目的 建立超高效液相色谱-串联质谱法(UPLC-MS/MS)测定人血浆中苯磺酸顺阿曲库铵的含量,并应用于临床治疗中监测老年患者手术后血浆中的药物残留.方法 样品经含0.1％甲酸的乙腈溶液蛋白沉淀处理后,采用SHISEIDO(资生堂)ADME(3.0 mm×100 mm,2.7μm)色谱柱,流动相以含0.1％甲酸的2 mmol/L乙酸铵溶液和乙腈溶液(30:70,V/V),等度洗脱.质谱检测选择AJS-ESI离子源正离子模式,多反应监测(MRM)检测离子对为:苯磺酸顺阿曲库铵464.3→358.2(m/z)、维库溴铵(IS)557.4→356.3(m/z).收集老年脊柱手术患者麻醉诱导后、手术结束、术后0.5 h、术后1 h以及自体血回输时刻血袋内的血浆样品,于事先加入2％甲酸水溶液的冻存管中保存,测定样本中的苯磺酸顺阿曲库铵的含量,评估自体血回输对老年患者术后血浆苯磺酸顺阿曲库铵浓度的影响.结果 人血浆中苯磺酸顺阿曲库铵在20～5000 ng/ml范围内线性良好,r=0.9997;批内和批间的精密度RSD<10％、准确度RE

AIM: To investigate the changes of anesthetic drug concentration in plasma during isolation of autologous blood with acute normovolemic hemodiluti-on and its influence on the depth of anesthesia, muscle relaxant effect and blood drug concentration after reinfusion. METHODS: Forty patients of both sexes, aged 20-60 yr, American Society of Anesthesiologists physical status Ⅰ or Ⅱ,hemoglobin（Hb） ＞120 g/L, hematocrit（Hct） ＞35%,undergoing eletive multilevel spinal surgery were included, were divided into 2 groups（n=20 each）using a random number table. ANH group（group A）: ANH was performed after stable induction of anesthesia, the target Hct value was 28%-30%, and autologous blood was reinfused after the main operation steps. Control group（group C）: routine transfusion and infusion treatment. The bispectral index（BIS） and Train-of-Four stimulation（TOF）were observed and recorded at the stable induction of anesthesia（T1）, 30 minutes of stable induction（T2）, the end of operation（T3）, 30 minutes after the end of the operation（T4）, 1 hour after the end of the operation（T5） and 2 hours after the end of the operation（T6）. The concentrations of propofol and cisatracurium besylate in plasma at T1-T6,stored blood at 1 h（TS1）, 2 h（TS2）, and before reinfusion（TS3） were detected by Liquid Chromatographytandem Mass Spectrometry. The extubation time and recovery score at T4-6hours were recorded. RESULTS: There was no significant difference in propofol between the two groups at each time point（P ＞0.05）. The plasma concentration of cisatracurium besylate in group A was higher than that in group C at T3（P＜0.05）. The concentration of two kinds of anesthetic drugs in blood samples decreased slightly with time,but there was no significant difference between groups（P＞0.05）. The BIS value at T4and TOF value at T3in group A were significantly lower than those in group C. The recovery score of group A was lower than that of group C at T4（P＜0.05）.There was no significant difference in extubation time（P＞0.05）. CONCLUSION: The plasma concentrations of propofol and cisatracurium besylate were basically unchanged during the in vitro isolation of ANH autologous blood. The plasma concentrations of cisatracurium besylate were only temporarily affected after the main operation steps, but the postoperative muscle relaxation recovery and recovery quality were not significantly affected.

目的 探讨贮存式自体全血和红细胞成分对骨髓造血干细胞衰老相关指标的影响.方法 健康雄性新西兰家兔30只,3～6月龄,体重2.5～3.0 kg.采用随机数表法将其分为五组:对照组(C组)、单纯手术组(S组)、手术采血组(ABS组)、贮存式自体全血输注组(PAB组)和贮存式自体红细胞输注组(PARB)组,每组6只.C组家兔麻醉后,不做任何处理,按时点采集骨髓标本,其余各组均开腹行肝叶切除,ABS组、PAB组和PARB组于术前1周采血贮存,S组和ABS组术中输液补充血容量,PAB组和PARB组术中分别输注贮存的自体全血和自体红细胞.于麻醉诱导后手术前(T1)、术后6 h(T2)和术后24 h(T3)采集骨髓样本测定家兔CD34+细胞百分比、活性氧(ROS)浓度、衰老细胞比例及衰老相关蛋白(p53、p21)的表达情况.结果 与T1时比较,T2、T3时S组、ABS组、PAB组和PARB组的CD34+细胞百分比明显升高,ROS浓度、衰老细胞比例明显降低,T2时ABS组,T2、T3时S组、PAB组和PARB组p53、p21蛋白含量明显降低(P<0.05).与T2时比较,T3时S组、ABS组、PAB组和PARB组的CD34+细胞百分比明显升高,T3时PARB组衰老细胞比例明显降低,T3时ABS组、PAB组和PARB组p53蛋白含量明显升高,T3时ABS组和PAB组p21蛋白含量明显升高(P<0.05).与C组比较,T2、T3时S组,T1—T3时ABS组、PAB组和PARB组的CD34+细胞百分比明显升高,ROS浓度、衰老细胞比例及p53、p21蛋白含量明显降低(P<0.05).与S组比较,T1时ABS组,T1—T3时PAB组和PARB组CD34+细胞百分比明显升高,T1—T3时ABS组、PAB组和PARB组的ROS浓度明显降低,T1、T2时ABS组,T1—T3时PAB组和PARB组衰老细胞比例和p53、p21蛋白含量明显降低(P<0.05).与ABS组比较,T2、T3时PAB组和PARB组的CD34+细胞百分比明显升高,T1—T3时PAB组和PARB组的ROS浓度明显降低,T2、T3时PAB组和PARB组衰老细胞比例和p53、p21蛋白含量明显降低,T1时PARB组p53、p21蛋白含量明显升高(P<0.05).与PAB组比较,T3时PARB组的CD34+细胞百分比明显升高,T2、T3时PARB组的ROS浓度明显降低,T2时PARB组的衰老细胞比例明显降低(P<0.05).结论 贮存式自体输血在一定程度逆转骨髓细胞衰老表型,促进CD34+细胞生成,从造血干细胞的角度而言,采集并输注红细胞成分比全血更加有益.

目的:观察急性等容血液稀释(ANH)自体血回输对老年骨科手术患者脑电双谱指数与肌松效应的影响,探究含有麻醉药成分的自体血回输对术后麻醉苏醒质量及安全性的影响.方法:择期骨科手术患者40例,年龄65～75岁,体质量55～80 kg,ASAⅠ ～Ⅱ级,预计术中出血量≥600 mL.患者随机分为2组(n=20):A组为进行ANH组,在麻醉诱导平稳后实施ANH,血细胞比容(Hct)目标值28％～30％;B组为对照组,即术中常规补液,不进行ANH.于术毕回输自体血时(T1)、回输10 min(T2)、20 min(T3)、30 min(T4)、40 min(T5)、50 min(T6)、60 min(T7)各时点观测两组患者脑电双频指数(BIS)、四个成串刺激(TOF值)及丙泊酚、顺式阿曲库铵的血浆药物浓度变化;观察并记录术前(T0)及T7时点血气变化,观察患者拔除气管导管的时间以及苏醒质量.结果:A组BIS值在术后T6、T7时点明显低于B组(P<0.05),A组TOF值在T5、T6、T7时点明显低于B组(P<0.05);A组与B组术后丙泊酚、顺式阿曲库铵的血药浓度组间比较差异无显著性(P>0.05);A组在术后T7时点乳酸(Lac)值明显高于B组(P<0.05);A组拔除气管导管的时间明显长于B组(P<0.05);A组Aldrete评分明显低于B组(P<0.05).结论:ANH后术毕自体血回输可增加血浆中麻醉药物浓度,加深患者的麻醉深度,增强肌松效应,使老年患者呼吸功能恢复和拔管时间延迟.

目的 观察输注不同贮存时间的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤的影响.方法 清洁级健康雄性新西兰家兔48只,6月龄,体重2～2.5 kg,采用随机数字表法分为六组:假手术组(S组)、内毒素休克组(ES组)、内毒素休克+输注贮存1 d红细胞组(R0组)、内毒素休克+输注贮存1周红细胞组(R1组)、内毒素休克+输注贮存2周红细胞组(R2组)和内毒素休克+输注贮存3周红细胞组(R3组),每组8只.实验前1 d从家兔耳中央动脉采集15％的血容量模拟家兔失血状态.次日ES组、R0组、R1组、R2组和R3组经耳缘静脉注入脂多糖(LPS)5 mg/kg制备内毒素休克模型,S组静注等量生理盐水.2 h后,S组和ES组给予适量的复方乳酸钠,维持MAP>65 mmHg,R0组、R1组、R2组和R3组分别输注不同贮存时间的红细胞,输注量为8 ml,为家兔血容量的5％,输血后继续输注适量的复方乳酸钠,维持MAP>65 mmHg.采用ELISA法测定血浆IL-1β、IL-8、TNF-α的浓度.处死家兔后取肺组织,采用HE染色法观察肺组织病理变化、肺损伤评分,测定肺湿/干重比值(W/D);检测肺组织中丙二醛(MDA)含量、髓过氧化物酶(MPO)活性和氧化物歧化酶(SOD)活性.结果 与S组比较,ES组、R0组、R1组、R2组和R3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05).与ES组比较,R0组、R1组、R2组和R3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显降低,肺损伤评分、W/D明显减小,肺组织MDA含量明显减少,MPO活性明显降低,SOD活性明显升高(P<0.05).与R0组比较,R1组和R2组血浆IL-8浓度明显升高,R3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R1组、R2组和R3组肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05).与R1组比较,R2组血浆IL-8浓度明显升高,R3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,R1组和R2组肺损伤评分明显升高,肺组织MDA含量明显增加,SOD活性明显降低(P<0.05).与R2组比较,R3组血浆IL-1β、IL-8、TNF-α浓度明显升高,肺损伤评分、W/D明显增大,肺组织MDA含量明显增加,MPO活性明显升高,SOD活性明显降低(P<0.05).结论 输注不同贮存时间的红细胞均可改善内毒素休克家兔急性肺损伤,贮存时间不超过2周的红细胞对内毒素休克家兔急性肺损伤治疗效果更佳.

目的 观察骨科手术患者采取急性等容性血液稀释(ANH)术中自体血回输后对患者脑电双谱指数(BIS)及肌松效应的影响.方法 全身麻醉下骨科手术患者40例,随机分为ANH组(A组)和常规输血输液组(C组).A组患者于麻醉诱导平稳后经桡动脉采集自体血行ANH,主要手术步骤完成后回输采集自体血.C组按常规输血输液处理.分别观察血液稀释前(T1)、血液稀释后即刻(T2)、血液稀释后30 min(T3)、血液回输后(T4)、术毕(T5)患者血流动力学指标、BIS值及肌松效应指标.结果 A组较C组总入量及尿量均增多(P均<0.05);T4时A组HR高于T1和C组(P均<0.05);T3、T4时A组BIS值低于T1和C组(P均<0.05),T5时PTC高于T1(P<0.05).结论 骨科患者应用急性等容血液稀释整个术中肌松效应无明显变化;自体血液回输时脑电双谱指数降低,应减少麻醉药物使用剂量.