P＞0.05),400、800 μmol/LMBP染毒组p62蛋白表达水平分别降低了43％、72％;200、400、800μmol/L MEHP染毒组p62蛋白表达水平也分别降低了55％、80％、88％ (P＜0.01).[结论]一定剂量的MBP、MEHP可提高TM-3细胞自噬水平,并且PTEN表达水平与细胞自噬水平呈正相关趋势.

目的:探讨用活性氧化铝或活性炭作为除氟剂的改进型生物慢滤池对饮用水中氟及相关污染物的净化效果.方法:分别用活性氧化铝和活性炭作为除氟剂制备2种慢滤池,采用氟离子选择性电极法、酸性高锰酸钾法、纳氏试剂比色法、铂-钴标准比色法和玻璃电极法分别测定改进型生物慢滤池进水和出水中的氟含量、化学需氧量(CODMn)、氨氮(NH+4-N)、色度及pH值,分析评价改进型生物慢滤池对高氟水中氟化物及相关污染物的净化效果.结果:以活性氧化铝/活性炭为除氟剂的改进型生物慢滤池对水中氟离子的平均瞬时去除率、处理24 h后氟离子去除率、CODMn去除率、NH+4-N去除率、pH值达标率以及色度去除率分别为73.17％/6.14％、87.57％/18.33％、41.77％/18.28％、37.66％/21.17％、100％/85.71％和65.71％/22.14％.结论:以活性氧化铝为除氟剂的改进型生物慢滤池对饮用水中氟及相关污染物具有良好的净化效果,有一定的应用推广价值.

目的:采用简易湿化学法合成羟基磷灰石(hydroxyapatite,HA),对其进行表征分析,并研究该材料对氟离子的吸附性能.方法:首先,以Ca(NO3)2?4H2O和Na2HPO4为原料,采用简易湿化学法合成HA(40℃,pH=10.5～11.0).随后,用傅里叶红外光谱仪对HA进行结构表征,用扫描电镜观察形貌和尺寸.最后,研究了HA对高氟水中氟离子的吸附效率.结果:所制备的HA的特征吸收峰(3570cm-1)与标准的HA谱图一致,电镜下可见直径为40～100nm,长度为400～500nm的棒状晶体.静态(动态)吸附实验结果表明,活性炭和HA的F-比吸附量分别为5.95±1.07g/kg(14.41±2.88g/kg)和1.11±0.23g/kg(2.12±0.49g/kg).结论:采用简易湿化学法合成的HA是一种较为理想的除氟材料.下一步,需优化合成条件,以提高该材料的F-吸附性能.

目的 现有的毒理学实验教育模式较难满足"大预防"背景下社会对预防医学人才的能力要求.在教学实践的基础上,推荐了一个适合预防医学专业卫生毒理学课程的实验-氯化锂对小鼠脑组织内总一氧化氮合酶(T-NOS)活性的影响.方法 ICR小鼠腹腔注射氯化锂,采用比色法,测定急性给锂1 h后小鼠脑组织T-NOS活性的变化.结果 与对照组相比,急性高剂量给锂(10 mmol/kg体质量)导致小鼠脑组织T-NOS活性显著增加,这种变化可能是锂神经毒性的机制之一.结论 该实验体现了"高教卫生毒理学实验教学选题方案"的"相关性(与大纲高度相关)""综合性(课程交叉性)"和"其他因素(如3R原则)",是一个较为理想的预防医学专业卫生毒理学实验.

[目的]探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)和邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)染毒致小鼠睾丸间质细胞的凋亡作用及葡萄糖调节蛋白78 (GRP78)、活化转录因子4(ATF4)与C/EBP同源蛋白(CHOP)参与的可能机制.[方法]培养小鼠睾丸间质细胞(TM-3细胞)并且测出细胞生长曲线,用CCK-8法检测细胞在染毒浓度400 μmol/L状况下的细胞活性变化;用Annexin V-FITC/PI双染流式细胞术检测细胞凋亡情况;应用免疫印迹法检测GRP78、ATF4和CHOP含量的变化.单因素方差分析法分析染毒组与对照组之间的关系,2×2析因设计法判断联合染毒的交互作用,当|(MBP+MEHP组指标-对照组指标)|＜|(MBP组指标-对照组指标)|+|(MEHP组指标-对照组指标)|,可判定交互作用类型为拮抗作用.[结果]细胞在24～60h时间段内处于对数生长期,且细胞正常状态下的凋亡数量比较稳定.细胞活性检测结果显示MEHP染毒对细胞的抑制率比MBP的大,并且MBP+MEHP联合染毒且具有交互作用,其作用方式为拮抗作用[24h:|(53.21±7.68) ％|＜| (42.99±8.23)％|+| (65.46±8.29)％)|,36h:|(79.87±3.76)％|＜| (53.12±4.33)％|+| (74.80±4.96)％|;48h:|(85.97±6.07)％|＜| (38.98±9.59) ％|+|(80.73±4.99)％|]具有统计学意义(P＜0.05);细胞凋亡比例也呈现出MEHP组[早期凋亡(17.44±0.82)％,总凋亡:(44.24±0.89)％]大于MBP染毒组[早期凋亡 (14.58±0.97)％,总凋亡 (29.46±0.58)％],同时出现MEHP+MBP联合染毒组[早期凋亡:(8.58±0.35)％,总凋亡:(32.28±0.41)％]的凋亡比例小于各单独染毒组之和,呈现出拮抗作用;ATF4和GRP78在MEHP染毒组的表达量高于MBP染毒组,MEHP+MBP联合染毒组表达量低于MEHP染毒组但高于MBP染毒组,并且表现出拮抗作用.CHOP的表达量与对照组相比也有变化,MEHP染毒组表达量较MBP染毒组表达量高,在MEHP+MBP联合染毒组表达量低于单独染毒组,并且表现出拮抗作用,但MBP染毒组没有主效应.[结论]MBP、MEHP染毒致TM-3细胞凋亡具有主效应,MBP和MEHP联合染毒致TM-3细胞凋亡具有交互作用,呈现拮抗作用.GRP78-ATF4-CHOP通路可能参与MBP、MEHP染毒致TM-3细胞的凋亡过程.

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(MBP)、邻苯二甲酸单乙基己酯(MEHP)联合染毒对小鼠睾丸间质细胞(TM-3)睾酮合成的影响.方法 将TM-3细胞分为对照(完全培养基)组、MBP(LC50,500 μmol/L)单独染毒组、MEHP(LC50,450 μmol/L)单独染毒组和MBP(500 μmol/L)+MEHP(450 μmol/L)联合染毒组,培养24h后,观察线粒体超微结构,检测细胞线粒体膜电位和上清液中的睾酮水平.结果 MBP、MEHP单独染毒及联合染毒均可引起线粒体结构损伤.与对照组相比,MBP、MEHP单独染毒组和MBP+MEHP联合染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均下降,差异有统计学意义(P＜0.01);与MBP+MEHP联合染毒组相比,MBP、MEHP单独染毒组TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平均较低,差异有统计学意义(P＜0.01),MBP和MEHP联合染毒对TM-3细胞线粒体膜电位和上清液中睾酮的水平的交互作用均表现为拮抗作用.结论 MBP、MEHP联合染毒对睾酮合成水平的下降呈拮抗作用,可能与线粒体损伤机制有关.

目的 探讨邻苯二甲酸单丁酯(monobutyl phthalate,MBP)和邻苯二甲酸单(2-乙基)己酯[mono(2-ethylhexyl)phthalate,MEHP]染毒致体外培养的小鼠睾丸间质细胞(TM-3)凋亡过程中CHOP通路的作用.方法 将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于0(对照)、50、100、200、400、800 μmol/L的MBP和(或)MEHP溶液24、36、48 h后,采用CCK-8法测定细胞活性.将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)、MBP(400 μmol/L)、MEHP(400 μmol/L)和MEHP(400 μmol/L)+MBP(400 μmol/L)溶液24 h后,电镜下观察小鼠睾丸间质细胞内质网超微结构的变化.将小鼠睾丸间质细胞分别暴露于完全培养基(对照)及200、400、800 μmol/L MBP和(或)MEHP溶液24h,流式细胞术检测细胞早期凋亡情况,免疫印迹法检测内质网应激标志性蛋白葡萄糖调节蛋白78(GRP78)和CHOP的表达水平.结果 与对照组相比,各浓度MBP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势.随着MBP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除100 μmol/L组呈上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P＜0.05);且随着MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈上升趋势.随着MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率在50 μmol/L组呈上升趋势,在100 μmol/L组呈先下降后上升的趋势,在400 μmol/组呈下降趋势,200μmol/L和800 μmol/L组抑制率呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MBP+MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞的抑制率均较高,差异具有统计学意义(P＜0.05);且随着MBP+MEHP染毒浓度的升高,小鼠睾丸间质细胞的抑制率呈现上升趋势.随着MBP+MEHP染毒时间的延长,小鼠睾丸间质细胞的抑制率除200、400 μmol/L组呈现逐渐上升趋势外,其余浓度组均呈先上升后下降的趋势.与对照组相比,各浓度MBP和(MEHP)染毒组TM-3细胞的早期凋亡细胞比例均较高,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着染毒浓度的升高,MBP、MEHP和MBP+MEHP染毒小鼠睾丸间质细胞的早期凋亡细胞比例均呈现上升趋势.在同一染毒浓度下,睾丸间质细胞早期凋亡比例依次为MBP+MEHP＜ MBP＜MEHP,差异有统计学意义(P＜0.05).与对照组相比,各浓度MBP和(或)MEHP染毒组小鼠睾丸间质细胞内GRP78和CHOP蛋白的表达水平均增加,差异有统计学意义(P＜0.05);且随着染毒浓度的升高,MBP和(或)MEHP染毒小鼠睾丸间质细胞内GRP78和CHOP蛋白的表达水平均呈逐渐上升的趋势.结论 MBP和(或)MEHP染毒可致内质网损伤,上调GRP78蛋白和CHOP蛋白的表达,这可能是MBP和(或)MEHP引起小鼠睾丸间质细胞凋亡的重要途径.

本文通过对本科生导师制实施现状分析,提出了"导师一贯制"培养及实施方法,在实践探索中,由于地方高校所处区域以及校情的不同,所采用的本科生导师制也各有不同."导师一贯制"也是导师制的一种形式,只有不断完善,探索出一套适合自身的导师制.