Daphnis nerii(Linnaeus)is a notorious pest that has a wide geographic distribution.In this study,we employed a mechanical crushing method to establish primary cultures of Daphnis nerii eggs and determined Grace's insect medium as the most optimal culture medium.Primary culture of Daphnis nerii embryonic cells lasted up to 12 months,and various forms of primary cells were differ-entiated in the primary culture.Our result provides crucial experimental basis for establishing Daph-nis nerii cell lines in future research.

从自然死亡的雀纹天蛾幼虫分离到一株雀纹天蛾核型多角体病毒.通过扫描及切片透射电镜发现,该病毒为单粒包埋型核型多角体病毒,命名为ThjaSNPV(Theretra japonica single nucleopolyhedrovirus).病毒全基因组重测序后拼接显示,该病毒基因组全长134 899 bp,GC含量37.28％,与豆天蛾单粒包埋型核型多角体病毒株DZ1基因组序列相似性高达96.24％.ThjaSNPV含有131个开放阅读框(ORF)其中55个为正链基因,76个为负链基因,与宿主同为天蛾科的豆天蛾单粒包埋型核型多角体基因组相比,雀纹天蛾单粒包埋型核型多角体病毒新注释到7个基因:chitin-binding protein(ORF9),ODV-E18(ORF11),-lef-11(ORF27),hypothetical protein(ORF41),lef-10(ORF42),pif-6(ORF66),P6.9(ORF88).ThjaSNPV 的 DNA 光裂酶基因(DNA photolyase,ORF53)中不具有豆天蛾NPV中的1 bp碱基的缺失,只编码一个大的完整DNA裂合酶.38个串联的核心基因的进化分析显示雀纹天蛾NPV与Alphabaculovirus group Ⅱ类群聚类在一起,且和豆天蛾NPV最为相似.

Penicillium oxalicum T1能在9 d内将天然水稻秸秆降解成汤液.从第2天开始pH值急剧下降,第4―6天pH值维持在4左右,到第7天pH值下降到3左右,降解率达64.7％.扫描电镜观察到随着降解时间的延长,稻草秸秆的蜡质和半纤维素层降解脱落,露出纤维素和硅结构,秸秆的表面裂解的情况越来越严重.采用气相色谱-四级杆质谱联用仪检测到汤液中有2-苯乙醇,采用气相色谱检测2-苯乙醇含量为1.0 g/L.

本实验主要研究20亿PIB/mL松毛虫质型多角体病毒悬浮剂防治马尾松毛虫田间药效.实验结果表明:松毛虫质型多角体病毒的致死速度与其剂量有关,在500倍液剂量处理区,在1周内的死亡率达到67.6％,各试剂量区均有明显的持效性.第15天的防效效果为83.5％ ～90.4％;第30天的防效为85.6％ ～95％;松毛虫质型多角体病毒1000倍液剂量与500倍液剂量区与Bt区防治效果差异显著.

根据时代需要,利用环介导等温扩增技术(loop-mediated isothermal amplifcation,LAMP)对新冠病毒进行快速检测,以研发出新冠病毒检测试剂盒.通过NCBI公布的新冠基因组序列分析,获得新冠病毒特异性N蛋白基因的序列;根据该序列信息,在线设计的几对环介导等温扩增引物以供筛选,并利用新冠病毒全基因的反转录质粒,同时通过大量的实验尝试,得到较为稳定的环介导等温扩增体系,再加入具有逆转录活性的Bst 3.0 DNA聚合酶,使体系可扩增RNA模板,最后通过加入适量染料,完成反应结果的可视化.通过不断的实验优化,得到了较为稳定的扩增体系如下:2×Lamp Master Mix 12.5μL,Bst 3.0 DNA聚合酶0.5μL,内引物FIP、BIP(10μM)各2μL、外引物F3、B3(10μM)各0.5μL、模板1μL、ddH2 O 7μL,该体系在65℃下水浴加热1 h即可,同时在体系中加入MnCl2溶液(15 mM)1μL、钙黄绿素(500μM)3μL,使反应结果肉眼可断,加入模板的体系变为绿色,而未加模板的体系为棕黄色.结论:本实验研究的可视化LAMP检测新冠病毒的方法可用于对广大人民群众进行新冠病毒核酸检测.

以甜菜夜蛾幼虫作为替代宿主增殖草原毛虫核型多角体病毒(GrNPV)的研究结果表明,GrNPV在甜菜夜蛾体内连续传代2次后得到了GrNPV-Se2,GrNPV-Se2切片电镜图具有典型的杆状病毒特征.分别提取GrNPV-Se2与GrNPV基因组,电泳结果表明GrNPV-Se2与GrNPV基因组大小相同.设计GrNPV多角体基因引物,对GrNPV-Se2与GrNPV基因组进行PCR验证,结果GrNPV与GrNPV-Se2基因组的多角体基因PCR产物带型相同,表明用甜菜夜蛾幼虫成功增殖了草原毛虫核型多角体病毒GrNPV.

利用（+/-）γ-内酰胺做为唯一碳源从土壤中分离出一株能产生（+）γ-内酰胺酶水解拆分（+/-）γ-内酰胺的菌株。鉴定菌株为Pantoea ananatis Y22。进一步优化了P. ananatis Y22发酵产γ-内酰胺酶的发酵条件和生物转化条件。发现棉子糖为最佳碳源,蛋白胨为最佳氮源; Y22在pH值4～10范围内生长良好,最佳发酵p H值为7,最佳生物转化p H值为8。确定最佳发酵温度为30℃,最佳生物转化温度为30℃。