目的 研究骨碎补对庆大霉素耳毒性豚鼠耳蜗VDR、CYP27B1及CYP24A1的影响.方法 将30只成年健康雄性豚鼠随机均分为空白组,模型组,骨碎补低、中、高剂量组,维生素D组.空白组腹腔注射生理盐水,其他各组腹腔注射庆大霉素进行造模,均持续21 d.空白组与模型组予生理盐水灌胃;骨碎补低、中、高剂量组,依次予不同剂量的骨碎补灌胃;维生素D组予维生素D灌胃,均持续21 d.采用HE染色法观察豚鼠耳蜗组织病理改变;采用免疫组化法检测耳蜗组织VDR、CYP27B1、CYP24A1蛋白表达情况.结果 与空白组比较,模型组豚鼠有明显耳组织病理改变,耳蜗组织VDR、CYP27B1蛋白表达均降低,CYP24A1蛋白表达升高(P＜0.01).与模型组比较,骨碎补中剂量组及维生素D组耳蜗组织病理改变不同程度减轻,耳蜗组织VDR、CYP27B1蛋白表达水平升高,CYP24A1蛋白表达水平降低(P＜0.01).结论 骨碎补可改善庆大霉素耳毒性影响的豚鼠耳蜗组织,其机制可能与维生素D相关蛋白表达有关.

目的 通过研究黄芪对自发性骨质疏松小鼠肾脏维生素D-FGF23-Klotho轴mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗骨质疏松作用机制.方法 采用10只SPF级SAMR1小鼠为正常对照组,采用50只SPF级自发性骨质疏松模型SAMP6小鼠,随机分为模型组,黄芪低、中、高剂量组[2.4、4.8、9.6g/(kg·d)]及维生素D组(10单位/d),连续干预12周.HE染色观察黄芪对自发性骨质疏松小鼠股骨病理学变化,RT-PCR法和Western Blot法检测黄芪对自发性骨质疏松小鼠肾脏组织VDR、FGF23、KlothomRNA及蛋白表达的情况.结果 与正常组比较,模型组小鼠HE染色镜下股骨可见网状结构破坏,骨小梁数量减少,间隙增大,连接断裂,出现明显骨髓空腔.与模型组相比,黄芪低、中、高剂量组及维生素D组HE染色镜下可见网状结构排列较有序,骨小梁变粗,数量增多,骨小梁断裂点减少.与正常组比较,模型组小鼠肾脏组织FGF23mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.01),VDR、Klotho mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.01);与模型组比较,黄芪中、高剂量组均可显著降低小鼠肾脏组织FGF23 mRNA和蛋白表达量(P＜0.01),显著升高VDR、Klotho mR-NA 和蛋白表达量(P＜0.01);维生素D组可显著降低小鼠肾脏组织FGF23 mRNA和蛋白表达量(P＜0.01)、显著升高小鼠肾脏VDR、Klotho mRNA和蛋白表达量(P＜0.01).结论 黄芪防治骨质疏松其机制可能与通过调节自发性骨质疏松小鼠肾脏中VD-FGF23-Klotho轴有关.

目的:对比研究不同剂量的红景天破壁饮片对小鼠的急性肝肾毒性.方法:将40只清洁级昆明小鼠随机分成空白组对照组、红景天破壁饮片低、中、高剂量组,每组10只,雌雄各半,禁食不禁水12 h后,分别给予红景天破壁饮片低、中、高剂量(29.578mg/g、34.797mg/g、40.938mg/g),空白组给于相同体积的蒸馏水,每天灌胃3次.连续给药14天后,观察小鼠一般体征及各脏器指数;检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血糖(Glu)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)的含量;HE染色观察小鼠肝肾组织病理变化.结果:与空白组比较,红景天破壁饮片各剂量组小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量及小鼠脏器指数差异均不显著(P＞0.05);与空白组比较,各给药剂量组肝肾组织HE染色差异均不显著(P＞0.05).结论:红景天破壁饮片不会引起小鼠机体肝肾等组织的毒副反应,安全性较高.

目的 研究淫羊藿苷对维甲酸致骨质疏松(OP)大鼠血清中骨钙素(OC)、大鼠骨骼组织中OC mRNA及蛋白表达的影响,探讨淫羊藿苷对维甲酸诱导大鼠OP的保护作用机制.方法 48只雌性SPF级SD大鼠分为空白对照组、模型组、维生素D组、淫羊藿苷高剂量组、淫羊藿苷中剂量组、淫羊藿苷低剂量组,每组8只.除空白对照组外,其余组行维甲酸100 mg/(kg?d)灌胃持续2周造模.造模结束后,各组对应药物灌胃6周.HE染色光镜下观察各组大鼠骨质的病理情况;ELISA法检测大鼠血清OC的水平;RT-qPCR法检测大鼠骨骼OC mRNA的表达情况;Western-blot法检测大鼠骨骼OC蛋白的含量.结果 HE染色结果显示与空白对照组比较,模型组光镜下可见骨小梁变薄、变细、稀疏断裂不连接,网状结构被破坏,而骨髓腔面积百分数增加;与维甲酸模型组比较,药物干预组骨小梁变粗,数目显著增加,网状结构部分恢复,破骨细胞减少,成骨细胞增多,骨髓腔变小且规则分布.ELISA结果显示,与空白对照组比较,模型组的OC水平较高(P<0.01);与模型组比较,淫羊藿苷各剂量组OC水平较低(P<0.05);与模型组比较,维生素D组OC水平显著降低(P<0.01).RT-PCR结果表明,与空白对照组相比,模型组的骨骼OC mRNA表达显著升高(P<0.01);与模型组比较,药物干预组的骨骼OC mRNA表达均显著下调(P<0.01).Western-blot结果显示,与空白对照组相比,模型组的骨骼OC蛋白显著升高(P<0.01);与模型组相比,淫羊藿苷高、中剂量组和维生素D组骨骼OC蛋白表达均显著下调(P<0.01).结论 淫羊藿苷对OP具有治疗作用,其作用与调节OC水平有关.

目的 通过研究当归补血汤对维甲酸诱导的骨质疏松(OP)大鼠肾脏中维生素D受体(VDR)、25羟基维生素D-1α羟化酶(CYP27B1) mRNA及蛋白表达情况的影响,初步探讨其对干预OP的分子机制.方法 实验分为6组:对照组、模型组[维甲酸100mg/(kg·d)]、维生素D组(骨化三醇30ng/kg)、当归补血汤高剂量组(7.2g/kg)、当归补血汤中剂量组(3.6g/kg)、当归补血汤低剂量组(1.8g/kg).使用酶联免疫检测法(ELISA)检测大鼠血清25-羟基维生素D3[25(OH)D3]、骨钙素(BGP)含量;实时荧光定量PCR法(RT-PCR)及蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测大鼠肾组织中VDR、CYP27B1 mRNA及蛋白表达的影响.结果 与对照组比较,模型组血清25 (OH) D3、肾脏CYP27B1 mRNA及蛋白表达水平显著下降(P＜0.01),血清BGP、肾脏VDR mRNA及蛋白表达水平显著上升(P＜0.01).与模型组比较,维生素D及当归补血汤高、中剂量组血清25 (OH) D3水平显著上升(P＜0.01);维生素D及当归补血汤高、中、低剂量组血清BGP水平显著下降(P＜0.01);维生素D及当归补血汤高、中剂量组肾脏VDR mRNA及蛋白表达水平显著下降(P＜0.01),肾脏CYP27B1 mRNA表达水平上升(P＜0.05,P＜0.01);维生素D及当归补血汤高、中、低剂量组肾脏CYP27B1蛋白表达水平显著上升(P＜0.01).结论 当归补血汤通过调节肾脏组织中VDR、CYP27B1 mRNA及蛋白表达情况,改善血清25 (OH) D3、BGP水平,发挥其干预OP的作用.

Spontaneous senile osteoporosis severely threatens the health of the senior population which has emerged as a severe issue for society. A SAMP6 mouse model was utilized to estimate the impact of intragastrically administered Astragalus Membranaceus (AR) on spontaneous senile osteoporosis. Bone mineral density (BMD) and bone microstructure were measured using Micro-CT; contents of calcium and phosphorus were determined with the colorimetric method; and gene and protein expressions of fibroblast growth factor 23 (FGF23), Klotho, Vitamin D receptor (VDR), CYP27B1 and CYP24A1 were detected using qPCR, Western blot and ELISA assays, respectively. The findings indicated that AR could improve the femoral BMD and bone microstructure, elevate the contents of calcium and phosphorus, and increase the expression of Klotho, VDR, and CYP27B1 whereas decreasing the expression of FGF23 and CYP24A1 in SAMP6 mice in a dose independent manner. The present study has demonstrated that AR can promote osteogenesis and alleviate osteoporosis. It is also expected to provide a new insight for the treatment of spontaneous senile osteoporosis and to serve as a research basis for AR application.

目的 初步探讨红景天破壁饮片与传统饮片对心肌梗死大鼠的保护作用及其机制,并对两种不同加工方式的红景天药效差异进行对比研究.方法 采用冠状动脉结扎术复制大鼠急性心肌梗死模型,随机分为假手术组,模型组,阳性药物组(卡托普利10.5 mg/kg),红景天破壁饮片低、中、高剂量组(0.27 g/kg、0.54 g/kg、1.08 g/kg),红景天传统饮片低、中、高剂量组(0.27 g/kg、0.54 g/kg、1.08 g/kg).采用心脏超声法检测大鼠心功能的变化情况;ELISA法检测大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)含量变化;HE染色法检测大鼠心肌组织的病理变化;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白相对表达量情况.结果 心脏超声法结果提示,与模型组比较,红景天破壁饮片和传统饮片低、中、高剂量均可显著减小心肌梗死模型大鼠心脏组织LVESD、LVEDD (P ＜0.01),显著升高心肌梗死模型大鼠心脏组织左室LVEF(P ＜0.01);ELISA法检测结果显示,与模型组比较,红景天破壁饮片和传统饮片低、中、高剂量均可显著降低心肌梗死模型大鼠血清CK-MB、cTnI蛋白含量(P＜0.01),其中,红景天破壁饮片高剂量组与正常组、阳性对照组比较均无显著差异(P＞0.05);HE染色病理切片观察显示,红景天破壁饮片高剂量组心脏组织结构完整性较好;与模型组比较,红景天传统饮片低剂量组亦可在一定程度上增加大鼠心脏组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2蛋白相对表达量(P＜0.05);与模型组比较,除红景天传统饮片低剂量组外,各剂量组VEGF mRNA及其蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05),红景天破壁饮片和传统饮片中、高剂量组VEGFR1、VEGFR2mRNA及其蛋白相对表达量均可显著升高(P＜0.01),且同等剂量下红景天破壁饮片优于传统饮片.结论 红景天破壁饮片与传统饮片对大鼠心肌梗死均有保护作用,其机制可能与提高VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白表达水平相关,且相同剂量下红景天破壁饮片的心脏保护作用优于传统饮片.

传统补益中药淫羊藿主要含有黄酮类、多糖类、木脂素和生物碱及其他微量元素和化合物,在现代药理研究中,应用更为广泛,尤其对骨、心血管、生殖等系统中常出现的病症如骨质疏松、心脑血管疾病、生殖功能障碍等有显著疗效.本文总结近年来有关淫羊藿化学成分及其药理作用进行综述,对其开发前景及临床应用进行探究,为淫羊藿继续深入研究奠定理论基础.