Практика засвідчує, що за останнє десятиліття одним із основних способів боротьби, профілактики та підтримання епізоотичного благополуччя щодо зоонозних інфекційних агентів в тваринницькій галузі України, а у птахівничій зокрема, залишається дезінфекція із постійним прагненням виробників до розробки дешевих, багатокомпонентних, бактерицидно ефективних дезінфікуючих засобів. На першому етапі для експериментальних досліджень in vitro розробленого дезінфікуючого засобу «Діолайд» з метою вивчення його бактерицидної активності та відсутності бактеріостатичного ефекту застосовували суспензійний метод з використанням тестових та культур мікроорганізмів: грампозитивних – Staphylococcus aureus АТСС 25923 грамнегативних – Pseudomonas aeruginosa АТСС 15442, які характеризувались типовими біологічними характеристиками та проявляли стійкість до дії стандартних дезінфікуючих розчинів – 0,02 % р-ну хлораміну за експозиції 5 хв; 2,0 % р-ну перекису водню та 0,03 % р-ну глутарового альдегіду за експозиції 10 хв та 0,025 % р-ну АДБАХ за експозиції 20 хв. Для випробувань використовували виготовлені добові бактеріальні суспензії тестових культур означених мікроорганізмів у концентрації 0,5 ОО порівняльним методом з оптичним стандартом каламутності за МакФарландом. Експериментально досліджували чотири робочі розведення нового дезінфектанту «Діолайд» за двома (1+2) активними компонентами у відсотках: 0,04 % (100 мг/дм за двоокисом хлору); 0,06 % (150 мг/дм ); 0,1 % (250 мг/дм ) та 0,16% (400 мг/дм за двоокисом хлору відповідно). Оцінку ефективності робочих розчинів нового дезінфектанту «Діолайд» проводили за експозицій 30 і 60 хв. Після закінчення термінів експозицій для негайного припинення дії дезінфектанту до кожного із розведень додавали подвійний об’єм стерильного фізіологічного розчину та надалі проводили триразове відмивання від залишків дезінфектанту і осадження дослідних тестових бактерій шляхом центрифугування при 4 тис. об/хв протягом 10 хв. Відмиті від дезінфектанту тестові культури Staphylococcus aureus АТСС 25923 та Pseudomonas aeruginosa АТСС 15442 для визначення наслідків бактерицидної дії дослідного засобу висівали на чашки Петрі з триптон- соєвим агаром, для виявлення бактеріостатичного ефекту – на пробірки з триптон-соєвим бульйоном та культивували за температури 37±1,0 С протягом 24–48 на твердому і 48–72 год на рідкому поживних середовищах відповідно. За аналізом результатів досліджень нами було встановлено найменшу бактерицидно ефективну концентрацію нового дезінфекційного засобу «Діолайд» на рівні 0,06 % (150 мг/дм за двоокисом хлору) і вищих, яка за 30 хв забезпечує повне знешкодження тестових культур Staphylococcus aureus АТСС 25923 і Pseudomonas aeruginosa АТСС 15442 та не проявляє бактеріостатичних властивостей.
Через поширення стійкості мікроорганізмів до багатьох дезінфектантів актуальним є пошукнових, ефективних і дешевих засобів. Метою роботи було визначення часової експозиції, ефективноїбактерицидної концентрації, відсутності бактеріостатичного ефекту нового дезінфікуючогозасобу «Діолайд» за дії на тест-культуру E. coli АТСС 25922; визначення фенольного коефіцієнту табілкового індексу. Визначення бактеріостатичних властивостей і оптимальної бактерицидноїконцентрації «Діолайд» проводили з робочими розчинами 0,04 (100 мг/дм3 за двоокисом хлору); 0,06(150 мг/дм3); 0,1 (250 мг/дм3) та 0,16 % (400 мг/дм3) після їх дії на E. coli АТСС 25922 за експозицій 30 і60 хв суспензійним методом з відмиванням бактерій від дезінфектанту, подальшими посівами та їх обліком.Фенольний коефіцієнт визначали методом серійних розведень «Діолайд» і фенолу від концентрації 1:50 до1:2834,7 за дії на E. coli АТСС 25922 протягом 10 і 30 хв. Білковий коефіцієнт визначали зE. coli АТСС 25922 за експозицій 10 і 30 хв, методом подвійних серійних розведень «Діолайд» окремо та упоєднанні з інактивованою сироваткою крові для імітації білкового забруднення. Методи: мікроскопічний,культуральний, біохімічний, статистичний. За аналізом результатів досліджень розведення«Діолайд» у концентраціях 0,06; 0,1 та 0,16 (%) за експозиції 30 і 60 хв проявляли ефективнубактерицидну дію за відсутності бактеріостатичного ефекту, що засвідчено повною відсутністюросту E. coli АТСС 25922 на середовищах протягом терміну інкубування 48 та 72 год, за їїінтенсивного росту у контролях. Встановлено, що фенольний коефіцієнт «Діолайд» відповідавпоказнику 12,7. Білковий індекс складав 2,76 одиниць, засвідчуючи, що за білкової забрудненостіповерхонь, призначених для дезінфекції «Діолайд», його бактерицидна ефективність знижувалася в2,76 рази. Отже, робочі розчини «Діолайд» за концентрації 0,06 % (150 мг/дм3 за двоокисом хлору) івищих за дії 30 хв і довше, забезпечували повне знешкодження E. coli АТСС 25922 без проявубактеріостатичного ефекту. Фенольний коефіцієнт «Діолайд» у 12,7 разів перевищував показникифенолу. Білковий індекс «Діолайд» підтверджував зниження бактерицидної ефективності забілкового забруднення у 2,76 разів.
The article presents the results of studies of caecum samples (cecal appendages) with contents from cattle, pigs, and poultry following the State Monitoring Plan for Antimicrobial Resistance in Veterinary Medicine for 2021, isolated and identified isolates of zoonoses and commensal microorganisms, namely: Escherichia coli, Salmonella spp., Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Campylobacter spp. The disk diffusion method conducted a study on determining antimicrobial sensitivity to antibacterial drugs. The results of studies on identifying acquired resistance mechanisms to antibacterial drugs are also presented. Interpretation of growth retardation zones was carried out following EUCAST requirements. As a result of the obtained data, 448 isolates were isolated and identified among 2120 samples submitted for research: E coli accounted for 37.7 %, Salmonella spp. – 4.24 %, Enterococcus faecium – 12.7 %, Enterococcus faecalis – 37.9 %, Campylobacter spp. – 7.4 % of all isolated isolates. When determining the sensitivity to antibacterial drugs, eight sensitive isolates were found. 237 isolates were monoresistant (sensitive to 1–2 ABP), and 203 were polyresistant (sensitive to 3 or more ABP). As a result of the research, production (ESBL) was detected and confirmed in ten Escherichia coli strains. Three vancomycin-resistant strains of Enterococcus faecium, and Enterococcus faecalis were identified. Study the prevalence of Escherichia coli, Salmonella spp., Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Campylobacter spp. circulating in Ukraine. will promote a standardized approach to data collection, analysis, and sharing on a global scale and will ensure the fulfillment of the National Action Plan for Combating Antibiotic Resistance to Antimicrobial Drugs tasks. Ukraine has developed a National Action Plan to combat antimicrobial resistance. In the countries of the European Union, there is constant monitoring for Escherichia coli, Salmonella spp., Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Campylobacter spp. The prospect of further research is to continue monitoring antimicrobial resistance against zoonoses and commensal bacteria, namely: isolates of Escherichia coli, Salmonella spp., Enterococcus faecium, Enterococcus faecalis, Campylobacter spp., as they play an important epidemiological role among infectious diseases common to humans and animals, determining their sensitivity and identifying acquired mechanisms of resistance to antibacterial drugs.
Птахівнича галузь України потребує швидкої модернізації для зменшення собівартості продукції з дотриманням високих стандартів її якості. В комплекс необхідних для цього заходів входить впровадження новітніх природоохоронних екологічно-безпечних технологій та забезпечення біологічного захисту птиці, тварин, людини і довкілля, що можна забезпечити якісною дезінфекцією із застосуванням нових ефективних, безпечних і дешевих дезінфекційних засобів. Новий дезінфектант “Діолайд” здатен забезпечити такі вимоги, про свідчать результати проведених лабораторних випробувань з визначення його оптимальних концентрацій за симуляції білкового забруднення з використанням тест-об’єктів у вигляді кахельних плиток, на які наносили добові тестові культури окремо Staphylococcus аureus АТСС 25923 і Pseudomonas aeruginosa АТСС 15442 та стерильну інактивовану сироватку крові великої рогатої худоби в якості білкового забруднювача. Дослідження робочих розчинів “Діолайд” 0,04 % (100 мг/дм3 за двоокисом хлору); 0,06 % (150 мг/дм3); 0,1 % (250 мг/дм3) і 0,16 % (400 мг/дм3) аналогічно та проводили триразово за експозицій 20, 30 і 60 хв. Після посівів та їх інкубування ефективність різних концентрацій нового дезінфектанта “Діолайд” визначали її спроможністю забезпечувати 99,99 % загибелі оброблених тестових бактерій. Одержані результати експерементів показали неефективність усіх робочих розчинів нового дезінфектанту за експозиції 20 хв, що було підтверджено ростом тестових культур у всіх посівах. Застосування експозиції у 30 хв виявилося ефективним, оскільки за дії робочих розчинів, починаючи від 0,06 % і вищих концентрацій дезінфікуючого засобу “Діолайд” спостерігалося повне знешкодження тестових бактерій, що підтверджувалося повною відсутністю їх росту на середовищах за інтенсивного росту у контролях. За аналізом проведених експериментів встановлено найбільш оптимальну концентрацію робочого розведення нового дезінфектанта “Діолайд” на рівні 0,06 % (150 мг/дм3 за двоокисом хлору), оскільки за його дії протягом 30 хв і довше в умовах імітації білкового забруднення забезпечувалося повне 100,0 % знешкодження тестових бактерій Pseudomonas aeru ginosa АТСС 15442 та Staphylococcus aureus АТСС 25923.
Among the acquired mechanisms of resistance to antibiotics of microorganisms, the production of beta-lactamases, enzymes that inactivate penicillins, cephalosporins, carbapenems, and monobactams, is widespread. Most often, such beta-lactamases, in particular ESBL (extended-spectrum beta-lactamases), are capable of destroying III and IV generations of cephalosporins. One of the important ESBL producers is Escherichia coli and, to a lesser extent, Salmonella enteritidis, which are clinically significant in animals and humans. The purpose of the study was to screen ESBL DDM using cephalosporin markers and screening of mobile extrachromosomal factors of bacterial heredity – plasmids (potentially dangerous factors of genetic transport) in isolates of E. coli and S. enteritidis, polyresistant to aminoderms, from environmental objects, patho- and biological material, raw materials and products of animal origin. Results of our studies have shown the level of their distribution among animals, poultry, since from 13 field isolates of E. coli isolated from the milk of cows with mastitis and pathological material from pigs, ESBL production was found in 3 strains (23.1%) and from 18 field isolates of S. enteritidis isolated from pathological material from poultry, ESBL production was found in 2 strains (11.1%). Based on the results of molecular genetics studies, the presence of resistance plasmids (R-plasmids) in 9 field E. coli isolates was confirmed, 4 of which produced acquired beta-lactamases, incl. ESBL and 8 field isolates of S. enteritidis, 7 of which confirmed the presence of acquired carbapenemases.
Державна служба України з питань безпечності харчових продуктів та захисту споживачів