近来,一种新型冠状病毒(SARS-CoV-2)引发的COVID-19突发疫情,给全球公众健康和社会经济构成严重威胁.SARS-CoV-2成为继人冠状病毒229E(Human coronavirus 229E,HCoV-229E)、人冠状病毒OC43(Human coronavirus OC43,HCoV-OC43)、严重急性呼吸综合征冠状病毒(Severe acute respiratory syndrome coronavirus,SARS-CoV)、人冠状病毒NL63(Human coronavirus NL63,HCoV-NL63)、人冠状病毒HKU 1(Human coronavirus HKU1,HCoV-HKU1)和中东呼吸综合征冠状病毒(Middle East respiratory syndrome coronavirus,MERS-CoV)后第七种感染人类的冠状病毒.本研究以高分辨毛细管电泳技术为基础,针对七种人冠状病毒基因保守区分别设计特异性引物对,经常规PCR扩增后,通过具备单碱基差异分辨率的毛细管电泳分析,实现快速检测七种人冠状病毒的目标.通过构建基于毛细管电泳的人冠状病毒分子靶标,实现同时快速精准鉴定七种人冠状病毒的目的.本研究建立的人冠状病毒毛细管电泳快速检测技术方法具有极高灵敏性和精确性,分辨率高而且特异性好,操作简便成本低廉,为人冠状病毒的临床诊断、口岸快速检测等提供了新的技术支持.

目的 建立基于颜色判定的适用于国境口岸简便、快速、灵敏和特异的逆转录环介导等温扩增(reverse transcription loop-mediated isothermal amplification,RT-LAMP)方法检测人冠状病毒OC43(HCoV-OC43)核酸.方法 通过序列比对,选择HCoV-OC43(GenBank号:KU131570)为参考株,根据其核衣壳(nucleocapsid,N)蛋白基因保守区序列设计6条特异性引物,在65℃等温条件下扩增45 min.在扩增前加入钙黄绿素作为反应指示剂,以最终反应颜色变化作为结果判断标准.对病毒核酸依次倍比稀释以检验该方法的灵敏性;同时,对甲型、乙型流感病毒和其他HCoV进行检测,以检验该方法的特异性.结果 通过引物筛选最终选定了1组特异性引物,仅能与HCoV-OC43病毒核酸产生特异性反应并出现颜色改变,而与其他病毒均不能产生颜色变化,具有较高的特异性.与常规荧光定量RT-PCR法相比,该方法检测灵敏度达5.6拷贝/反应,灵敏度更高,且在短时间内达到对HCoV-OC43基因快速检测的目的.结论 建立的基于颜色判定的RT-LAMP方法可实现对HCoV-OC43病毒快速、灵敏、特异性检测,具有在国境口岸以及基层医疗机构和疫区现场推广应用的潜力.

目的 探索国际旅行卫生保健中心实验室转型建设和发展思路.方法 调研江苏检验检疫系统17家保健中心实验室和1家省级第三方医学实验室,对设备、人员、业务种类、业绩和效率情况进行比较.结果 江苏检验检疫系统17家保健中心实验室在设施、设备和业务种类方面差异不明显,在人才结构、技术能力和绩效方面有一定差异.与第三方医学实验室相比,保健中心实验室的资源配置充足,但在技术能力和业绩方面存在差距.结论 保健中心建设第三方医学实验室,将有利于节约资源,提高技术能力,符合当前检验检疫系统实验室改革的趋势.

目的 分析江苏部分口岸出入境人员传染病监测结果.方法 收集江苏部分口岸出入境传染病监测资料,对传染病监测情况进行统计分析.结果 甲型流感病毒阳性检出率最高(P＜0.05).各类传染病感染检出构成比逐年上升,2014年最高(P＜0.05).19～40岁年龄段各类传染病感染构成比最高(P＜0.05).结论 口岸传染病监测中,应强化高发传染病检出,加强重点年龄段体检,控制传染病流行.

目的 用实时荧光定量PCR检测乙型肝炎患者HBV DNA结果进行分析,以探讨其临床诊疗意义.方法 对630例血清标本用时间分辨荧光免疫技术定量测定乙肝炎病毒血清学指标,用荧光定量PCR法检测血标本中的HBV-DNA,并依据乙肝两对半结果进行归类分组.结果 630份标本中,大三阳206例标本中有173份HBV-DNA为阳性,阳性率为84.0％,其PCR定量拷贝数为(2.13±0.72)×107/ml;小三阳211例中有64份HBV-DNA阳性,阳性率达到30.3％,PCR定量拷贝数为(1.61±0.85)×106/ml;69份HBsAb(+)、HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有33份HBV-DNA阳性,阳性率47.8％;27份HBsAg(+)、HBcAb(+)标本中有8份HBV-DNA为阳性,阳性率为29.6％;22份HBeAb(+)、HBcAb(+)标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率13.6％;20份HBsAg(+)、HBsAb(+)、HBeAg(+)、HBcAb(+)标本中有17份HBV-DNA为阳性,阳性率为85.0％;17份HBsAb(+)、HBeAb(+)阳性标本有3份PCR HBV-DNA阳性,阳性率为17.6％;13份HBsAb(+)、HBcAb(+)标本有1份HBV-DNA阳性,阳性率7.7％;12份HBcAb(+)标本有5份PCRHBV-DNA阳性,阳性率为41.7％;2份HBsAb(+)的标本HBV-DNA均为阴性,PCR定量拷贝数为＜1.00E×103;1份HBsAg(+)标本HBV-DNA均为阳性,阳性率为100％;其余30例全阴性结果和各少见模式基本未见有HBV-DNA的检出.结论 PCR定量测定HBV-DNA可以真实反映体内乙肝病毒感染和复制及病毒载量情况,更有利于临床治疗和疗效观察.

Objective A case of diagnosing a early Syphilis through daily health examination in Jiangsu International Travel Health Care Center is analyses. Methods Explore the early diagnosis method and how to effectively diagnose the early Syphilis carriers. Results The optimal diagnosis method are selected through three most common test methods and molecular biology method. Conclusion The early diagnosis method with high sensibility and specificity,combined with clinical symptoms and unsanitary sexual contact should be used to diagnose early Syphilis.

目的探讨实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)和酶联免疫吸附试验(ELISA)在检测丙型肝炎病毒(HCV)方面的差异。方法采用随机抽样分组方法,在2011年6月-2012年6月于我院就诊的HCV患者与同期在我局进行健康体检的正常人群中,各抽取90例,分为HCV组(A组)与正常对照组(B组)。对每一组样本,分别采用FQ-PCR和ELISA法,进行HCV-RNA和抗-HCV检测。结果 A组90例HC患者中,FQ-PCR和ELlSA分别检出阳性82例和73例,阳性率分别为91.1%和81.1%;B组90例健康对照组样本中,FQ-PCR和ELISA分别检出阴性90例和87例,阴性率分别为100%和96.7%。结论在检测HCV方面,FQ-PCR比ELISA更具灵敏性和特异性,其临床应用价值更高,但ELISA也有操作简便,费用与耗时均较低的优点,在实际应用中可考虑两种方法联合检测,在提高了出入境人员和患者HCV的诊断准确率的同时,又可以减轻患者经济负担。

[目的]了解无锡口岸出入境人员、口岸服务人员和其他就诊人员中性传播疾病(STD)的解脲脲原体(Uu)、人型支原体(Mh)和生殖支原体(Mg)感染状况.[方法]应用套式PCR(nested PCR,nPCR)技术检测了337例男性STD者尿道拭子和189例女性STD者宫颈拭子中的Uu、Mh和Mg.[结果](1)男性STD者Uu、Mh、Mg感染率分别为46.3%、20.5%、5.6%;女性则为60.8%、36.5%、4.2%.男、女感染率均为Uu＞Mh＞Mg.(2)男、女性STD者的Uu、Mh、Mg 3种支原体最常见的感染模式为单独Uu感染、单独Mh感染和Uu与Mh合并感染,分别占本组526例男、女性STD者的33.7%、11.0%和13.7%.[结论)无锡地区口岸相关男、女性STD者中以Uu感染、Mh感染以及Uu、Mh合并感染较为常见.

与人类疾病相关的衣原体(chlamydia,C)有沙眼衣原体(C.trachomatis,Ct)、肺炎衣原体(C.pneumoniae,Cpn)和鹦鹉热衣原体(C.psittaci,Cps)3种.该3种衣原体均可致人类睑结膜炎、呼吸道、生殖道感染和关节炎等疾病[1].

目的探讨Ⅱ型糖尿病患者瘦素受体基因Gln223Arg变异与肥胖及高血压之间的相关性.方法采用PCR-RELP方法分析了184例无锡地区Ⅱ型糖尿病患者及86例正常对照组G1n223Arg变异频率的分布情况.结果 (1)整个被检测的Ⅱ型糖尿病人群中Gln223Arg变异频率与正常对照组比较经统计学处理没有显著性差异;(2)Ⅱ型糖尿病患者中的正常体重组A、G等位基因的分布频率与超重组分布频率的比较亦无显著性差异;(3)在Ⅱ型糖尿病患者中高血压组和非高血压组之间存在非常显著的A、G等位基因的分布频率差异(P值＜0.005).结论 A等位基因与Ⅱ糖尿病患者的肥胖无一定的关系而与其高血压的发病相关.

鹦鹉热衣原体(Chlamydia psittaci,Cps)是人兽共患病病原体.在我国已从鸡、鸭、鹌鹑等家禽以及猪、牛、羊等家畜和鸽、鹦鹉等观赏鸟的患病个体内分离到Cps.大规模血清流行病学调查发现我国家禽、家畜Cps阳性率在6%～10%水平.人与患病动物接触也可患病(呼吸感染),孕妇感染Cps可导致流产[1].许多国家已将Cps感染列入法定传染病进行监控和口岸检疫.人们对Cps感染所致的人兽共患病研究已有百年历史,几乎所有检测病原菌的诊断方法都曾用于Cps感染诊断.但自二十世纪80年代以来由于分子生物学技术的进展,分子诊断(Molecular diagnosis)方法的高灵敏、高特异性优势明显.本文就Cps感染的分子诊断现状作扼要综述.