Die Diagnose primärer systemischer Vaskulitiden gestaltet sich schwierig, da pathognomonische Symptome oftmals fehlen. Daher sollen Methoden im Rahmen der molekularen Bildgebung entwickelt werden, mit denen sich entzündliche Veränderungen der Gefäße nichtinvasiv mittels MRT darstellen lassen.

Ziele: Zelladhäsionsmoleküle der CEACAM-Gruppe werden im Epithelgewebe und Mikrogefäßen verschiedener Karzinome exprimiert. Sie stellen molekulare Zielstrukturen für eine Target-spezifische MR-Bildgebung dar. Das Ziel dieser Studie war eine in-vitro Charakterisierung von Antikörper-SPIO-Konjugaten zur Detektion von CEACAM+ Tumorzellen. Methode: Dextran-beschichtete SPIO-Partikel (Micromod, Rostock) wurden mit mAb T84.1 und IgG kovalent gekoppelt. Die Bindungsaktivität der Antikörper-SPIO-Konjugate wurde mittels ELISA und Fluoreszenzmikroskopie untersucht. CEACAM1 transfizierte CHO-Zellen wurden mit den verschiedenen Partikeln (T84.1-SPIO, IgG-SPIO, SPIO) inkubiert. Anschließend wurden Zellphantome mit 10exp7 CHO-Zellen präpariert und mit einem klinischen 3T-Tomographen (Intera, Philips) untersucht. Es wurden T2*w 2D GRE- und 3D Multi-GRE-Sequenzen akquiriert und die Relaxationsraten R2* für SPIO und Zellphantome bestimmt. Die r2* – Werte der SPIO und die Eisenbeladung der Zellen wurden aus den Ergebnissen berechnet. Ergebnis: ELISA-Test (OD100µl: 0.72 for T84.1-SPIO vs. 0.15 for IgG-SPIO) und Fluoreszenzmikroskopie ergaben eine spezifische Bindungsaktivität der Antikörper-SPIO-Konjugate. In den T2*w Sequenzen stellten sich die Zellen nach Inkubation mit T84.1-SPIO mit deutlichen Signalminderungen im Vergleich zu den Kontrollen dar. Die Relaxivität der SPIO betrug r2*=330 mM-1s-1. Für die Relaxationsraten der Zellphantome wurden Werte von R2*=16,3s-1 (T84.1-SPIO), R2*=7,6s-1 (IgG-SPIO), and R2*=5,3s-1 (SPIO) ermittelt. Die Berechnung der durchschnittlichen Eisenbeladung der Zellen ergab 75 fg Fe (T84.1-SPIO) und 16 fg Fe (IgG-SPIO). Schlussfolgerung: Die Detektion von CEACAM+ Tumorzellen ist unter Verwendung von spezifischen Antikörper-SPIO-Konjugaten mit der MR-Bildgebung in vitro möglich. Weitere Untersuchungen müssen die in-vivo Anwendung dieser Target-spezifischen Kontrastmittel prüfen.

Purpose: Cell adhesion molecules of the CEACAM family are over-expressed in epithelial tissue and microvessels of different carcinomas. The purpose was to detect these antigens with antibody-linked superparamagnetic iron oxide particles (SPIO) in an in-vitro model.