目的:通过构建人卵巢癌SKOV3 Id1特异性siRNA慢病毒载体及其裸鼠移植瘤模型,观察沉默分化抑制因子(inhibitcr of differentiation-1,Id1)表达对卵巢癌SKOV3生长的影响.方法:根据Id1基因序列设计并合成的siRNA片段转染SKOV3细胞,将转染细胞分为四组:cell+ lv-shRNA-Id1(实验组)、cell+ lv-shR-NA-NC(质粒对照组)、cell+ lv-control(空病毒对照组)、cell(空白对照组),筛选出稳定转染的SKOV3细胞克隆,48小时后检测细胞生长活性.将40只裸鼠随机分为四组,分别接种上述转染成功的细胞,30天后称取瘤体重量,计算抑瘤率;然后通过Western blotting法检测移植瘤中Id1蛋白的表达.结果:在体外试验中,实验组的细胞生长活性显著低于空白对照组,具有统计学意义(P<0.05),三对照组间无明显差异(P>0.05);体内实验显示,实验组平均瘤重均低于其他三对照组,差异具有统计学意义(P<0.05),三对照组间瘤重差异无统计学意义(P>0.05);实验组、质粒对照组、空病毒组抑瘤率分别为45.98%、4.84%、4.50%;Westernblotting结果显示,实验组中Id1表达较对照组明显下调(P<0.05).结论:沉默Id1基因能抑制卵巢癌细胞的生长,有望成为卵巢癌治疗新靶点.
以裸鼠为载体建立卵巢癌模型至今已有三十余年的发展,随着裸鼠实验技术的日臻完善,裸鼠模型已广泛应用于卵巢癌各种基础和临床研究.裸鼠移植瘤模型因其移植人瘤成功后保存原肿瘤特性,与原瘤组织对抗癌药物具有同样的敏感性,在探索肿瘤发生发展规律、开发新的治疗方法和药物等方面得到充分应用.卵巢癌裸鼠移植瘤模型按肿瘤来源可分为人卵巢癌切除标本实体瘤和人卵巢癌细胞株;按接种后所在部位分为皮下移植裸鼠模型,腹腔种植裸鼠模型,裸鼠体内原位移植模型[1].本文将对三种裸鼠移植瘤模型生物学特征应用和近年来模型检测可视化手段进行综述.
1病例资料 患者李某,女,48岁.因"绝经5年,阴道突然大量流血5天"于2009年2月12日入黑龙江中医药大学附属第一医院就诊.查体:体温(T):36.6℃,脉搏(P):75次/分,呼吸(R):18次/分,血压(BP):18.7/11.3kPa(140/85mmHg),入院空腹血糖:15.24mmol/L.当地医院盆腔超声显示:子宫内膜厚31mm,宫腔内未见明显肿块.既往月经规律,现已绝经5年.