猪是人兽共患病病原戊型肝炎病毒(HEV)III、IV基因型的重要贮存宿主.为了解云南省临沧市猪HEV的遗传进化情况,从规模猪场、猪散养户以及猪屠宰场,随机采集粪便 153 份、肝脏 36份和胆汁 54 份,采用巢氏PCR进行HEV ORF2 基因片段扩增、克隆、测序和生物信息学分析.结果显示:在 243 份样品中,检出 137 bp目标片段阳性 61 份,阳性率为 25.1%(61/243);对检出的阳性样品进行ORF2 部分序列扩增,得到 6 份 348 bp目标片段.6 份 348 bp目标片段间的核苷酸同源性为86.0%~95.6%,均为基因IV型;与HEV I—VIII型代表株的同源性分别为 75.0%~81.7%、72.7%~77.0%、72.7%~79.3%、80.5%~94.1%、75.7%~80.7%、75.0%~81.0%、73.3%~80.3%和 71.3%~76.1%,与我国人源代表毒株AJ272108BeijingHuman的同源性为 81.3%~87.7%;基因亚型分析显示,6 份 348 bp目标片段中,除 1 份是 4b亚型外,其他 5份都属于 4a亚型.结果表明,临沧市猪群中存在人兽共患病病原HEV基因Ⅳ型流行,且有通过肝脏、胆汁等产品感染传播的潜在风险,因此该地区应该重视猪HEV的公共卫生学意义.
从大理州某猪场采集具有败血症、关节炎症状的病猪肝脏、脾脏组织及关节液样品,经细菌分离培养、革兰氏染色形态学检查、16S rRNA扩增、测序及GenBank数据库比对分析,确定分离菌株为猪链球菌2型.该菌株在血琼脂培养基上有典型的β型溶血现象,说明具有较强的致病性.
为了解细胞因子IL-4和IL-5在戊型肝炎病毒(HEV)感染中的表达及其作用,以新西兰大白兔为模型,腹腔注射感染HEV-4,攻毒后第7、14、21、28、35天对兔的心、肝、脑、肾等进行组织病理学观察,应用实时荧光定量PCR对肝脏、脑等器官中IL-4和IL-5的表达水平及变化进行检测.结果显示,肝脏中IL-4和IL-5攻毒后第7天mRNA转录水平明显高于对照组,从第14天开始转录水平降低,逐渐降低直到第35天恢复至与对照组一致;脑中IL-4的转录水平在感染初期就明显降低,第28天达到最低值,仅为对照组的10%左右,第35天转录水平恢复至正常.IL-5在感染初期下调,第14天上调,在第35天恢复至正常.表明IL-4和IL-5参与了 HEV感染早期IgG抗体产生,肝脏、脑炎症状发生等过程.研究结果为揭示猪戊型肝炎病毒的致病机理以及抗病毒生物制剂研发等提供参考.
为确诊云南某蛋鸡场疑似传染性法氏囊病病原及了解其遗传进化情况,研究通过实验室检测结合临床症状、病理解剖等方法,对发病鸡进行病原鉴定.结果显示:死亡鸡只剖检可见胸肌腿肌出血、法氏囊肿大等IBD特征性病变;VP1、VP2代表区段遗传进化显示,该毒株属于IBDV血清1型,VP2位于超强毒株分支,VP1位于独特型分支,与参考毒株氨基酸相比,VP1片段在第8位(V→L)发生变异,VP2片段在第20位(D→N)、第192位(V→I),且VP1和VP2与重组超强毒株HLJ0504核苷酸同源性分别为98.0%和97.7%、氨基酸同源性分别为99.7%和100.0%.表明该鸡场本次疫病病原为IBDV重组超强毒株.
黑水虻幼虫营养丰富,蛋白质含量较高,氨基酸组成均匀,富含多种脂肪酸,是一种优良的蛋白质与油脂饲料资源.此外,还含月桂酸、己二酸和内源性抗菌肽等抗菌成分,具有潜在的促机体生长发育和调节免疫的功能.为了掌握其对肉鸡免疫增强效果,本研究对饲喂添加黑水虻幼虫粉饲料的肉鸡,应用ELISA检测试剂盒对C3补体、免疫球蛋白IgA、IgG、鸡白细胞介素6(IL-6)和鸡肿瘤坏死因子α(TNF-α)等相关免疫因子表达情况进行了检测.结果表明对照组与4个处理组间C3、IgA、IgG、IgM和IL-6表达水平存在统计学差异(P<0.05);结合屠宰试验结果,以黑水虻幼虫粉替换15%豆粕,不仅可促进机体生长,对肉鸡免疫也有一定的免疫增强作用,表明黑水虻在养殖业具有良好的应用前景.