目的:探讨m6 A修饰的circ_100367对甲状腺乳头状癌(papillary thyroid carcinoma,PTC)免疫逃逸的影响,并阐述其可能的机制.方法:采用qRT-PCR法检测PTC患者癌组织及其癌细胞株中circ_100367和miR-885-5p的表达水平.将circ_100367干扰质粒(si-circ_100367)及其阴性对照干扰质粒(si-NC)、circ_100367过表达质粒(oe-circ_100367)及其阴性对照质粒(oe-NC)和miR-885-5p mimics及其阴性对照NC mimics分别转染至TPC1细胞中,分为Blank组、si-circ_100367组、si-NC组、oe-circ_100367组、oe-NC组、miR-885-5p mimics组和NC mimics组.采用qRT-PCR法检测各组TPC1细胞中circ_100367和miR-885-5p的表达水平;采用双荧光素酶报告系统验证circ_100367可靶向调控miR-885-5p;MeRIP-qPCR法检测circ_100367的m6 A甲基化水平;Transwell法检测细胞侵袭能力;细胞划痕实验检测细胞迁移能力;Western blot检测细胞FASL、IDO1、PD-L2和PD-L1表达水平.结果:circ_100367在PTC患者癌组织及其癌细胞株K1、TPC1和IHH4中表达水平明显升高(P<0.05),而miR-885-5p表达水平明显降低(P<0.05).双荧光素酶报告系统结果说明:circ_100367靶向负调控miR-885-5p.MeRIP试验结果显示:circ_100367含有丰富的m6 A甲基化,且与NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞中circ_100367的m6A甲基化水平明显降低(P<0.05).此外,与Blank或si-NC比较,si-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05);与Blank或oe-NC比较,oe-circ_100367细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显升高(P<0.05);与Blank或NC mimics比较,miR-885-5p mimics细胞侵袭数量、细胞划痕愈合率和FASL、PD-L1、PD-L2、IDO1蛋白表达水平明显降低(P<0.05).结论:m6A甲基化修饰的circ_100367能诱导PTC细胞侵袭,影响PD-L1的表达进而促进免疫逃逸,其可能与m6 A甲基化修饰的circ_100367和miR-885-5p竞争性结合有关.
目的:观察深圳市第二人民医院医务工作者的甲状腺结节检查情况,并分析其相关影响因素.方法:回顾性分析深圳市第二人民医院医务工作者2020年1月至2020年12月期间的体检资料,纳入体检资料完备的医务工作者749例,统计分析医务工作者甲状腺结节超声检查情况与甲状腺功能、血糖、血脂、血压、体质量指数(BMI)、工作岗位及职称等因素的相关性.结果:深圳市第二人民医院职工甲状腺结节超声检出率为43.66%,女性甲状腺结节检出率高于男性,高级职称员工的检出率高于初、中级职称;45~55岁组与<35岁组相比,甲状腺结节检出率更高,>55岁组分别与<35岁组、35~45岁组相比,甲状腺结节检出率检均更高,差异均具有统计学意义(P<0.05);多因素logistic回归分析结果显示,年龄、舒张压(DBP)、BMI及总胆固醇(TC)为甲状腺结节的独立危险因素(P<0.05).结论:深圳市第二人民医院医务工作者的甲状腺结节检出率与年龄、血脂、血压及BMI相关,高级职称者的甲状腺结节检出率更高,可能与其承受着更多的精神与工作压力相关.因此有必要针对不同层次的医务工作者制定适宜的随访计划,并给予生活指导及压力疏导.
目的 通过体外细胞实验观察BRIX1基因对三阴性乳腺癌(triple negative breast cancer,TNBC)细胞MDA-MB-231的增殖与凋亡的影响. 方法 将MDA-MB-231细胞株分为实验组(shBRIX1组)及对照组(shCtrl组).shBRIX1组采用构建敲低BRIX1基因表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞,以敲低BRIX1表达;shCtrl组采用慢病毒空载体转染MDA-MB-231细胞.应用实时荧光定量PCR(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)及Western Blot方法检测两组的转染效率;采用Celigo细胞成像技术、噻唑蓝(methyl thiazolyl tetrazolium,MTT)实验连续5 d检测两组细胞的增殖情况;采用细胞克隆实验检测细胞克隆形成数;采用流式细胞仪荧光分选(fluorescence acti-vated cell sorting,FACS)技术和Caspase3/7活性检测比较两组细胞的凋亡能力. 结果 与shCtrl组细胞相比,敲低BRIX1表达的慢病毒载体转染MDA-MB-231细胞72 h后,RT-qPCR检测shBRIX1组中细胞的BRIX1基因表达水平明显下降(P<0.05);Western Blot检测shBRIX1组细胞中的BRIX1蛋白表达水平下降.敲低BRIX1后,Celigo、MTT及细胞克隆实验结果显示从第二天开始MDA-MB-231细胞增殖能力较shCtrl组明显下降(P<0.01);FACS实验及Caspase3/7活性检测结果显示敲低BRIX1组的MDA-MB-231凋亡细胞数量增加(P<0.05). 结论 下调BRIX1能抑制三阴型乳腺癌细胞增殖,促进凋亡,为寻找TNBC治疗新靶点提供实验依据.
目的 探讨干扰有丝分裂阻滞缺陷2样蛋白1(MAD2L1)基因表达对乳腺癌(BC)细胞凋亡的影响及其机制.方法 采用qRT-PCR检测正常乳腺上皮细胞系MCF-10A和4种BC细胞系(MDA-MB-231、MCF-7、SK-BR-3和BT-20)中MAD2L1 mRNA表达水平.将MAD2L1 siRNA转染至MDA-MB-231细胞中,qRT-PCR和Western blotting检测细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平;MTT检测细胞增殖能力;流式细胞术法检测细胞凋亡率;Western blotting检测细胞中Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK(Thr180/Thr182)和p38MAPK等蛋白表达水平.采用p38MAPK抑制剂SB203580联合处理上述细胞,Annexin V-FITC/PI法检测细胞凋亡率的变化;West-ern blotting检测Bax、Bcl-2、cleaved-caspase-3、p-p38MAPK和p38MAPK表达水平的变化.结果 BC细胞系中MAD2L1 mRNA表达水平高于MCF-10A细胞,其中MDA-MB-231细胞最为显著.干扰MAD2L1基因可降低MDA-MB-231细胞中MAD2L1 mRNA和蛋白表达水平(tmRNA=10.51,PmRNA<0.001;t蛋白=18.30,P蛋白<0.001),同时抑制细胞增殖(F组别=243.36、F时间=44.00、F组别×时间=9.881,P均<0.001),促进细胞凋亡(t=9.10,P<0.001),并上调Bax、cleaved-caspase-3和p-p38MAPK蛋白表达水平(tBax=15.05,PBax<0.001;tcleaved-caspase-3=5.26,Pcleaved-caspase-3=0.006;tp-p38MAPK=28.46,Pp-p38MAPK<0.001),下调Bcl-2蛋白表达水平(tBcl-2=14.23,P<0.001).然而,SB203580处理可抑制MAD2L1基因干扰对MDA-MB-231细胞凋亡的诱导作用(P=0.002).结论 干扰MAD2L1基因表达可抑制MDA-MB-231细胞增殖,并诱导其凋亡,其作用机制可能与激活p38MAPK信号通路有关.
目的 探索超声造影联合图像定位对甲状腺癌颈部淋巴结清扫的应用价值. 方法 回顾性分析2017年6月~2019年1月于深圳市第二人民医院接受双侧甲状腺切除+颈侧区淋巴结清扫的甲状腺乳头状癌患者126例,其中72例接受超声联合CT检查评估颈部淋巴结状况(超声联合CT组),54例接受超声造影联合图像术前定位(超声造影联合图像组).对两组病例的淋巴结清扫数目及转移数目、手术时长、术后并发症发生率及术后淋巴结转移复发情况进行对比分析. 结果 超声造影联合图像组手术时间短于超声联合CT组,分别为(125.31±17.37)min和(143.28±22.83)min,t=5.016,P<0.01;Ⅲ/Ⅳ区、Ⅴ区、Ⅱ区淋巴结清扫个数亦少于超声联合CT组[(Ⅲ/Ⅳ区:(9.61±1.90)枚VS(11.5±3.15)枚,t=4.178,P<0.01,Ⅴ区:(2.89±1.21)枚VS(3.39±1.24)枚,t=2.265,P=0.025),Ⅱ区:(2.15±0.99)枚VS(3.46±1.22)枚,t=6.620,P<0.01)],但淋巴结转移个数无统计学差异.术后乳糜漏发生率超声造影联合图像组为1.9%(1/54),超声联合CT组为6.9%(5/72),无统计学差异,P=0.365.超声造影联合图像组中位随访时间18个月,超声联合CT组中位随访时间19个月,两组累积无淋巴结转移复发生存率无统计学差异(P=0.701). 结论 超声造影联合图像术前定位应用于甲状腺乳头状癌手术可使术者更为精准地清扫颈侧区淋巴结,从而提高手术效率.
新型冠状病毒肺炎的疫情对乳腺疾病患者的正常医疗需求产生了巨大影响,如何在安全的前提下进行有序有效的诊疗活动,是患者和医务工作者共同关注的问题.本文通过复习文献,对乳腺疾病,特别是乳腺癌的治疗时机和治疗方法 进行总结,对不同的乳腺疾病类别、不同的乳腺癌分类提出了具体的诊疗时机和诊疗方案.
目的 分析比较超声引导下胸椎旁神经阻滞麻醉(thoracic paravertebral nerve block, TPVB)与全身麻醉在乳腺癌保乳术快速康复中的应用价值. 方法 回顾性分析2016年12月~2018年12月在我院乳甲外科行乳腺癌保乳手术的76例女性患者的临床资料,其中采用超声引导TPVB(T组)39例,全身麻醉(G组)37例.比较两组患者麻醉效果、术后疼痛评分及快速康复情况. 结果 在T2、T4时间点,T组血压、心率波动低于G组,两组比较差异有统计学意义(P<0.05).术中舒芬太尼使用量、患者术后8h内VAS评分(静息/咳嗽)、恢复饮食时间及首次下床活动时间比较,T组均少于G组,差异有统计学意义(P<0.05). 结论 超声引导TPVB应用于乳腺癌保乳术安全有效,有利于促进患者术后康复.