目的 通过研究黄芪对自发性骨质疏松小鼠肾脏维生素D-FGF23-Klotho轴mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨其治疗骨质疏松作用机制.方法 采用10只SPF级SAMR1小鼠为正常对照组,采用50只SPF级自发性骨质疏松模型SAMP6小鼠,随机分为模型组,黄芪低、中、高剂量组[2.4、4.8、9.6g/(kg·d)]及维生素D组(10单位/d),连续干预12周.HE染色观察黄芪对自发性骨质疏松小鼠股骨病理学变化,RT-PCR法和Western Blot法检测黄芪对自发性骨质疏松小鼠肾脏组织VDR、FGF23、KlothomRNA及蛋白表达的情况.结果 与正常组比较,模型组小鼠HE染色镜下股骨可见网状结构破坏,骨小梁数量减少,间隙增大,连接断裂,出现明显骨髓空腔.与模型组相比,黄芪低、中、高剂量组及维生素D组HE染色镜下可见网状结构排列较有序,骨小梁变粗,数量增多,骨小梁断裂点减少.与正常组比较,模型组小鼠肾脏组织FGF23mRNA和蛋白表达显著升高(P＜0.01),VDR、Klotho mRNA和蛋白表达显著下降(P＜0.01);与模型组比较,黄芪中、高剂量组均可显著降低小鼠肾脏组织FGF23 mRNA和蛋白表达量(P＜0.01),显著升高VDR、Klotho mR-NA 和蛋白表达量(P＜0.01);维生素D组可显著降低小鼠肾脏组织FGF23 mRNA和蛋白表达量(P＜0.01)、显著升高小鼠肾脏VDR、Klotho mRNA和蛋白表达量(P＜0.01).结论 黄芪防治骨质疏松其机制可能与通过调节自发性骨质疏松小鼠肾脏中VD-FGF23-Klotho轴有关.

Objective To study the efficacy of Xuefu Zhuyu pill combined with nicorandil in the treatment of angina pectoris with heart blood stasis and its influence on hemodynamic indexes. Methods Totally 118 patients with angina pectoris（blood stasis type） were randomized assigned in 1∶1 ratio to the control group and the observation group, the observation group was treated with Xuefu Zhuyu Decoction on the basis of nicorandil（the control group）. The clinical efficacy was counted after 3 courses of treatment（4 weeks as a course of treatment）.The hemorheological indexes, endothelin-1（ ET-1）, homocysteine（Hcy） and serum cardiac troponin T（cTnT）, adverse reactions were included as comparisons.Results After treatment, the total effective rate in the observation group was higher than in the control group（91.52% [54/59] vs 76.27% [45/59], P＜0.05）.The whole blood viscosity（high shear）, plasma viscosity, erythrocyte deformation index, fibrinogen level, ET-1, Hcy and cTnT levels in groups were decreased, the difference in above indexes between groups was statistically significant（P＜0.05）.The incidence of adverse reactions in the observation group were comparable to the control group（13.56% [8/59] vs 10.17% [6/59], P＞0.05）.Conclusion For patients with angina pectoris（blood stasis type）, Xuefu Zhuyu pill combined with Nicorandil is effective. It can improve the hemodynamics and reduce the levels of ET-1, Hcy and cTnT, with good treatment safety.

Objective: Cervical cancer is one of the most common malignant tumors affecting women. It is estimated that 99.6% of cervical cancer patients are caused by persistent infection with human papillomavirus (HPV). The aim of this study was to combine the Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats (CRISPR)/associated proteins (Cas12a) detection system with colloidal gold rapid diagnosis technology to develop a new rapid diagnosis technology for HPV16 nucleic acid detection. Method: Based on the advantages of CRISPR-Cas12a and recombinase polymerase amplification (RPA) technology, this experiment intended to establish an innovative technology suitable for rapid clinical detection of the L1 gene for HPV16 and develop a rapid nucleic acid lysis solution. The RPA technology was developed through primer verification to synthesize a large number of templates for the Cas12a-crRNA cleavage system swiftly. RPA technology was combined with lateral flow test strips to complete the interpretation of the results. The lysate contained 1.5 M guanidine hydrochloride, 50 mM Tris (pH = 8.0), 100 nM NaCl, 5 mM Ethylene Diamine Tetraacetic Acid (EDTA), and 1% Tween-20. Result: In this study, according to the concentration of the template and the results of agarose gel electrophoresis without dragging phenomenon, a third solution was finally determined as the optimal cleavage scheme: 1.5 M guanidine hydrochloride, 50 mM Tris (pH = 8.0), 100 nM NaCl, 5 mM EDTA, 1% Tween-20. After optimization, the optimal concentration of the probe was finally determined as 0.02 mu M. Conclusions: The current study verified the rapid detetion capacity of CRISPR/Cas12a combined with RPA technology, hoping to provide a new technical method for HPV16 detection.

Objective:The data of lung adenocarcinoma- (LUAD-) related gene expression profiles were mined from the Cancer Genome Atlas (TCGA) database using bioinformatics methods and potential biomarkers related to the occurrence, development, and prognosis of LUAD were screened out to explore the key prognostic genes and clinical significance.Methods:Following the LUAD gene expression profile data that were initially exported from the TCGA database, R software DESeq2 was employed to analyze the difference between the expression profiles of LUAD and normal tissues. The R package "clusterProfiler" was subsequently utilized to perform gene ontology (GO) and Kyoto Encyclopedia of Genes and Genomes (KEGG) pathway analyses of the differential genes. A protein-protein interaction (PPI) network was constructed via the String database, and cytohubba, a plugin of Cytoscape, was applied to screen hub genes using the MCC algorithm. The Gene Expression Profile Data Interactive Analysis (GEPIA) was used to analyze expressions of 10 candidate genes in LUAD samples and healthy lung samples, and the selected genes were employed for survival analysis.Results:A total of 1,598 differential genes were identified through differential analyses and data mining, with 1,394 genes upregulated and 204 downregulated. A total of 10 hub genes CCNA2, CDC20, CCNB2, KIF11, TOP2A, BUB1, BUB1B, CENPF, TPX2, and KIF2C were obtained using the cytohubba plugin. The results of the GEPIA analysis indicated that compared with normal lung tissue, the mRNA expression level of the described hub genes in LUAD tissue was significantly increased (P < 0.05). Survival analysis revealed that these genes had a significant impact on the overall survival time of LUAD patients (P < 0.05).Conclusion:The previously described key genes related to LUAD identified in the TCGA database may be used as potential prognostic biomarkers, which will contribute to further comprehension of the occurrence and development of LUAD and provide references for its diagnosis and treatment.

目的:对比研究不同剂量的红景天破壁饮片对小鼠的急性肝肾毒性.方法:将40只清洁级昆明小鼠随机分成空白组对照组、红景天破壁饮片低、中、高剂量组,每组10只,雌雄各半,禁食不禁水12 h后,分别给予红景天破壁饮片低、中、高剂量(29.578mg/g、34.797mg/g、40.938mg/g),空白组给于相同体积的蒸馏水,每天灌胃3次.连续给药14天后,观察小鼠一般体征及各脏器指数;检测小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血糖(Glu)、总胆固醇(TC)及甘油三酯(TG)的含量;HE染色观察小鼠肝肾组织病理变化.结果:与空白组比较,红景天破壁饮片各剂量组小鼠血清中谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(ALP)、白蛋白(ALB)、尿素氮(BUN)、血糖(Glu)、总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)含量及小鼠脏器指数差异均不显著(P＞0.05);与空白组比较,各给药剂量组肝肾组织HE染色差异均不显著(P＞0.05).结论:红景天破壁饮片不会引起小鼠机体肝肾等组织的毒副反应,安全性较高.

目的:对比研究朱砂及其复方与其他含汞化合物对小鼠肾脏转运体基因表达的影响.方法:清洁级健康雄性成年昆明种小鼠分为生理盐水、朱砂安神丸1.8 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、朱砂0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、高剂量朱砂2g·kg-1(含汞 1.7 g·kg-1)、HgS0.2 g·kg-1(含汞0.17 g·kg-1)、HgCl2 0.032 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1,约1/7朱砂中汞含量)、MeHg0.026 g·kg-1(含汞0.024 g·kg-1,约1/7朱砂中汞含量)组,每天给药1次,连续30d.30 d后处死各组小鼠取肾脏,RT-PCR方法检测小鼠肾组织有机阴离子转运体多肽(Oatp4c1)、胆酸转运体(Ost-α、Ost-β)的表达.结果:与正常组相比,HgCl2组和MeHg组Ost-α、Ost-β基因的表达显著降低(P＜0.05);朱砂安神丸组Oatp4c1基因的表达显著升高(P＜0.05).结论:HgCl2组和MeHg组小鼠肾转运体基因表达与正常组相比有显著性差异,朱砂及朱砂安神丸对肾转运体基因表达影响较小.

目的 通过动物实验对比研究5种不同品系或产地天麻冻干粉抗惊厥及神经保护作用的差异性,筛选药效较佳产地及品系的天麻.方法 清洁级SD大鼠64只,分8组,正常组、模型组(戊四唑80 mg·kg-1)、阳性药对照组(艾司唑仑5 mg·kg-1)、贵州德江红天麻组、贵州大方红天麻组、贵州大方乌天麻组、贵州大方红乌天麻组、云南小草坝红天麻组;分别给予对应产地及品系天麻冻干粉2 g·kg-1.清洁级SD大鼠造模给药后,记录惊厥发作强度判断;用RT-PCR检测GABA、Bcl-2、Bax、Caspase-3 mRNA 表达的情况;用 Western blot 检测 GABA、Bax、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达情况;用HE染色观察大鼠海马CA1、CA3区神经元变性和坏死变化情况.结果 在戊四唑诱导的点燃模型中,5种不同品系或产地天麻冻干粉对大鼠体重及一般情况无明显影响,但均可不同程度降低大鼠惊厥发作强度,延长发作潜伏期(P＜0.01)、减少惊厥发作时间,显著降低Bax、Caspase-3 mRNA和蛋白表达量(P＜0.01),不同程度升高Bel-2、GABA mRNA和蛋白表达量,改善致惊厥大鼠海马神经元细胞的病理形态,并减少神经元损伤和抑制细胞凋亡.结论 贵州大方红天麻组、贵州大方红乌天麻组、贵州德江红天麻组、云南小草坝红天麻组抗惊厥及神经保护作用较贵州大方乌天麻组更佳.

目的 探讨生肌膏对肛周脓肿大鼠术后创面愈合的促进作用,以及对创面组织中Notch1、炎症因子表达水平的影响.方法 取45只SD大鼠,通过背部创面滴加粪液建立肛周脓肿模型;给予建模成功的40只大鼠行脓肿清除术,并将其随机分为模型组与生肌膏治疗组各20只;肛周脓肿清除术后48 h,两组大鼠每天均给予创面滴加粪液并于30 min后清洗,生肌膏治疗组大鼠同时给予涂抹厚生肌膏.另取20只SD大鼠作为对照组,仅行背部创面,每日给予滴加生理盐水和创面清洗.在处理创面后3 d、8 d、13 d和18 d,计算各组大鼠创面愈合率.在处理创面后3 d、13 d和18 d,取各组大鼠创面组织分别行Masson染色法、苏木精-伊红染色以观察创面愈合组织病理学变化.在处理创面后18 d,检测各组大鼠创面组织中Notch1 mRNA和蛋白的表达量,以及肿瘤坏死因子α(TNF-α)、白细胞介素(IL)-1β和IL-6表达水平.结果 创面处理后3 d、8 d、13 d和18 d,生肌膏治疗组、对照组、模型组大鼠创面愈合率依次降低(均P<0.05).Masson染色与HE染色结果提示,随创面愈合时间的延长,各组大鼠肛周脓肿术后创面愈合组织的胶原纤维合成数量和表皮厚度均呈增加趋势;同一时间点模型组胶原蛋白的形成速度最慢、数量最少,表皮厚度最薄,而生肌膏治疗组的胶原纤维合成数量最多,表皮生长状态最好.创面处理后18 d,生肌膏治疗组、对照组、模型组大鼠创面组织的Notch1蛋白及mRNA表达水平依次降低,TNF-α、IL-1β和IL-6表达水平依次升高(均P<0.05).结论 生肌膏可有效促进大鼠肛周脓肿术后的创面愈合,这可能与其激活Notch1信号通路、减轻创面的炎症反应有关.

Spontaneous senile osteoporosis severely threatens the health of the senior population which has emerged as a severe issue for society. A SAMP6 mouse model was utilized to estimate the impact of intragastrically administered Astragalus Membranaceus (AR) on spontaneous senile osteoporosis. Bone mineral density (BMD) and bone microstructure were measured using Micro-CT; contents of calcium and phosphorus were determined with the colorimetric method; and gene and protein expressions of fibroblast growth factor 23 (FGF23), Klotho, Vitamin D receptor (VDR), CYP27B1 and CYP24A1 were detected using qPCR, Western blot and ELISA assays, respectively. The findings indicated that AR could improve the femoral BMD and bone microstructure, elevate the contents of calcium and phosphorus, and increase the expression of Klotho, VDR, and CYP27B1 whereas decreasing the expression of FGF23 and CYP24A1 in SAMP6 mice in a dose independent manner. The present study has demonstrated that AR can promote osteogenesis and alleviate osteoporosis. It is also expected to provide a new insight for the treatment of spontaneous senile osteoporosis and to serve as a research basis for AR application.

目的 初步探讨红景天破壁饮片与传统饮片对心肌梗死大鼠的保护作用及其机制,并对两种不同加工方式的红景天药效差异进行对比研究.方法 采用冠状动脉结扎术复制大鼠急性心肌梗死模型,随机分为假手术组,模型组,阳性药物组(卡托普利10.5 mg/kg),红景天破壁饮片低、中、高剂量组(0.27 g/kg、0.54 g/kg、1.08 g/kg),红景天传统饮片低、中、高剂量组(0.27 g/kg、0.54 g/kg、1.08 g/kg).采用心脏超声法检测大鼠心功能的变化情况;ELISA法检测大鼠血清中肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)含量变化;HE染色法检测大鼠心肌组织的病理变化;实时荧光定量PCR法(RT-qPCR)和蛋白质印迹法(Western blot)检测大鼠心肌组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白相对表达量情况.结果 心脏超声法结果提示,与模型组比较,红景天破壁饮片和传统饮片低、中、高剂量均可显著减小心肌梗死模型大鼠心脏组织LVESD、LVEDD (P ＜0.01),显著升高心肌梗死模型大鼠心脏组织左室LVEF(P ＜0.01);ELISA法检测结果显示,与模型组比较,红景天破壁饮片和传统饮片低、中、高剂量均可显著降低心肌梗死模型大鼠血清CK-MB、cTnI蛋白含量(P＜0.01),其中,红景天破壁饮片高剂量组与正常组、阳性对照组比较均无显著差异(P＞0.05);HE染色病理切片观察显示,红景天破壁饮片高剂量组心脏组织结构完整性较好;与模型组比较,红景天传统饮片低剂量组亦可在一定程度上增加大鼠心脏组织VEGF、VEGFR1、VEGFR2蛋白相对表达量(P＜0.05);与模型组比较,除红景天传统饮片低剂量组外,各剂量组VEGF mRNA及其蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05),红景天破壁饮片和传统饮片中、高剂量组VEGFR1、VEGFR2mRNA及其蛋白相对表达量均可显著升高(P＜0.01),且同等剂量下红景天破壁饮片优于传统饮片.结论 红景天破壁饮片与传统饮片对大鼠心肌梗死均有保护作用,其机制可能与提高VEGF、VEGFR1、VEGFR2mRNA及蛋白表达水平相关,且相同剂量下红景天破壁饮片的心脏保护作用优于传统饮片.

目的 探讨丹参传统饮片、破壁饮片脂溶性成分对缺血缺氧H9c2心肌细胞的保护作用差异及机制,为丹参破壁饮片合理应用提供实验基础.方法 将H9c2心肌细胞随机分组为8组,即正常组;模型组;丹参传统饮片脂溶性成分低、中、高剂量组(8×10-4、2×10-2、5×10-1mg/mL);丹参破壁饮片脂溶性成分低、中、高剂量组(8 ×10-4、2×10-2、5 ×10-1 mg/mL).采用CCK-8法测细胞存活率;比色法测LDH、CK、ATP、MDA、T-SOD含量及活性;RT-PCR、Western blot法分别测Bax、Bcl-2、Caspase3 mRNA及蛋白表达水平.结果 CCK-8法测细胞存活率结果表明,与模型组比较,中、高剂量的丹参传统饮片与破壁饮片均能显著提高缺血缺氧H9c2心肌细胞存活率;比色法结果显示,与模型组比较,不同给药剂量丹参传统饮片、破壁饮片脂溶性成分均能显著降低细胞上清液中LDH含量;传统饮片低、中、高剂量组及破壁饮片中、高剂量组均可显著降低缺血缺氧H9c2细胞内MDA、CK浓度(P＜0.01),传统饮片及破壁饮片中、高剂量组均可显著升高缺血缺氧H9c2心肌细胞T-SOD、ATP浓度(P＜0.01);RT-PCR与Western blot检测结果表明,不同加工方式丹参饮片的脂溶性成分对基因与蛋白含量表达的影响具有一致性,与模型组比较,Bax、Caspase3 mRNA及蛋白相对表达量随着给药剂量的增加而降低,Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量随着给药剂量的增加而升高,二者的中、高剂量组与模型组比较具有显著性差异(P ＜0.01).结论 丹参传统饮片与破壁饮片脂溶性成分均能有效改善心肌细胞缺血缺氧情况,作用机制与其抗氧化与抗细胞凋亡作用相关,且破壁饮片脂溶性成分抗心肌缺血缺氧作用稍弱于传统饮片.

目的 通过研究天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导癫痫大鼠海马组织B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(B-cell leukemia-iymphoma-2,Bcl-2),B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)和y-氨基丁酸转运体1(GAT-1)基因和蛋白的表达影响对神经保护作用机制进行初步探讨,并对三种加工方式的天麻药效差异性药效进行对比研究.方法 以SD大鼠为研究对象,建立戊四唑癫痫模型.随机分为12组,正常组,模型组,丙戊酸钠组,天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)分别对应的低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0 g·kg-1)连续灌胃10d.用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测三种加工方式的天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1基因表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测天麻对戊四唑诱导癫痫海马组织Bax、Bcl-2、Caspase-3和GAT-1蛋白表达情况.结果 模型组癫痫发作强度均为Ⅵ级,表明造模成功.与模型组比较,丙戊酸钠组及天麻普通粉、破壁粉、冻干粉各剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P＜0.05),癫痫持续时间显著缩短(P＜0.05).与丙戊酸钠组比较,天麻普通粉高剂量组、天麻破壁粉高剂量组癫痫潜伏时间无显著差异(P＜0.05),而天麻冻干粉高剂量组癫痫潜伏时间显著延长(P＜0.05),且持续时间与之无显著性差异(P＜0.05).与正常组比较,模型组Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量显著升高(P＜0.05),Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量显著下降(P＜0.05);与模型组比较,丙戊酸钠组和天麻各组可显著降低Bax、Caspase3和GAT-1 mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05),显著升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05).结论 天麻冻干粉高剂量组效果最佳,天麻破壁粉高剂量组次之,最后天麻普通粉高剂量组.天麻对神经的保护具有剂量依赖性,并与天麻不同加工方式相关,其作用机制与调节Bcl-2、Bax、Caspase-3和GAT-1mRNA及蛋白表达水平有关.

目的 通过研究黄芪多糖(APS)对地塞米松诱导的成骨细胞增殖抑制及B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bcl-2-associated X protein gene,Bax)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、维生素D受体(vitamin D receptor,VDR)、1α羟化酶(CYP27 B)、24-羟基化酶(CYP24A)蛋白表达情况的影响对其治疗继发性骨质疏松症作用机制进行初步探讨.方法 实验分为6组,正常组、模型组、黄芪多糖低、中、高剂量组、维生素D组.用噻唑蓝(MTT)比色法检测地塞米松诱导的不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24h、36h、48h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响.蛋白免疫印迹法(Western Blot)检测黄芪多糖对地塞米松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞Caspase-3、Bax、VDR、CYP27B、CYP24A蛋白的表达情况.结果 MTT法显示,与模型组比较,黄芪多糖高剂量组在24h、36h、48h可显著改善地塞米松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用(P＜0.01),维生素D组改善地塞米松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用效果与黄芪多糖中剂量组接近(P＜0.05).Western Blot检测结果显示,与模型组比较,黄芪多糖各剂量组及维生素D组对地塞米松诱导的MC-3T3-E1成骨细胞中Bax、Caspase-3蛋白表达均有显著抑制作用(P＜0.01),同时黄芪多糖中高剂量组与维生素D组均可显著上调VDR、CYP27B蛋白表达量(P＜0.01),下调CYP24A蛋白表达量(P＜0.01),且黄芪多糖高剂量组效果优于维生素D组.结论 黄芪多糖及维生素D防治地塞米松诱导的继发性骨质疏松的机制与通过抑制促细胞凋亡因子Bax、Caspase-3蛋白表达,降低地塞米松对MC-3T3-E1成骨细胞增殖抑制作用相关,VDR蛋白在其中或发挥积极作用.

目的 探讨天麻不同加工方法(普通粉、破壁粉、冻干粉)对戊四唑诱导的惊厥大鼠海马组织的神经保护作用并对普通粉、破壁粉、冻干粉的效应进行对比.方法 建立戊四唑(PTZ)惊厥模型,SD大鼠随机分为正常组、模型组、天麻(普通粉、破壁粉、冻干粉)分别对应的低、中、高剂量组(0.5、1.0、2.0g/kg),阳性组.用苏木素伊红(HE)染色观察不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥大鼠的海马CA1病理形态学改变情况,用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)法检测不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥海马组织GABA mRNA表达影响情况;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同天麻加工方法对戊四唑诱导的惊厥海马组织GABA蛋白表达情况.结果 模型组有大量的神经细胞变性坏死,与模型组比,阳性组与天麻冻干粉高剂量组未见明显病变、治疗效果较好,天麻普通粉低、中剂量组和天麻破壁粉低剂量组的组织病变较重,显示治病疗效果欠佳,其余各组治疗效果介于之间.与正常组比较,模型组海马组织GABA mRNA和蛋白相对表达量显著下降(P＜0.05);与模型组比较,阳性组和天麻不同加工方法组均可显著升高海马组织GABAmRNA和蛋白相对表达量(P＜0.05),且天麻冻干粉及破壁粉不同程度的优于普通粉.结论 天麻破壁粉、冻干粉均可以保护大鼠海马CA1组织学结构,其神经保护作用与天麻不同加工的方法及剂量相关,三种的天麻同等剂量对大鼠神经保护作用基本上呈:冻干粉＞破壁粉＞普通粉.三种不同加工方法的天麻对大鼠的神经保护作用机制与调节大鼠海马组织GABA mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:研究天麻普通粉、 破壁粉、 冻干粉对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织γ-氨基丁酸转氨酶(7-Ami-nobutyrate transaminase,GABA-T)mRNA及蛋白表达的影响,初步探讨天麻破壁粉、 冻干粉对神经细胞的保护作用机制,并对3种不同加工工艺的天麻的效应差异性进行对比,为合理使用不同加工工艺的天麻提供实验参考.方法:利用戊四唑惊厥模型,将SD大鼠随机分为正常组,模型组,阳性对照组,天麻(普通粉、 破壁粉、 冻干粉)低、 中、 高剂量组(0.5、1.0、2.0 g/kg).用荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T mRNA表达的情况;用蛋白免疫印迹法(Western blot)检测不同工艺的天麻对戊四唑诱导惊厥大鼠海马组织GABA-T蛋白表达情况.结果:RT-PCR和WB检测显示,模型组大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量显著升高(P<0.05);与模型组比较,阳性对照组和天麻各组均可显著降低大鼠海马组织GABA-T mRNA和蛋白相对表达量(P<0.05),天麻冻干粉和破壁粉抗惊厥效果不同程度优于天麻普通粉,其中冻干粉的效果优于破壁粉,破壁粉的效果优于普通粉,且在一定范围内呈量效关系.结论:天麻冻干粉和破壁粉对戊四唑诱导惊厥大鼠的神经保护作用效果强于普通粉,与加工方式有关,且呈量效关系,其作用机制可能与大鼠海马组织GABA-T mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:在细胞水平上探讨红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的保护作用并对比两种饮片药效差异.方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,实验分为八组,分别为正常组:正常培养基培养8h;模型组:无糖无血清的培养基置于缺氧盒37℃密闭缺氧培养8h;给药组:模型组+红景天传统饮片和破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg·mL-1)进行相关指标检测.采用细胞增殖及毒性检测试剂盒(Cell Counting Kit-8)法检测药物对细胞存活率的影响,比色法检测各组细胞培养液中乳酸脱氢酶(Lactate dehydrogenase LDH)含量及细胞内丙二醛(Malonic dialdehyde MDA)、肌酸激酶(Creatine kinase CK)、总超氧化物歧化酶(Superoxide dismutase T-SOD)、三磷酸腺苷(Adenosine triphosphate ATP)含量.实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-time PCR)和蛋白免疫印迹法(Western blot)检测各组细胞中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase3) mRNA和蛋白相对表达量.结果:与正常组比较,模型组H9c2心肌细胞培养液LDH含量、细胞内MDA、CK含量、细胞Caspase3 mRNA及蛋白相对表达量均显著升高(P＜0.05),细胞内T-SOD、ATP含量均显著降低;与模型组比较,红景天破壁饮片与传统饮片各剂量组均可显著降低H9c2心肌细胞培养液LDH活性,细胞内MDA、CK含量,升高T-SOD、ATP含量(P＜0.05),显著降低受损H9c2心肌细胞Caspase3 mRNA和蛋白相对表达量(P＜0.05),且破壁饮片不同程度优于传统饮片.结论:红景天破壁饮片与传统饮片通过抑制氧化应激损伤,提高细胞活力对H9c2心肌细胞起保护作用,且红景天破壁饮片对H9c2心肌细胞损伤的保护作用优于传统饮片,作用机制可能与调控H9c2心肌细胞的MDA、CK、T-SOD、ATP含量及调节Caspase3 mRNA及蛋白表达水平有关.

目的:通过研究红景天破壁饮片与传统饮片对缺血缺氧H9c2心肌细胞的增殖及B细胞白血病-淋巴瘤-2基因(Bcl-2)、B细胞白血病淋巴瘤相关蛋白基因(Bax)mRNA和蛋白表达的影响,初步探讨红景天心肌保护作用机制,并对两种饮片的效应差异性进行对比.方法:以H9c2心肌细胞为研究对象,分为正常组、模型组、红景天传统饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200 mg/mL)、红景天破壁饮片低、中、高剂量组(0.002、0.020、0.200mg/mL);H9c2心肌细胞给药后在缺血缺氧条件下培养8h,试剂盒检测各组细胞存活率;PCR法检测各组细胞Bcl-2、Bax mRNA相对表达量;Western Blot法检测各组细胞Bax、Bcl-2蛋白相对表达量.结果:与模型组比较,红景天破壁饮片低、中、高剂量组及红景天传统饮片高剂量组均可显著提高H9c2细胞的存活率(P＜0.05),相同剂量下,给予红景天破壁饮片的H9c2细胞存活率在不同程度上优于红景天传统饮片;红景天破壁饮片与传统饮片均可显著降低缺血缺氧H9c2细胞Bax mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05),升高Bcl-2 mRNA及蛋白相对表达量(P＜0.05).结论:红景天改善缺血缺氧H9c2心肌细胞存活率、抗细胞凋亡作用具有剂量依赖性,且红景天破壁饮片的保护作用优于传统饮片,其作用机制与调节H9c2心肌细胞Bcl-2、Bax mRNA及蛋白表达有关.

目的:比较不同剂量的天麻破壁粉、冻干粉对小鼠的急性肝肾毒性.方法:将清洁级昆明种小鼠100只随机分为10组,分别为丙戊酸钠低、中、高剂量组(0.3 g/kg、0.6 g/kg、0.9 g/kg),天麻(破壁饮片、冻干粉)低、中、高剂量组(15 g/kg、30 g/kg、45 g/kg),正常组(给予等量生理盐水),每天灌胃3次,连续给药14天.14天后断头采集小鼠血液,取小鼠完整肝脏及肾脏,检测小鼠血清谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、碱性磷酸酶(AKP)、单核细胞趋化蛋白-1(MCP-1)、尿酸(UA)、尿素氮(BUN)、肌酐(Cr)含量,HE染色观察大鼠肝肾组织病理变化.结果:与正常组比较,天麻破壁粉和冻干粉低、中、高剂量组体重、一般情况和血清ALT、AST、AKP、UA、BUN、Cr均未见显著变化(P>0.05),天麻破壁粉和冻干粉高剂量组MCP-1水平显著升高(P<0.05);光镜下显示,天麻破壁粉低剂量组和冻干粉低、中剂量组肝肾病理损伤与正常组无明显差异(P>0.05).结论:给予小鼠10倍临床等效剂量的天麻破壁粉及20倍临床等效剂量的天麻冻干粉均未引发小鼠机体肝肾组织的明显毒性反应.

目的:通过研究黄芪多糖对成骨细胞增殖及1α羟化酶(CYP27B),24-羟基化酶(CYP24A)基因与蛋白表达情况的影响对其治疗骨质疏松症(OP)作用机制进行初步探讨.方法:以MC-3T3-E1成骨细胞为研究对象,实验分为5组,分别为正常组,维生素D组(1 ×10-5 mmol·L-1),黄芪多糖高、中、低剂量组(10,1,0.1 mg·L-1).用噻唑蓝(MTT)比色法检测不同浓度的黄芪多糖在不同时间(24,36,48 h)对MC-3T3-E1成骨细胞增殖率的影响.实时荧光定量聚合酶链式反应法(Real-timePCR)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B mRNA的表达情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测黄芪多糖对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27B蛋白的表达情况.结果:MTT比色法显示黄芪多糖的质量浓度在0.1,1,10 mg·L-1时可以提高MC-3T3-E1成骨细胞的增殖率,且在48 h促增殖作用最佳.Real-time PCR,Western blot检测结果显示,与正常组比较,维生素D组MC-3T3-E1成骨细胞CYP27B mRNA表达量、蛋白表达量有显著促进作用(P＜0.05);与维生素D组比较,黄芪多糖在质量浓度为10,1,0.1mg· L-1时对MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A mRNA表达量、蛋白表达量有显著抑制作用(P＜0.05).结论:黄芪多糖能够治疗骨质疏松症其机制与提高成骨细胞活性及调节MC-3T3-E1成骨细胞CYP24A,CYP27BmRNA及蛋白表达水平有关.

目的:分析葛根与骨质疏松症联系的研究现状,观察该领域热点、主要研究方向等.方法:通过GoPubMed查找搜集文献资料,同时基于Statistics展开计量分析.结果:收集相关文献17篇,得出排名靠前的研究关键词、核心作者及合作群、核心期刊、发表论文国家及研究地域分布等.结论:该方面成果产出总体较少,研究尚处于起步阶段;近年可能存在突破性发现,研究热度呈上升趋势;与其他国家相比,目前国内研究存在微弱优势,国内外科研团队合作有待加强.