目的:基于IRE1α/JNK通路研究苁蓉舒痉颗粒对帕金森病(parkinson's disease,PD)模型大鼠的影响.方法:将45只雄性SD大鼠随机分成正常组、模型组和苁蓉舒痉颗粒组(5.21 g·kg-1),除正常组外,其余大鼠采用连续14 d颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液(1.5 mg·kg-1)(按1.5∶1将鱼藤酮、葵花油配为鱼藤酮葵花油乳液)制备PD模型,连续给予相应的药物14 d.免疫组化法检测大鼠脑黑质酪氨酸羟化酶(tyrosine hydroxylase,TH)表达;Western Blot法检测大鼠脑额叶中IRE1α、JNK蛋白及其磷酸化的表达.结果:与模型组比较,苁蓉舒痉颗粒组大鼠脑黑质TH阳性细胞数明显增加(P＜0.05),脑额叶p-IRE1 α/IRE1α、p-JNK/JNK水平明显降低(P＜0.05).结论:苁蓉舒痉颗粒通过增加大鼠脑黑质TH阳性细胞数,降低脑额叶p-IRE1 α/IRE1α、p-JNK/JNK水平来保护神经细胞,可能与IRE1α/JNK通路有关.

The main pathological changes inherent in Parkinson's disease (PD) are degeneration and loss of dopamine neurons in the midbrain and formation of Lewy bodies. Many studies have shown that the pathogenesis of PD is closely related to endoplasmic reticulum (ER) oxidative stress. This study combined various traditional Chinese medicines to prepare Congrong Shujing granules (CSGs). The optimal dose combination of the ingredients was identified by experimental intervention in SH-SY5Y cells in vitro. A PD rat model was established by intraperitoneal injection of rotenone sunflower oil emulsion. The suspension tests were performed on the 14th day after modeling and also on the 14th day after CSG intervention (5.88 g/kg, 11.76 g/kg, and 23.52 g/kg). We evaluated the changes in motor function and the expression of neuronal cell functional marker proteins, ER stress (ERS) marker proteins, and apoptosis-related pathway proteins of neuronal cells. Changes in cellular ultrastructure were observed by electron microscopy. Our results showed that CSG treatment lengthened the duration of PD rats' gripping to the wire. 78 kDa glucose-regulated protein (GRP78) expression in the substantia nigra was significantly upregulated in the middle- and high-dose CSG groups after 14 days of treatment compared with the model group. The expression of the key dopaminergic neuron functional enzyme tyrosine hydroxylase (TH) and cerebral dopamine neurotrophic factor (CDNF) was elevated. The expression of c-Jun N-terminal kinase (JNK) and phosphorylated c-Jun decreased, and cell apoptosis was significantly reduced. Compared with the model group, the treatment groups had fewer ER fragmentation and degranulation (ribosome shedding) and abundant ER and mitochondria suggesting that CSG reduced ER stress and neuronal apoptosis in the midbrain of a PD rat model by inducing the expression of molecular chaperone GRP78.

目的 观察松果菊苷对帕金森病模型大鼠纹状体葡萄糖调节蛋白78(GRP78)及中脑星形胶质细胞源性神经营养因子(MANF)蛋白含量的影响.方法 32只雄性SD大鼠随机分为正常组、溶剂组及造模组.连续颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液14d建立帕金森病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组与治疗组,每组8只.治疗组予以松果菊苷20mg/(kg·d)灌胃.其余各组予以等量生理盐水灌胃,连续给药14d.各组大鼠于松果菊苷治疗前1d及治疗14d后行悬挂试验;药物干预结束后,麻醉下处死大鼠取纹状体,蛋白质印迹法(Western Blot)检测GRP78及MANF蛋白的表达.结果 治疗前1d,模型组及治疗组大鼠悬挂时间较正常组缩短(P<0.01);治疗14d后,治疗组大鼠悬挂时间较模型组延长(P<0.05).与正常组比较,模型组GRP78蛋白表达增高,MANF蛋白表达降低(P<0.05);与模型组比较,治疗组GRP78蛋白表达降低,MANF蛋白表达升高(P<0.05).结论 松果菊苷可能通过调节内质网应激相关蛋白GRP78表达及增加MANF的表达改善帕金森病的行为障碍.

目的 研究苁蓉精对帕金森病模型大鼠延髓中PI3 K/AKT通路的影响,探讨苁蓉精改善帕金森病相关症状可能的机制.方法 将造模成功的24只SD大鼠随机分为模型组、苁蓉精40,80,160 mg·Kg-1·d-1三个剂量组,并设立正常组与假手术组,每组6只;分别给予苁蓉精或生理盐水,连续灌胃14天.Western Blotting检测大鼠延髓AKT、PI3K及P-AKT、P-PI3K蛋白的表达.结果 与正常组比较,PD模型组大鼠延髓中P-AKT、p-PI3K蛋白的表达量降低(P＜0.05);与模型组对比,给药组PD模型大鼠中80、160 mg·Kg-1 · d-1剂量组的p-AKT蛋白的表达量明显增高(P＜0.05),而40、80、160 mg·Kg-1·d-1三个剂量组中P-PI3K蛋白的表达量都明显增高,且具有量效依赖关系(P＜0.05).结论:苁蓉精可提高延髓中P-AKT、P-PI3K蛋白的表达量对神经元起到保护作用.

目的 研究复方苁蓉精水提液对PD模型大鼠行为学的影响及其对中脑黑质—纹状体组织中糖原合成酶激酶3β(glycogen synthase kinase 3β,GSK-3β)蛋白表达的影响.方法 取SD大鼠50只,随机分为复方苁蓉精水提液低、中、高剂量组,模型组和正常组五组,采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液制备PD大鼠模型,干预14天后,进行行为学观察、实验,提取中脑黑质,用免疫荧光法检测GSK-3β表达情况.结果(1)经复方苁蓉精水提液干预14天,中剂量和高剂量组大鼠GSK-3β的表达较模型组来说显著降低(P<0.05);(2)经复方苁蓉精水提液干预14天后,中剂量和高剂量组悬挂实验行为学评分增加(P<0.05).结论 复方苁蓉精水提液可能通过抑制GSK-3β的活性,以此来改善PD大鼠的行为障碍.

目的 探讨补肾复方治疗帕金森病(PD)的可能作用机制.方法 40只雄性SD大鼠采用颈背部皮下注射鱼藤酮葵花油乳化液建立PD大鼠模型,随机分为补肾复方低、中、高剂量组(40、80、160 mg/kg补肾复方水煎剂灌胃)及模型组(等体积生理盐水灌胃),每组10只.另设正常组和溶剂组(等体积生理盐水灌胃)各10只.于灌胃第14天进行悬挂实验;免疫组化检测黑质酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数,Western Blot法检测纹状体、额叶多巴胺能神经营养因子(CDNF)、中脑胶质细胞源性神经营养因子(MANF)蛋白表达,RT-PCR检测纹状体、额叶CDNF、MANF mRNA表达. 结果 与模型组比较,补肾复方中、高剂量组悬挂实验评分增加,黑质TH阳性细胞数增加,纹状体和额叶CDNF蛋白表达及补肾复方高剂量组纹状体MANF蛋白及mRNA水平、纹状体CDNF mRNA水平、额叶MANF mRNA亦明显增加,补肾复方各剂量组额叶CDNF mRNA表达均增多(P＜0.05或P＜0.01). 结论 补肾复方能改善帕金森病的行为障碍,保护纹状体、额叶的多巴胺能神经细胞,其保护作用可能是通过纠正不同脑区的CDNF、MANF表达实现的,且以高剂量效果更好.

目的 观察苁蓉精对帕金森病模型大鼠行为学及纹状体PI3 K/AKT通路相关蛋白的影响,探讨苁蓉精治疗帕金森病的可能作用机制.方法 连续皮下注射鱼藤酮14天建立帕金森病雄性SD大鼠模型28只,随机分为模型组及低、中、高剂量组,每组各7只,低、中、高剂量组苁蓉精给药量分别是40,80,160 mg·kg-1,连续给药14d;并选取同种同年龄雄性SD大鼠14只,随机分为正常组和溶剂对照组,每组各7只,其中溶剂对照组给予皮下注射葵花油14d,正常组不予处理.苁蓉精给药前1d、给药第14天分别进行行为学悬挂试验;药物治疗结束后,Western Blot检测PI3K、AKT、p-PI3K、p-AKT蛋白的表达.结果 在悬挂试验中,苁蓉精给药前1d,与正常组相比,模型组及低、中、高剂量组悬挂时间减少(P＜0.05);给药14d后,与正常组相比,模型组的悬挂时间明显缩短(P＜0.01),与模型组相比,苁蓉精中、高剂量组悬挂时间延长(P＜0.05).Western blot中,与正常组相比,模型组中p-PI3K、p-AKT蛋白表达减少(P＜0.05);与模型组相比,高剂量组p-PI3K蛋白表达增加(P＜0.05),中、高剂量组p-AKT蛋白表达明显增加(P＜0.01).结论 苁蓉精能改善帕金森病模型大鼠模型大鼠的行为障碍,其机制可能是通过增加纹状体p-PI3K、p-AKT蛋白表达,启动PI3 K/A KT信号通路,对纹状体神经元起到保护作用.

目的 研究苁蓉舒痉方对鱼藤酮所致帕金森病模型大鼠纹状体Akt、P-Akt、mTOR表达的影响.方法 用鱼藤酮葵花油乳液制备帕金森病大鼠模型,将造模成功的大鼠随机分为模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组,应用Westem blot方法检测大鼠纹状体中Akt、P-Akt和mTOR的含量变化. 结果 Western blot检测结果显示,模型组大鼠纹状体的Akt、P-Akt蛋白表达减少(P＜0.05);与模型组比较,中剂量组P-Akt蛋白表达增加(P＜0.05),高剂量组Akt、mTOR蛋白表达增加(P＜0.05). 结论 苁蓉舒痉方可提高帕金森病模型大鼠纹状体Akt、P-Akt和mTOR的表达,激活Akt/mTOR通路,可能是减轻大脑纹状体多巴胺神经元损伤的作用机制之一.

目的:研究苁蓉精对帕金森患者肌强直、震颤症状的治疗效果.方法:对1例以双上肢震颤、肌强直为主要临床表现的帕金森患者应用中药治疗的全过程进行分析,并搜索相关文献进行归纳总结复习.结果:西药治疗帕金森病有不同程度的副作用,中西医结合治疗帕金森病在临床中取得了较好的疗效,成为治疗帕金森病的有效策略.结论:苁蓉精能较好的改善帕金森病患者的肌强直、震颤症状.